Vol.6 No.6Dec. 2020
生物化工
Biological Chemical Engineering
第 6 卷 第 6 期2020 年 12 月
塞来昔布胶囊体外具有区分力溶出曲线的研究
李文强1,2，张玉莉2，陈英2，吴云生，魏小亮2，李百华2
（1.陕西国际商贸学院，陕西咸阳 712000；2.陕西步长制药有限公司，陕西咸阳 712000）
摘 要：目的：建立塞来昔布胶囊具有区分力的溶出曲线测定方法，并考察自制品与参比制剂体外溶出曲线的一致性。方法：以不同pH 溶液为溶出介质，转速为50 r/min，以相似因子（f 2）法评价相似性。结果：所建立的2条溶出曲线具有较好的区分能力，由参比制剂和自制品的溶出曲线的f 2可知，自制品和参比制剂相似。结论：本实验为塞来昔布胶囊体外溶出曲线一致性评价提供了依据。
关键词：塞来昔布胶囊；溶出曲线；高效液相色谱法；区分力中图分类号：R944 文献标识码：A
Study on the Distinguishing Ability Dissolution Curve of Celecoxib Capsules in Vitro
LI Wenqiang 1,2, ZHANG Yuli 2, CHEN Ying 2, WU Yunsheng 2, WEI Xiaoliang 2, LI Baihua 2
(1.Shaanxi Institute of International Trade Commerce, Shaanxi Xianyang 712000; 2.Shaanxi Buchang Pharmaceutical Company Limited, Shaanxi Xianyang 712000)
Abstract: Objective: The dissolution curve of celecoxib capsule with distinguishment was established, and the consistency of dissolution curve between lf-prepared and reference preparation was investigated. Methods: Different pH solutions were ud as medium, the rotation speed was 50 r/min, and the similarity was evaluated by similarity factor (f 2) method. Results: The two dissolution curves established had good distinguishing ability. f 2 of the dissolution curves of reference preparation and lf-made preparation showed that lf-made preparation was similar to the reference preparation. Conclusion: This experiment provides the basis for the consistency evaluation of celecoxib capsule dissolution curve in vitro.
Keywords: celecoxib capsules; dissloution curve; HPLC; distinguishment
塞来昔布是一种选择性环氧化酶-2（COX-2）特异性抑制剂，主要用于缓解成人骨性关节炎、类风湿性关节炎、成人急性疼痛和缓解强直性脊柱炎的症状和体征。其在保留传统非甾体类药物较好疗效的同时，大大减少了药物的毒副作用和不良反应[1]。
塞来昔布难溶于水，药物的溶出情况直接影响其在体内的吸收和利用，因此有必要对其进行溶出度的检测。溶出度试验技术不仅已作为评价固体制剂内在质量的一种重要手段，也是一种评价药物在体内释放和吸收的有效手段[2]。溶出度和溶出曲线的全面深入研究，既可为药物体内生物利用度的研究提供参
考，也可以揭示不同制剂工艺和内在品质的差异[3]。本文以国外上市的制剂为参比制剂，考察自制塞来昔布胶囊在不同溶出介质中的溶出行为，并采用相似因子法评价药品的内在质量。
1 材料与方法
1.1 试药
塞来昔布对照品，批号R081P0，USP；塞来昔布胶囊参比制剂，规格200 mg，批号Q02111、R55865、W34002，Pfizer Pharmaceuticals LLC；塞来昔布胶囊自制制剂，规格200 mg，批号S001101、S001102、S001103， 陕西步长制药有限公司；甲醇、乙腈，色谱纯，
基金项目：陕西省重点研发计划项目（2019SF-174）。
作者简介：李文强（1983—），男，甘肃宁县人，硕士，主管药师，研究方向：药物制剂。E-mail：**********************。
文章编号：2096-0387（2020）06-0029-04
·30·生物化工2020年
Fisher公司；十二烷基硫酸钠（SDS）、盐酸、磷酸 二氢钾、氢氧化钠、乙酸钠、冰醋酸等，分析纯，国药集团化学试剂有限公司；水为自制纯化水。
1.2仪器
