将ELISA的线性范围提高2-3个数量级,灵敏度提高10-100倍 -Noname

更新时间:2023-05-16 02:32:44 阅读: 评论:0

Meso Scale Discovery ( MSD ) ELISA线性范围提高2-3个数量级,灵敏度提高10-100
Percepta在针对550位北美和欧洲的顶级生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发光技术的MSD ( Meso Scale Discovery ) 是最受欢迎的5大免疫分析品牌之一。MSD电化学发光技术 与传统酶联免疫分析ELISA优势对比如下:
1.更高灵敏度与更宽的线性范围
传统酶联免疫分析ELISA主要基于酶标仪,酶标仪的灵敏度往往在10-1pg/ml MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪澳际中介MESO Sector 600Quickplex SQ 120MSD灵敏度可达0.05pg/mlbucke,有效线性范围达6 log
 
传统ELISA常规线性范围在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-nsitivity试剂盒则为0.5-10pg/ml 暴发户 英语对于一个生物学实验,往往要兼顾正常对照组与疾病组的样本,样本中的待测蛋白浓度分布一般从零点几个pg到几千pg不等,所以一个ELISA试剂盒的线性范围不能同时兼顾高低丰度蛋白的检测,需要非常多的预实验进行稀释度摸索,费时费力。 MSD全身皮肤美白的方法提供了从
亚皮克级到几万皮克浓度的宽线性范围,有效将所有样本落在最佳线性范围内,得到准确测定(见下图比对,红色条状为疾病样本,黄色条状为正常参照组)。 同时MSD的灵敏度可达0.05pg/ml,对于目前有些疾病样本中待测蛋白浓度下调的研究项目来说,更能够有效的发现疾病组与正常对照组的差异,实现新的科学发现。
2.节省样本用量,可实现多重检测
  传统ELISA所需样本量一般为50-100ul,如果
同时关注10个细胞因子的表达调控则可能需要多
500-1000ul的样本,对于很多ELISA实验来说
样本量就成了关键问题。
  MSD通过点阵技术,在96孔石墨电极板里可
实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里
定制实现100指标/cost的过去式孔的筛选检测。满足了不同
的实验需求。在样本用量上,无论单指标或多
指标都只需≤25ul的样本,即可完成检测。为
珍稀样本的研究提供了更多的数据。
  目前MSD可以在100ul的极其珍贵的脑脊液样spen
theriver本中,复孔定量测定40Biomarker,这是以往
技术都所不能实现的。
           
               
3. 均一性、重复性高:
  MSD 板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月,为长时间研究项目,提供了使用同一批号试剂的可能性。
4. 样本兼容度高,基质效应小:
  程序设计师MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,所以受样本性质的影响就更小(如粘稠样本,悬浊颗粒样本等),因此对于各类生物学样本的兼容度更高。
  目前MSD平台上测定样本总类主要包括:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊液,尿液,关节滑液,唾液,痰液,粪便提取液,眼睛房水,各类灌洗液等基本所有的生物学样本。对于最简单的血浆样本来说,MSDtcd也可兼容不同抗凝剂的血浆样本。大大降低了实验所需样本收集上的难度。
  此外基质效应会影响到实验准确性与灵敏度,MSD是目前唯一一个被国外科学家广泛认可的cheerio基本无基质效应的免疫分析平台。
请参见: Immunol Res;DOI 10.1007/s12026-014-8491-6; T.Maecker
 
5. 实验流程简便、快速、多元化
  MSD提供了比ELISA更为便捷快速的实验流程,将加样等手动操作时间缩短至45分钟以内,并为培养上清等高丰度样本快速检测,提供了只需2.5小时的一步法流程,解放了劳动力,提高了科研效率。同时在MSD平台上由于特有的电化学发光技术,可有效控制背景信号,可以实现免洗的实验流程。请见下图MSD流程以及实验时间比较:
                 

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