样品前处理的重要性！

样品前处理的重要性！

样品前处理对分析检测实验员来说是⾄关重要的⼀环，其占据整个分析过程的60%以上的时间，主要的分析误差也是来

⾃样品前处理环节。

⾸先必须讲解的是微量样品前处理技术，毕竟微量样品前处理更需要技巧。（主要是固相萃取技术哦！）

针头过滤器、超速离⼼是除去固体颗粒的微量样品前处理技术，⽽固相萃取（Solid-phaextraction，SPE）和固相微

萃取（Solid-phamicro extraction，SPME）是两种从各类复杂样品中提取净化微量待测组分的新技术，它们具有分离

速度快、操作简单、萃取效率⾼、⽆乳化等特点，在环境分析、药物分析、形态分析等⽅⾯有⼴泛应⽤，尤其适⽤⾊谱

分析样品前处理。

分析样品制备技术：将采集样品转化为适合（⾊谱）分析测定的形态

（1）固相萃取

它的优点是：

节省时间范爱农主要内容 ，交叉污染机会⼩，重现性好，回收率⾼，特别适⽤于微量试液处理。

固相萃取的关键是根据样品的性质正确选择固相萃取⼩柱及洗脱条件。

活化（再⽣） 加样 洗涤 洗脱

（2）固相微萃取

固相微萃取集“采样、萃取、浓缩、进样”于⼀体，能够与⽓相⾊谱或⾼效液相⾊谱仪联⽤样品前处理技术。

※与SPE 相⽐SPME具有以下优点：

(1)不使⽤有机溶剂萃取，降低了成本，避免了⼆次污染；

(2)操作时间短，从萃取进样到分析结束不⾜1h；

(3)样品⽤量少，⼏mL～⼏⼗mL；

(4)操作简便，可减少待测组分的挥发损失；

(5)检测限达 g/L～ng/L⽔平；

(6)适于挥发性有机物、半挥发性有机物及不具挥发性的有机物。

※固相微萃取的使⽤：关键在于“纤维头的选择”，这种情况类似于⾊谱柱的选择，主要灰蝶 根据分析对象的分⼦量和极性。

固相微处理技术适⽤于⽓体、⽔样、⽣物样品（如，⾎、尿、体液等）的萃取提取。

※固相微萃取技术条件的选择：

纤维表⾯固定相

表1常⽤固定相和适⽤范围

固相微萃取法在农药残留分析中的应⽤

固相微萃取法在农药残留分析中的应⽤

表2 SPME法在农药残留分析中的应⽤

※Duang！你最关⼼的蛋⽩质样品前处理！

蛋⽩质的分离、纯化对蛋⽩质结构功能研究具有重要意义，蛋⽩质分离技术是利⽤蛋⽩质的特性，如，溶解度、分⼦质

量⼤⼩、等电点、吸附特性和其它离⼦的⽣物亲和⼒等的不同，选择合适的分离模式并建⽴最佳的纯化⽅法。常⽤的分

离⽅法包括沉淀法、⾊谱法和电泳及⽑细管电泳。

⼏种⽅法供你选择！

（1）沉淀法

利⽤蛋⽩质在溶液中的不同溶解度。蛋⽩质的溶解度取决于分⼦中氨基酸的类型和电荷数，通过改变缓冲液pH值、离

⼦强度、介电常数或温度⽽改变蛋⽩质的溶解度。主要使⽤的沉淀分离技术有盐析、等电点沉淀、溶剂分级分离。

（2）透析法

利⽤半透膜只允许⼩分⼦透过⽽⼤分⼦不能透过的原理来分离溶液中的蛋⽩质。通常⾄少需要12h。

（3）超滤法

采⽤半透膜在⼀定压⼒下，按照分⼦质量⼤⼩分离溶质的⼀门技术。与透析相似，但速度快得多。

蛋⽩质的构成成分：氨基酸前处理

1.氨基酸的分离和检测⼿段，以往⽤化学分析法、层析法、⽐⾊法、⽓相⾊谱法、氨基酸⾃动分析仪。

2.随着⾼效液相⾊谱及填料的发展，HPLC在氨基酸检测⽅⾯显⽰了其特有的优越性，但⼤多数氨基酸⽆紫外吸收和荧

光发射特性，为提⾼分析检测灵敏度和分离选择特性，通常将氨基酸衍⽣，衍⽣⽅式有柱前衍⽣法与柱后衍⽣法。

与各种衍⽣相结合的氨基酸分析技术，构成了具有⼴泛适⽤性的现代氨基酸分析技术。

样品处理

测定蛋⽩质中的总氨基酸，必须先把蛋⽩质⽔解成游离氨基酸。可采⽤酸⽔解、碱⽔解和酶⽔解⽅法，其水瓶女狮子男 中以酸⽔解法

应⽤最⼴花英文 泛。