vision®Elite 8TM智能溶出仪，Teledyne Hanson Rearch；TE214S分析天平，德国赛多利斯股份公 司；PB-21 pH计，梅特勒-托利多国际股份有限公司； Aglient 1260高效液相色谱仪，美国Agilent 公司；色谱柱，250 mm×4.6 mm，5 μm，Thermo scintific Betabasic phenyl；ZKT-18F真空脱气机，天津市天大天发科技有限公司。
1.3溶出介质的选择
原料药塞来昔布为生物药剂学分类系统（BCS）分类Ⅱ类，水中溶解度极小，经过前期实验发现，其基本不溶于生理pH范围的缓冲液。为建立良好的体内外关联性，对本品原料药进行了饱和溶解度试验，分别考察了原料药在不同pH介质中的饱和溶解度，同时考察了在介质中加入不同浓度的十二烷基硫酸钠（SDS）后的饱和溶解度。
1.4溶出度检测方法的建立
1.4.1色谱条件与系统适用性试验
以苯基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾2.7 g，加水溶解并稀释至1 000 mL，用磷酸调节pH至3.5）-甲醇-乙腈（60∶25∶15）为流动相；柱温为45 ℃；流速为1.2 mL/min；进样量：20 μL；检测波长为215 nm，理论板数按塞来昔布峰计算应不低于3 000。按照《中国药典》2015年版四部通则0512项下进行操作[4]。
1.4.2对照品及供试品溶液制备
取塞来昔布对照品约12.5 mg，精密称定，置25 mL 量瓶中，加甲醇-水（80∶20）适量，超声5 min（频率50 KHz，功率300 W）使其溶解，放冷至室温，加甲醇-水（80∶20）稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，平行制备2份。
取塞来昔布胶囊20粒，取出内容物，置于研钵研细，精密称取67.5 mg（相当于塞来昔布50 mg），置于100 mL量瓶中，加甲醇-水（80∶20）适量超声5 min（频率50 kHz，功率300 W）使塞来昔布溶解，放冷至室温，用甲醇-水（80∶20）并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
1.4.3溶出曲线的测定方法
取塞来昔布胶囊样品，按照《中国药典》2015年版四部通则0931第二法（沉降篮）[3]，分别以0.25% SDS的pH 1.2盐酸溶液、0.25% SDS的pH 4.5醋酸盐缓冲液、0.25% SDS的pH 6.8磷酸盐缓冲液、0.5% SDS的水和pH 12磷酸三钠溶液1 000 mL为溶出介质，转速为50 r/min，分别在第5 min、10 min、15 min、20 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min时，取溶出液10 mL，同时补充相同体积和温度的溶出介质，取出的溶液过滤，弃去初滤液，取续滤液，精密量取20 μL注入高效液相色谱仪，按外标法以峰面积计算每粒溶出量。
2结果与分析
2.1溶出介质的选择
塞来昔布原料药属于难溶性药物，如表1所示，在常规介质（pH 1.2盐酸、pH 4.5醋酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液、水）中几乎不溶，在强碱性介质（pH 12磷酸盐缓冲液）中溶解性显著提高；在各介质中加入SDS后，原料药溶解度显著提高；因此在表1原料药在不同介质中的饱和溶解度
介质pH SDS浓度/%
饱和溶解度/
（mg/mL）
漏槽条件溶剂
体积/mL
盐酸 1.2
00.0230 000
0.250.80750
0.50 1.81331
1.00 4.62130
醋酸盐
缓冲液
4.5
00.0230 000
0.250.78769
0.50 1.99302
1.00 5.24115
daddy
磷酸盐
缓冲液
6.8
00.0230 000
0.220.85706
0.50 2.12283
1.00 5.11117
水
00.0230 000
0.250.51 1 176
0.50 2.02297
1.00 4.49134
磷酸钠
溶液
nothings gonna change my love for you12
0 3.15190
0.25 6.7489
0.5014.5841
1.0024.6624
第6期·31·
李文强等：塞来昔布胶囊体外具有区分力溶出曲线的研究
满足溶出度的漏槽条件下，为了寻找最优区分力，选
择以低浓度表面活性剂的溶液为介质，进行溶出度的
考察，分别为pH 1.2盐酸溶液（0.25% SDS）、pH 4.5
醋酸盐缓冲液（0.25% SDS）、pH 6.8磷酸盐缓冲液
（0.25% SDS）、水（0.5% SDS）和pH 12磷酸盐缓冲液。
2.2溶出曲线的测定结果
根据《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》，采用模型非依赖方法相似因子（f2）来比较溶出曲线。f2可作为评价工艺或处方中辅料改变时制剂溶出曲线间的差异性评价参数，以及研制制剂与市售制剂间溶出曲线的差异性评价参数，是被FDA推荐为比较两条溶出曲线相似性的首选方法[5]。
