【2017年整理】1血球计数板操作规程

更新时间:2023-05-16 02:41:59 阅读: 评论:0

耶赛明(南通)保健有限公司
目的 Purpo
someone like you歌词翻译规范计数板的标准操作,确保设备的操作有章可循。
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范围 Scope
适用于计数板的日常使用。
职责 Responsibility
质检部的检验员负责遵守该规程,质检部负责人负责监督与管理。
内容Procedure
1  概述
1.1  测定微生物细胞和动物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。
1.2  显微直接计数法:将小量待测样品悬浮液置于计菌器上,于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如酵母、细菌、霉菌孢子等
1.3  血球计数板
1.3.1  是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。implement
1.3.2  中间平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个方网格(图1)。
1.3.3  每个方网格分为9个大方格,正中间的大方格为计数室,计数室内的刻度有两种:一种是每个计数室内分为16个中方格(中方格用三线隔开),而每个中方格又分成25个小方格(图2);另一种是每个计数室内分成25个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数室内都由400个小方格组成。
1.3.4  计数室边长为1mm,则计数室的面积为lmm2,每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。
史可隽1.3.5  使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物或细胞的数量,再换算成每毫升样液(或每克样品)中微生物或细胞的数量。
已知:1cm3体积=10mm×10mm×10mm=1000mm3=1ml;
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所以:1cm3体积应含有小方格数为1000mm3/1/4000mm3=4×106个小方格,即系数K=4×106。
因此:每ml悬液含细胞数=每个小格中细胞平均数(N1)×系数(K)×悬液稀释倍数(D)。
1.4  现用的计数板规格型号为XB-K-25,表示此计数板分25个中格。
2 计数板的使用
2.1  准备:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检;若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;盖玻片也要擦干净。
2.2  盖上盖玻片:在需要盖的周边区域用蒸馏水弄的微湿,然后盖玻片要慢慢的从计数板的前端推入,直到盖玻片的前端边缘与计数板的划有方网格的区域处于同位。
2.3  计数板加样:取一个良好混合型的洁净吸管,吸取按要求稀释D倍的供试品稀释液;把吸管的外部擦干,然后保持吸管一定的角度并挤出一个小滴液体至吸管口尖端;然后这滴液体被放置在盖玻片和计数板之间。利用盖玻片和计数板之间的毛细管现象和液体的表面张力使两个平面之间的缝隙被灌满,液体充满计数室,在溶液要满出计数板截面的边缘之前,马上移走吸管的尖端,充入悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜,多余培养液可用滤纸吸去。如果有可见气泡或者液体已经满出边缘并且进入其他的沟里,那么计数板就要擦干净并且重新加样。
2.4  计数:
givebirth2.4.1  静置片刻,将血球计数板置载物台上夹稳,按显微镜标准操作规程操作,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜找到视野,观察并计数;记录计数的小方格数(B)及其小方格内的供试品细胞总数量(A)。
2.4.2 操作时,显微镜的照明是重要的,由于活细胞的折光率和水的折光率相近,太亮了会影响方网格线的观察,观察时应减弱光照的强度。操作高倍物镜时也要非常小心,因为计数板比常规的要更厚。如果不小心的话,会导致计数板或者物镜镜头的损伤。
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2.4.3 对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。每个样品重复计数2—3次(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),求出每一个小格中细胞平均数(N1),按公式
计算出每ml悬液所含酵母菌细胞数量。
