药物量效曲线及竞争性拮抗剂的pA2的测定

药物量效曲线及竞争性拮抗剂的 pA2的测定

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适用对象 药学、药剂学专业

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实验学时 学时

一、 实验目的

学习冲动剂量效曲线的测定方法，计算竞争性拮抗剂的

pA

2

值

二、 实验原理

在一定范围内药物随剂量或浓度的增加， 效应也相应增加。 以效 应为纵坐

标，剂量的对数值为横坐标，可绘制出对称的“ 〃型曲线。 本实验选择对

s M

NAChN2

受体有兴奋作用的乙酰胆碱〔，应用蟾蜍腹 直肌为标本〔含受体〕进

行实验，按累积浓度进行实验，观察 剂量的增加，肌肉收缩效应的变化，

AC h

从而绘制量效关系曲线。

三、仪器设备

动物：蟾蜍 诗经蓼莪 只 器材：氧气瓶、器官浴槽、铁支架、双凹夹、肌张力换能

1

器、蛙 板、探针、卩微量注射器、注射器、手术剪、眼科剪、眼 科

100I10ml

镊、培养皿、烧杯、丝线、计算机

试剂：〜• 乙酰胆碱，• 筒箭 毒

10-4 10-1mol L-1 10-3mol L-1

碱，任氏液

四、相关知识点

本课程知识点： 受体冲动药与受体拮抗药、心理健康教育主题班会 竞争性拮抗、传出神 经药物作

用机制、量效曲线、

pA2

多课程知识点：受体学说、计算机操作、数学计算

五、方法与步骤

1.

实验装置的连接：①通过进水口对恒温槽内供水至红线处， 接 通电源。

按下加温开关，使恒温在 。②排液口用橡皮管连接到 水杯，将任氏makes 液装入

37

C

浴管内，调节气泡至每秒 〜个。③将张力换 能器固定，使其对准浴管的上

34

口。

2.

标本制备与固定：取蟾蜍一只，断头处死，用探针破坏脑和脊

髓，背位固定于蛙板上。剪开腹部皮肤，暴露腹直肌。在耻骨端及胸 骨端，各以

细线结扎，并自腹白线将两片腹直肌别离。将剪下的腹直 肌标本，其一端固定于

标本板固定钩上，迅速移至含有 任氏液

10ml

的器官浴槽中，通入混合气体；另一端与张力传感器相连，调节微调

器，使标本负荷,平衡，平衡期间每间隔更换一次营 养液。

1g0.5h15min

3.

给药方法及曲线描记

按半对数摩尔浓度累积给药法，依次参加冲动剂 其方法见

表:

ACh

原始浓度〔• 〕 抽取量〔卩〕 浴槽终浓度〔〕

mol Llmol • L

-1-1

10 10

-5

10 20

-5

10 70

-5

10 20

-4

10 70

-4

10 20

-3

10 70

10 20

-2

10 70

-2

10 20

-1

10 70

-1

110

x

-8

310

x

-8

110

x

-7

310

x

-7

110

x

-6

310

x

-6

110

x

310

x

-

5 小学开学标语

-3

-

5

110

x

-4

310

x

-4

110

x

-3

按上述方法给药，当到达最小有效浓度后，每加一次药，将出现

一次收缩，待收缩反响达最大时，立即参加下一剂量，直至加药后收 缩反响不再

增加，即达最大效应，即描记出 的量效曲线〔第一条 量效曲线〕。连续用

ACh

10ml15

营养液冲洗标本两次，再每间隔分钟更 换一次营养液，直至收缩张力恢

复到正油泼面的正宗做法 常〔收缩张力曲线俄语自学入门 回至基线〕。 然后，参加拮抗剂筒箭毒碱

10mol

-3-1

•L

30l3 10 mol 10min

卩，即浴槽终浓度为。后按上述方法重复制作

x •L

-6-1

ACh

第二条量效曲线。

4.

实验结果分析

150%

丨从剂量反响曲线上求出未参加拮抗剂前冲动剂引起

反

响所需要的浓度〔・〕，以表示。参加不同浓度筒箭毒碱 后，的

mol[A]男生t恤 ACh

L

o

剂量反响曲线右移。从曲线上求出筒箭毒碱存在时，

_ 1

k

ACh

产生反响所需的浓度〔•「〕，以表示。

50%mol

[A]

B

2pA

〕值的计算

以〔丨为纵坐标，相应的筒箭毒碱浓度的负对数〔丨为

logA/A-1-I og[B]

o

横坐标，作图得一直线，此直线的方程式为：

pAx=-log[B]+log ]-1

〔 〕

[A]/[A

B

o

令，那么 ，其中为拮抗药 的浓度

[A]/[A

B

o

]=XpAx=-log[B]+log(X-1)[B]

〔• 〕。

mol L

-1

pAx[B]

反映拮抗药的拮抗效能，表示在浓度的拮抗药存在时， 冲动剂 需加

在倍浓度才能到达未加拮抗药时的效应。

X

pA1

2

表示当某浓度拮抗药存在时，需将冲动药的浓度加大 倍才

能到达未加拮抗药时的效应，即当时，

[A]=2[A

B

00

]log2[A]/([A]-1)

。

=0pA=-log[B]

, 。

上式表示当时，轴的截距即为值

log(X-1)=0-log[B]pA

5.

考前须知

1

〕标本勿用手拿，应以镊子取，亦不能在空气中暴露久，以免

失去敏感性。

23

〕标本不要触及浴管壁 〕浴管中的任氏液量应始终保持一致，否那么将

影响药效。 〕加药时不要滴在管壁上，应直接滴在液面上。 〕每只注射

45

器只能用来抽取一种浓度的药液。

六、实验报告要求

实验报告内容应包括： 【实验目的】、 【实验原理】、 【器材】、 【药

品与试剂】、【动物】、【实验方法】、【结果】及【讨论】等 局部。

【结果】要对所得实验数据进行统计分析； 【讨论】要对实验中 遇到的问

题进行描述并分析原因。

七、思考题

从量效曲线分析效应强度与药物剂量的关系，并指出其重要

意 义。

合用具有协同或拮抗作用的药物，对量效曲线有何影响？

八、实验成绩评定

原理描述 分

: 20

调试过程 分

: 10

数据记录 分

: 10

解决问题的能力 分

: 20

资料搜集 分

: 10

实验结果 分

: 10

实验效果 分

: 10