一步法筛选抗HRP的8—Ag抗性杂交瘤细胞株用于杂化杂交瘤制备
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而且均出现在相问忠卉中.掰定献撤导(6】在非密螺旋体试验中，麻风和系统性红斑接沲是
产生慢性BFP构最常见，最严重的疾痫，麻风产生的BFP可高速40嘶，而且慢性BFP反应可
持续数月或数年，甚至终身.另外，生理状况的改变,(麻醉剂成瘾)也可导制较高的BFP我
们导在高危人群(在押犯包括暗娼，嫖客等)的检测中，非密螺旋体试验的BFP较
高，推断这可能与高危人群中有吸毒者有关
参考文献
1,S.S,Kasat[yaetal:AppljedMicrobiology.
1974,2,8:317
毓婷的副作用2,D,+E.Pettiteta1:J.
CIlnM}crob:oil983.18:J14}
3,C.
E.Pathametn1:J.
G1inMicrobioll984,201434
4,S..J.titSelleta【:Amanua1oftestsforSyphilisAmericanPublic
Hea]thA8S0~iation.INg0
5,CrisyJ.
Teta1.C【inDermatol,lOg4,2.82
6，郑珙等生物制品资料选编(总第十.r]{}】)109o.Pi16
一
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步法筛选抗HRP的8一Ag抗性杂交瘤
细胞株用于杂化杂交瘤制备
.塑垦竺陈受霓道刘瑛玉珍王玉萍；一;;～———————一’—.——————一rt,
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藕要：双特异单克隆扰体可甩于一步诊断，肿瘤导向等方面甩杂交瘤法制备双特异箪
克隆抗体是霞要手段之一.杂交痛的筛选若采用HA T系统，脚需其中一种母本杂交瘤为8一
氨杂鸟瞟岭(8--AG)抗性(HGPRT一一次黄瞟呤鸟嘌岭磷酸核糖转移酶明性)常规
的获取8一AG抗性株的办法是8～AG剂量递增法.这种方法费时.工作量大.本文作者
采用单剂量8--AG直接加入细胞培养瓶中，一l步法筛选出8一AG
抗性株，省时快速，且稳紫式部
定.可
关
北京天坛
工会合理化建议制
的母本
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参..键词：杂化杂交瘤AG抗性株抗HRP词f{..
备分泌双特异单克隆抗体的杂化杂交瘤，利用HA T系统选择.就需用杂交杂交癌
杂交癌一方为HGPRT~(8一AG抗性’)c)-..j原理蹇利用杂交癌中对H_A T敏感
对8一AG射受(HGPRT”>；的自然突变率约为ld5一lo-.,(2)连续培养后这种细就会
增多.选种细胞因不能利用8一AG而存活，而HGPRT阳性株因误利用8一AQt鸟噪西靖
构类似物).不能合成正常核酸Nggf~，由此在8一AG存在下而选择出8一AG耐受株.具带然的词语
体方法在以前多采用8一AG剂量递增洼(3】c4).这种方法费时，需4—5周，延长了制
‘华西医科大微生物与免疫室’
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备杂化杂交瘤的周期.且增lJJ【j了]件量本文作者为了解决以上不足.设计了单剂量8--
AG直接加入含细胞的瓶中，获得了羽样效果，融合后经HA T选择并成功地获得了杂化杂变
瘸.该法省时省一作量.现报道如下.
材料与方法
材料:8一AG(Sigma)
抗HRP.~交瘤细胞株(本室自制)
方法：通过杂交瘤细胞株对8一AG的抗性存活而非突变株对8--AG 敏感死亡而将8一
AG抗性栋选择出来具体做法是将鉴定好的A8株，待对数生长期时，按下表不同的方法将
8一AG加入瓶内.
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袭1选择8一AG耐受株的商法
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A.加入8一AG的天数
帆加入8一AG的剂量(I~g/m1)
鉴定经8一Ac选择后的8一AG抗性株;’
(一)对HA T的敏感性；经选择后细胞于对教生长期经潍繇后加)~HA T完全1640选择
培养基.观察细胞生长请况
【=‘抗HRP捌定：斑点酶法
(兰)亚类测定及染色体计数
(四)融合特性将该单龋量8--AG选择出的抗HRP杂交癌8一A抗性椽与人lgO
免波鼠的脾细胞融合后经HA Tj龟择，计数染HA T后细胜死亡(二)抗IP测定阳性.(三)亚类为IgG1.染色体计数
均为94.(凹)将单剂量8一AG所选择出的8一AG株(HGPRT一)与人IgG免疫的新细
胞融合后经HA T选择，其染色体计数均数为i4.酷明j三体杂交.(五)
