格列美脲片溶出度测定及对其体内外相关性考察
卫生所
叶秀金，陈英\广东省药品检验所，广东广州510663)
摘要：目的建立格列美脲片体内外相关的溶出度测定方法方法采用桨法及流通池法，进行体外溶出试验，计算平均累 积溶出度，并与体内吸收分数线性拟合；用相似因子(/)评价7个厂家格列美脲片溶出度曲线的相似性结果传统溶出方 法测定格列美脲片在p H6.8条件下区分度较强，但体内外相关性较差；建立的流通池测定体外累积溶出量与体内吸收分数具有显著的相关性，回归方程为0.580 8 F b+27.753 5(炉=0.995 0) 7个厂家生产的格列美脲片，除I?、D及本土化制剂外，其余均与原研不相似结论所建立的格列美脲片溶出度测定方法具有良好的体内外相关性，可以用于控制其质量.
关键词：格列美脲片；溶出；流通池法；体内外相关性
中图分类号：R917 文献标志码：A 文章编号：l674-229X(2021)01-0035-04
Doi ：10.12048/j.issn.1674-229X.2021.01.007
Dissolution Testing of Glimepiride Tablets and Evaluation of in Vivo-in Vitro Correlation
Y L X iu jin,C H E N^illg(Guangdong Institute fo r Drug Control .Giumgzhuu ,Ciumgdong510663,)
A B STR A CT ： O B JE C T IV E To develop a dissolution method for the glimepiride labletvS of in riio-in vitro correlation. M E T H O D S Hie dissolution tests in vitro were carried out l)y using the slurry method and the (lowing-through re*ll metliod.Hie average cumulative dissolutions were calculated and fitted with thr absorption fraction in/7/Y；,anH tht* dissolution ru n e s for glimepiridt1tablets of ven manu factures were evaluated by f.RESULTS Under the condition of p H6.8,thr traditional dissolution methotl for the determination of glime|)iride tablets had a strong discrimination, blit a poor in vivo-in vitro correlation.I hf? cumulative dissolutions in vitro and absoiption frat-tion in vivo had a signific'ant correlation by the flowing-through cell method with the regression equation was 0.580 8 FU+21J53 5(R2 = 0.995 0).T h e glimepiride tablets produced by ven manu lactures, except for B,I) and the localization, had no correlation with the original developer. CO N C LU SIO N The dissolution determination melhod of glimepiride tablets has a good in vivo-in vitro correlation, and c an be ud to control its quality.
KEY W O R D S：glimepiride tablets；dissolution；flow-through cell m ethod；in riro-in vitro correlation
格列美脲除具有与第二代磺醜脲类药物相似的 促胰岛素分泌作用外，还具有胰岛素增敏作用，具有 疗效好、低血糖发生率低、不良作用少等优点，主要 用于治疗节制饮食和从事运动而未能控制的2型
糖 尿病。但格列美脲BCS分类为2类，是低溶解 性-高渗透性药物，各厂家的生产T.艺不同，对药物 溶出快慢会有不同，难以做到与原研制剂溶出一致 有报道研究格列美脲溶出度方法开发及各厂家生产的溶出片剂溶出曲线对比等，但是对比不够全 面、研究样本较少，不能全面反映药物溶出行为，也 不能反映溶出方法与体内外的相关性。
流通池法可以很好的弥补传统溶出度方法的不 足，可通过调节流速，区分不同工艺给制剂溶出带来 的影响、考察体内外相关性等，具有很大的实用价 值。它在片剂1W1]、乳膏:l2i、栓剂13，而且在贴剂14、支架15等新剂型的评价方面显示出极大的 优势，据文献报道[in，流通池法用于固体制剂测定 溶出度，有良好的体内外相关性本研究用流通池法 与桨法比较了 7个厂家生产的格列美脲片的溶出度，并考察r体内外相关性，为临床合理用药提供参考。