如表2所示，从各介质溶液5 min的溶出度RSD 来看，基本都是在20%左右，有的甚至超过20%，差异相对较大，分析原因主要是由于胶囊壳溶解过程中引起的。为此，通过在溶出介质中加入胃蛋白酶的方法进行改善，但是效果甚微，基于10 min后的溶出差异逐渐变小，所以研究过程中仍然采用不加胃蛋白酶的溶出介质进行溶出度的考察。
珠峰关闭消息不实本实验分别考察了75 r/min、50 r/min和35 r/min 转速下的溶出度，发现本品在不过度区分的情况下，选择50 r/min进行溶出度的考察比较合理。不同介质中溶出曲线结果如图1所示，通过图1发现，本品在以0.25% SDS的pH 6.8磷酸盐缓冲液和pH 12磷酸三钠溶液的介质中，溶出度均在45~60 min达到85%，且90~120 min达85%以上，无拐点和突释，因此是具有区分力的两条溶出曲线[6]。
20
40
60
80
100
120
020406080100120140平
均
累
积
释
放
度
/
%
t/min
参比制剂自制品
0.25% SDS
pH 1.2
lavinia
盐酸溶液
2012安徽理综100
40
10
20
30
40
50
60
70
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90
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均
累
积
释
皮肤怎么补水
放
度
/
%
t/min
参比制剂自制品
0.25% SDS
pH 4.5
醋酸盐缓冲液
100
t/min
10
20
30
40
50
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2020年英语退出高考100
020406080100120140平
均
累
积
释
放
度
/
%
t/min
参比制剂自制品
0.25% SDS
pH 6.8
磷酸盐缓冲液
120
t/min
40
10
20
30
40
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60
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均
累
积
释美好的回忆英文
放
度
/
%
t/min
参比制剂自制品
0.5% SDS
自然pH
水
t/min
20
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60
80
100
120
020406080100120140平
均
累
积
释
放
度
/
%
t/min
参比制剂自制品
pH 12
磷酸三钠溶液
图1不同介质下塞来昔布参比制剂及自制品累积溶出曲线图
表25种介质中塞来昔布胶囊参比制剂和自制制剂累积溶出度RSD值（单位：%）
介质样品
不同时间累积溶出度RSD值/%窒息是什么意思
5 min10 min15 min20 min30 min45 min60 min90 min120 min
pH 1.2盐酸溶液 （0.25% SDS）参比制剂15.219.858.75 6.42 5.77 3.55 2.91 2.14 2.25自制品17.
829.239.17 6.81 4.98 3.79 2.88 2.24 2.11
pH 4.5醋酸盐缓冲液（0.25% SDS）参比制剂18.249.528.587.22 6.05 5.11 3.25 2.35 2.37自制品20.1110.2811.51 6.68 5.38 4.54 4.23 3.19 2.45
pH 6.8磷酸盐缓冲液（0.25% SDS）参比制剂19.259.128.518.03 6.86 6.01 4.11 2.94 2.44自制品20.579.778.977.997.18 5.35 3.72 2.88 2.61
水（0.5% SDS）参比制剂19.548.759.58 5.14 2.75 2.18 2.23 2.21 2.28自制品18.408.278.93 6.65 3.64 2.37 2.16 2.32 2.45
pH 12磷酸盐缓冲液参比制剂17.929.549.097.99 5.84 2.59 3.01 2.43 2.21自制品18.179.219.018.12 6.45 3.81 2.89 2.37 2.17
注：参比制剂和自制制剂各3批次，n=18
·32·生物化工2020年
3结论
固体药物制剂的体外溶出数据是评价一种药物制剂的重要数据，在某种程度上与体内生物利用度呈现一定的相关性。只有经过充分研究，抓住具有区分力的溶出曲线，才能在仿制药制剂处方开发和工艺研究中发挥出事半功倍之效。因此，本实验研究所得的两条具有区分力的溶出曲线，对塞来昔布胶囊成功仿制及其后期上市质量评价均具有重要的指导意义。参考文献
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白芍治疗抑郁症调节的关键通路主要有类固醇结合通道、血红素结合通道、癌症通路治疗通道、生长因子受体结合和单胺跨膜转运蛋白活性等通道。
（5）PPI蛋白质相互作用关系表明白芍作用于抑郁症靶点可以通过细胞膜内CPY家族对激素水平的调节以及其他受体的调节达到抑郁症治疗的期望疗效。
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