2.5  计数时若计数区是由16个中方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小格)的细胞数。如果是25个中方格组成的计数区,除数上述四个中方格外,还需数中央l个中方格的细胞数(即80个小格)。如细胞体位于中方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差(图3)。
图3:计数原则:取上不取下,取左不取右。
2.6  计算:按下述公式进行计算:
N=(A/B)KD。
其中:N:代表供试品样液的浓度,单位为:个/ml;
A:代表计数小方格内的供试品总细胞数,单位:个;
B:代表所计数的小方格数,单位:个;
K:代表计数室体积由mm3换算为ml的换算系数,K=4×106;
D:代表供试品的稀释倍数。
3.7  使用完毕,依据仪器清洁标准操作规程进行清洁。取下盖玻片,用纯化水将计数板冲洗干净,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。
4 做好计数板的日常维护。thursdayisland
历史History
总黄酮
生物总黄酮是指黄酮类化合物,是一大类天然产物,广泛存在于植物界,是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇,其它包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。
简介
近年来,由于自由基生命科学的进展,使具有很强的抗氧化和消除自由基作用的类黄酮受到空前的重视。类黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。它们对健康的好处有:(  1 )抗炎症(  2 )抗过敏(  3 )抑制细菌(  4 )抑制寄生虫(  5 )抑制病毒(  6 )防治肝病(7 )防治血管疾病(8 )防治血管栓塞(9 )防治心与脑血管疾病(10 )抗肿瘤(11 )抗化学毒物等。天然来源的生物黄酮分子量小,能被人体迅速吸收,能通过血脑屏障,能时入脂肪组织,进而体现出如下功能:消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑及其他脏器细胞的功能、抗脂肪氧化、抗衰老。近年来国内外对茶多酚、银杏类黄酮等的药理和营养性的广泛深入的研究和临床试验,证实类黄酮既是药理因子,又是重要的营养因子为一种新发现的营养素,对人体具有重要的生理保健功效。目前,很多著名的抗氧化剂和自由基清除剂都是类黄酮。例如,茶叶提取物和银杏提取物。葛根总黄酮在国内外研究和应用也已有多年,其防治动脉硬化、治偏瘫、防止大脑萎缩、降血脂、降血压、防治糖尿病、突发性耳聋乃至醒酒等不乏数例较多的临床报告。从法国松树皮和葡萄籽
中提取的总黄酮" 碧萝藏"-- (英文称PYCNOGENOL )在欧洲以不同的商品名实际行销应用25 年之久,并被美国FDA 认可为食用黄酮类营养保健品,所报告的保健作用相当广泛,内用称之为" 类维生素" 或抗自由基营养素,外用称之为" 皮肤维生素" 。进一步的研究发现碧萝藏的抗氧化作用比VE 强50 倍,比VC 强20 倍,而且能通过血脑屏障到达脑部,防治中枢神经系统的疾病,尤其对皮肤的保健、年轻化及血管的健康抗炎作用特别显著。在欧洲碧萝藏已作为保健药物,在美国作为膳食补充品(相当于我国的保健食品),风行一时。随着对生物总黄酮与人类营养关系研究的深入,不远的将来可能证明黄酮类化合物是人类必需的微营养素或者是必需的食物因子。性状:片剂。
功能主治与用法用量
功能主治:本品具有增加脑血流量及冠脉血流量的作用,可用于缓解高血压症状(颈项强痛)、治疗心绞痛及突发性耳聋,有一定疗效。用法及用量:口服:每片含总黄酮60mg,每次5片,1日3次。
不良反应与注意
不良反应和注意:目前,暂没有发现任何不良反应.
洛伐他丁
【中文名称】:洛伐他丁
【英文名称】:Lovastatin
【化学名称】:(S)-2-甲基丁酸-(1S,3S,7S,8S,8aR)-1,2,3,7,8,8a-六氢-3,7-二甲基
bas-8-[2-(2R,4R)-4-羟基-6氧代-2-四氢吡喃基]-乙基]-1-萘酯
wipe手机什么意思【化学结构式】:
洛伐他丁结构式
【作用与用途】洛伐他丁胃肠吸收后,很快水解成开环羟酸,为催化胆固醇合成的早期限速酶(HMG -coA还原酶)的竞争性抑制剂。可降低血浆总胆固醇、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白的胆固醇含
量。亦可中度增加高密度脂蛋白胆固醇和降低血浆甘油三酯。可有效降低无并发症及良好控制的糖尿病人的高胆固醇血症,包括了胰岛素依赖性及非胰岛素依赖性糖尿病。
【用法用量】口服:一般始服剂量为每日20mg,晚餐时1次顿服,轻度至中度高胆固醇血症的病人,可以从10mg开始服用。最大量可至每日80mg。
【注意事项】①病人既往有肝脏病史者应慎用本药,活动性肝脏病者禁用。②副反应多为短暂性的:胃肠胀气、腹泻、便秘、恶心、消化不良、头痛、肌肉疼痛、皮疹、失眠等。③洛伐他丁与香豆素抗凝剂同时使用时,部分病人凝血酶原时间延长。使用抗凝剂的病人,洛伐他丁治疗前后均应检查凝血酶原时间,并按使用香豆素抗凝剂时推荐的间期监测。

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