1仪器与试药
1.1丨义器
C K7 smart流通池法溶H1仪（瑞士 S0TAX公 司）；Agilent 1260高效液相色谱仪（安捷伦科技有限 公司）；RC806D溶出试验仪（天津市天大天发科技 有限公司）；ZKF-18F真空脱气仪（天津市天大天发 科技有限公司）；K rom asil C l8100-5 ( 150 m m x 4.6 m m,5 fxm)0
基金项目：广东省医学科学技术研究基金（A2017441)
作者简介：叶秀金，主管药师，研究方向：药品质量标准研究•通信作者：陈英，主任药师，研究方向：药品质量标准研究，E-mail: ****************,
今H药学202丨年1月第31卷第1期Pharmacy Toda\,202\ January,Vol.3\ No.\•35 •
1.2试药
格列美脲对照品（中国食品药品检定研究院，批 号：100674-201503，含量:99.6%)；格列美脲片[A厂 家，批号:20170902;B厂家，批号：180303;C厂家，批 号:20180103;D厂家，批号:31171201;E厂家，赛诺 菲(北京）制药有限公司，批号:8BJB019;F厂家，批 号：1708728; G厂家，SANOFI (意大利），批号：B649]；乙腈为色谱纯，水为纯化水，其它试剂均为 分析纯。
2含量测定方法考察
2.1色谱条件与系统适用性试验
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈 -0.1 %磷酸二氢钠溶液（50:50，用磷酸调节PH值至 (3.0±0.5)为流动相；检测波长为228 nm。理论板数 按格列美脲峰计大于9 000，格列美脲峰及各杂质峰 之间的分离度大于1.5。
2.2溶液的制备
供试品溶液：取各溶出取样点溶液5 mL，离心，取上清液作为供试品溶液。对照品储备液：另取格 列美脲对照品约10 mg，精密称定，置100 mL量瓶 中，加乙腈适量使溶解并稀释至刻度，摇勻，作为对 照品储备液。对照品溶液：取对照品储备液1m L 4份，置100 mL量瓶中，分别用各溶出介质稀释至 刻度，摇匀，作为各溶出介质的对照品溶液。
2.3精密度
精密量取对照品储备液1m L 3份，分别制备浓 度分别为4.183，1.046,0.418 3 jjig.m L—1的高中低浓度精密度测试溶液。分别取高中低浓度精密度测试 溶液50 j j l L注入高效液相色谱仪，重复进样6次，计 算峰面积的分别为1.4%,0.3%,0.4%。结果表 明，仪器精密度良好。
2.4检测限与定量限
精密量取对照品溶液，逐级稀释后，注人液相色 谱仪，记录色谱图，计算定量限为s//v= 10，检测限 为S/W=3。结果得出，检测限为2.510 ng-mir1，定 量限为 8.366 ng，m L H。
2.5线性与范围
取对照品储备液，分别配制浓度为4. 183，2.092,0.836 6,0.418 3,0.209 2,0.041 83,0.008 366, 0.002 510 的对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，以各峰面积为纵坐标(y)以浓度为横坐 标U)作线性
回归。结果表明，格列美脲在0.002 510 ~4.183 %•ml/1范围内峰面积与浓度的线性关系良.36 . Pharmacy Today,2021 January ,V o l3\ No A 好，线性方程为尸 155.6«+0.395 3( R2= 1.000 0,n= 8)。
2.6溶液稳定性
取各溶出介质的对照品溶液，分别在〇，2,4,8，12,24 h进样，考察样品在溶出介质中的稳定性。结 果PH6.8、PH7.8及水为溶剂的对照品溶液峰面积 24 h内兄SD分别为 0.4% ,0.7% ,1.3%, pH1.2 为溶剂 的对照品溶液峰面积呈逐渐下降趋势,24 h内/«0 为47.0%。结果表明，格列美脲在水、PH6.8、PH7.8 溶出介质中稳定，在PH1.2溶出介质中不稳定。
3传统溶出方法及结果
参考日本医疗用药品质情报集[16及2015年版 中国药典17格列美脲片溶出测定法，溶出曲线测定 为桨法；转速:50 fm hT1；溶出介质体积900 mL。溶 出介质为：（1)水：经脱气纯化水；（2)PH1.2溶出介 质的配制：取氯化钠2.0 g与盐酸7 mL，加水并稀释 至1 000 mL;(3)PH6.8溶出介质的配制：取磷酸二 氢钾3.40 g及无水磷酸氢二钠3.55 g用水溶解并稀 释至1 000 mL，用水稀释1倍；（4)pH7.8溶出介质 的配制：取磷酸二氢钾0.58 g与磷酸氢二钠22.34 g，加水1000 mL，振摇使溶解，用10%磷酸溶液或1m ol_LM氢氧化钠溶液调pH值至7.80。于规定的 各时间点取溶出液5 mL(并即补充同温同体积的相
应溶出介质）离心，取上清液。按“2.1”项下色谱条 件进样，计算累计溶出度，得累积溶出曲线见图1~ 4，相似度计算结果见表1。结果表明，格列美脲片 在不同pH溶出差异大，其中，在pHl.2条件下，溶出 度较低，而在PH7.8条件下，溶出过快，故这两种溶 出方法无法与体内吸收获得相关，也无法实现控制 产品质量的目的。在PH6.8及水条件下，各厂家生 产的格列美脲片溶出度曲线区分度大，除A、C及本 土化生产的格列美脲片外，其它厂家溶出结果均与 原研不相似(/&50判定为相似）。
4流通池法及结果
4.1溶出度测定
