lonza电转protocol实验操作步骤
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统，即原德国Amaxa 4D-Nucleofector核转系统，结合电穿孔技术和细胞特异性转染液，通过系统内置优化的转染程序，将外源基因⾼效导⼊⽬标细胞的细胞质中，并可直接⼊核，整合到细胞染⾊体中。（微信搜索”泽平科技“公众号发送电转protocol获取教程视频）
Nucleofector核转系统可⽤于免疫细胞、⼲细胞、神经细胞、内⽪细胞等较难转染的原代细胞和各类细胞系中，其不依赖于病毒感染、不依赖于细胞有丝分裂，可加快基因表达，已成功转染1200余种细胞系、130余种原代细胞，多数细胞系转染效率可⾼达50-70%，部分原代细胞转染效率可超过90%。⽬前，LONZA 4D-Nucleofector已⼤量应⽤于CAR-T细胞的研究中。
图.⽤Nucleofector细胞核转染系统，将GFP标记的质粒转染新⽣⼉⽪肤成纤维细胞（NHDF-neo），2⼩时后⽤3.5% PFA 固定，共聚焦显微镜可观察到GFP蛋⽩在细胞核内表达。
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统，配备多种转染模块，可满⾜不同细胞类型、不同数量、不同通量的转染实验需求；
电转过程中配合使⽤不同细胞类型专⽤转染试剂，转染效率远⾼于传统电转仪；
采⽤由新型⾼分⼦聚合物制造的电极，相⽐传统铝制电转杯，杜绝⾦属离⼦毒害，细胞转染后成活率更⾼。
为提⾼细胞核转染效率，优化转染条件必不可少，相⽐其他品牌，LONZA可提供全球共享的数据库，
可检索到700种以上的细胞转染数据和操作⼿册，除转染操作指导外，还提供细胞来源、传代、⽣长条件、培养基、转染后细胞培养基等各类技巧，⼤⼤节省摸索时间和试剂耗材损耗。
4D-Nucleofector细胞核转染平台，在⼩体积转染条件优化成功后，可不改变转染条件，直接⽤于⼤体积转染中，⼀次获得最多1*10^9数量的细胞，⼤⼤缩短实验时间。
LONZA 4D-Nucleofector细胞核转染系统，由1个主机加不同模块构成，各模块可单独配置：
1.C模块（必选）：细胞核转染系统主机，即核⼼模块（Core unit），内置各类细胞转染程序。
2.X模块（可选）：最常选择的⼩体积转染模块，⽤于各类悬浮细胞转染。允许使⽤2个电极杯和1个中通量16孔电极板条。其中电极杯为100uL体系，适⽤于2*10^5⾄2*10^7数量细胞；16孔电极板条各孔为20uL体系，适⽤于2*10^4⾄1*10^6数量细胞，可同时转染16个样品。
3.Y模块（可选）：⽤于各类贴壁细胞的原位转染，⽆需消化细胞。允许使⽤1个24孔电极板，各孔为350uL体系，可同时转染24个样品。
4.LV模块（可选）：⽤于⼀种细胞的⼤规模连续转染。允许使⽤电转盘，其中⼩体积电转盘允许⼿动注射填充1mL，适⽤于1*10^7⾄
1*10^8数量细胞；更⼤体积的电转盘允许以1mL体积不断进样，配合储液罐或储液袋，连续处理20mL
体积，最⾼可转染10^9数量细胞。
5.96孔模块（可选）：⽤于⾼通量细胞转染，需要同时配置X模块。允许使⽤1个可拆卸的96孔电极板，由6个16孔电极板条组成，适⽤于2*10^4⾄1*10^6数量细胞，可同时转染96个样品，经常⽤于摸索转染条件。
相关⽂献
Ribonucleoprotein Transfection for CRISPR/Cas9-Mediated Gene Knockout in Primary T Cells.(Curr Protoc
Immunol,2019,124(1):e69)
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Optimized RNP transfection for highly efficient CRISPR/Cas9-mediated gene knockout in primary T cells.(J Exp
Med,2018,215(3):985-997)