采用流通池法开环系统装置，取A~F 6个厂家 的格列美脲片，置于22.6 mm片剂池中（片剂池含玻 璃珠，使溶出介质以层流方式流动），以PH6.8缓冲 盐溶液为溶出介质，流速为16 mbmirT1，温度为37.0 丈，分别在 15,30,60,90,120,150,180 min 取 50 mL溶液，按“2.1”项下色谱条件进样，计算格列 美脲片的累积溶出度，累计溶出曲线见图5。
今日药学2021年1月第31卷第1期
10〇i100 n
图1水介质平均累积溶出度曲线图图3 PH6.8平均累积溶出度曲线图
图2 PH7.8平均累积溶出度曲线图4pHl.2平均累积溶出度曲线
平常的意思
表1相似度计算结果
溶出介质A B C D E F G 水53.6735.7961.6659.5167.4717.61100.00 pH7.873.9774.6482.1743.7785.8934.08100.00 PH6.853.2944.2853.6940.9587.4832.20100.00 pH1.282.8993.4280.8588.0796.8881.83100.00
图5平均累积溶出度曲线（流通池法）
4.2体内外相关性
采用“4.1”项下方法考察原研格列美脲片体内 外相关性。据文献报道该制剂属于一室开放模型[18]，故可根据原研格列美脲片在人体内的血药浓 度[19]，采用W agner-Nelson—法计算各时间点体内 累积吸收百分数，见表2。由于原研格列美脲片体 内血药浓度在2 h内吸收达峰，之后逐渐降低，故以 3 h内体内药物累积吸收百分率（f a)为因变量，以对应时间体外累积溶出百分率（)为A变量，进行回归，得回归方程及拟合优度回归方程为弋= 0.580 8 f；+27.753 5，拟合优度 /?2 为 0.995 0。结果表明，/ra与，具有非常显著相关性。
表2格列美脲片体内累积吸收百分数
时间/h
形态各异血药浓度
/n g •mL~1
F a/%F b/%
0.55327.844.3
1.011555.860.1
1.513571.468.6
2.014382.674.3
2.513187.278.6
3.011990.882.0
4.3各厂家溶出曲线比较
根据各样品的累积溶出度计算/，A〜F厂分别 为 43.25,54.54,41.18,60.68,83.70,42.16,100.00。结果表明，除B、D及本土化生产的格列美脲片外, 其它厂家溶出度结果均与原研药不相似。
今日药学2021年1月第31卷第1期Pharmacy Today, 2021 January , Vol. 31 No. 1• 37
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5讨论
溶出度含量测定参考2015年版中国药典[|7]含t t测定中的色谱条件，该方法为法定方法，条件成 熟，
但溶出度测定时浓度较低，故对该方法做了高中 低浓度的精密度、线性与范m、检测限与定量限等部 分验证，验证结果满意。
考察在不同介质中格列美脚的稳定性，发现格 列美脲在水、PH6.8、PH7.8介质中24h内稳定，但在 PH1.2介质中不稳定，与文献报道2|]不一致。分析格 列美赇的结构，其具有酰胺键，在酸碱条件下易水解。
幸福的理由采用传统溶出方法，比较各厂家制剂的溶出行 为，发现原研及本土化的格列美脲片溶出行为是一 致的，但是各个厂家与原研厂之间的溶出差别较大。其原因可能是因为格列美脲为难溶性药物，原料药 晶型粒径不同与制剂生产工艺不同都会影响溶出结 果。从溶出曲线中可以看出，格列美脲片在水和 PH6.8条件下区分度最明显。但因水受影响因素较 多，如要考察不同工艺下的区分度，应选择PH6.8的溶出介质。
从传统溶出方法可以看出，溶出介质在PH6.8 条件下区分度较明显，但格列美脲在该条件下溶解 度较差，其溶解度为达不到漏槽
条件，溶出受限，原研片在0.5 ~ 3 h溶出度均在60% 左右，从而造成与体内数据有显著性差异，体内外数 据不具有相关性。日本医疗用药品质情报集[〜中 溶解度数据表明，格列美脲溶解度与pH有关，pH 较大，溶解度较高。在PH7.8条件下，其溶解度为 刚好达到漏槽条件，如pH低于7.8，则达不到漏
槽条件，故在传统溶出方法中，无法实现体 内外相关研究。而流通池具有开环和闭环两种模 式，开环模式可以避开溶解度受限，达到漏槽条件。
芬芳馥郁
采用流通池法，考察了 PH7.8及PH6.8两种溶 出介质，发现PH7.8即使在低流速时溶出也过大，15 min时达到58.3%，考虑格列美脲在酸性条件不 溶及体内环境，选择PH6.8作为溶出介质。/计算 结果表明，除B、D及本土化生产的格列美脲片外，其它厂家溶出度结果均与原研药不相似，提示其它 厂家生产的格列美脲片与原研厂生产的格列美脲片 溶出度具有显著差异，可能会导致生物不等效，需进 一步研究其工艺及处方组成。
本文对比了两种方法测定格列美脲片的体外溶出 行为，对于格列美脲这种难溶性药物，流通池显现出了 更大的优势，也体现了流通池法具有良好的体内相关 性，为格列美脲片工艺及质量研究提供参考依据。参考文献
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(收稿日期：2020-01 -03；在线出版日期：2020-12-09)
•38•Pharmacy Today, 2021 Jamuiry, Vol. 31 No. 1今闩药学2021年I月第31卷第1期