（1）酸⽔解

条件：

常⽤硫酸或盐酸进⾏⽔解。⼀般⽤6mol/LHCl，4mol/L H2SO4煮沸回流24⼩时左右。

优点：

可蒸发除去盐酸，⽔解彻底，终产物为L--氨基酸，产物单⼀，⽆消旋现象。

缺点：

⾊氨酸破坏，丝氨酸和苏氨酸有⼀⼩部分被⽔解，同时天冬酰胺和⾕氨酰胺的酰胺基被⽔解下来。

（2）碱⽔解

（2）碱⽔解

条件：

分析⾊氨酸可采⽤碱⽔解法，⼀般与5mol/L NaOH煮沸10～20⼩时。

优点：

⽔解彻底，⾊氨酸不被破坏，⽔解液清亮。

缺点：

产⽣消旋产物，破坏的氨基酸多。

（3）酶⽔解

某些氨基酸对酸或碱不稳定，在酸或碱⽔解时易被破坏，某些蛋⽩质样品在酸或碱⽔解不完全，影响某些氨基酸的回收

率。对这些样品可采⽤酶⽔解法。酶⽔解法可定量测定天东氨酸、⾕氨酸和⾊氨酸。

条件：

蛋⽩酶，如，胰蛋⽩酶、糜蛋⽩酶，常温37～40℃， pH值5～8 。

优点：

氨基酸不被破坏，不发⽣消旋现象。

缺点：

⽔解不文秘114 完全，中间产物多。

⽣物样品分析前处理技术

为什么要进⾏前处理？

存在形式多样：

游离型药物、与蛋⽩质结合型药物、代谢物、葡萄糖醛酸苷、硫酸酯缀合物等。

成分复杂：

蛋⽩质、糖、脂肪、尿素、Na+、K+、X-等。

（1）去除蛋⽩质

释放结合型药物、减少提取过程中乳化、保护仪器、提⾼灵敏度。。。

加⼊与⽔混溶的有机溶剂

中性盐

强酸

加⼊含锌盐、铜盐的沉淀剂

酶解法

（2）缀合物的⽔解

酸⽔解/酶⽔解

（3）有机破坏

测定⽣物样品中的⾦属离⼦，常⽤HNO3-HClO4作为消解剂，⼀般得到⾼价态⾦属离⼦。

（4）分离、纯化和浓集

使被测物在所⽤分析技术的检测范围内，常⽤萃取法：

液-液萃取法（LLE）

液-固萃取法（LSE）

相当于缩⼩的柱⾊谱法

浓集

末次萃取液尽量少

挥去萃取溶剂

（5）化学衍⽣化

可使药物：

具有能被分离的性质

提⾼灵敏度

增强稳定性

提⾼对光学异构体分离的能⼒

各类仪器样品前处理⼤汇总！

1.核磁共振波谱仪

（1）送检样品纯度⼀般应>95%，⽆铁屑、灰尘、滤纸⽑等杂质。⼀般有机物须提供的样品量：1H谱>5mg，13C谱

>15mg，对聚合物所需的样品量应适当增加。

（2）本仪器配置仅能进⾏液体样品分析，要求样品在某种氘代溶剂中有良好的溶解性能德国足球国家队 ，进样前应先选好所⽤溶剂。

常备的氘代溶剂有氯仿、重⽔、甲醇、丙酮、DMSO、苯、邻⼆氯苯、⼄腈、吡啶、醋酸、三氟⼄酸。

（3）检测前尽量提供样品的可能结构或来源。如有特殊要求（如，检测温度、谱宽等）请于说明。

2.红外光谱仪

为了保护仪器和保证样品红外谱图的质量，本仪器分析的样品，必须做到：

（1）样品必须预先纯化，以保证有⾜够的纯度；

（2）样品须预先除⽔⼲燥，避免损坏仪器，同时避免⽔峰对样品谱图的⼲扰；

（3）易潮解的样品，请⽤户⾃备⼲燥器放置；

（4）对易挥发、升华、对热不稳定的样品，请⽤带密封盖或塞⼦的容器盛装并盖紧，同时必须在样品分析任务单上注

明；

（5）对于有毒性和腐蚀性的样品，必须⽤密封容器装好。送样时必须分别在绩效考核管理制度 样品瓶标签的明显位置和分析任务单上注

明。

3.⽓相⾊谱-质谱联⽤仪

⽓相⾊谱仪均使⽤⽑细管柱（不能使⽤填充柱）。进⼊⽓相⾊谱的样品，必须在⾊谱柱的⼯作温度范围内能够完全汽

化。

4.液相⾊谱-质谱联⽤仪

（1）易燃、易爆、毒害、腐蚀性样品必须注明。

（2）为确保分析结果准确、可靠，要求样品完全溶解，不得有机械杂质；未配成溶液的样品请注明溶剂，已配成溶液

的样品请标明浓度。

（3）请尽可能提供样品的结构式、分⼦量或所含官能团，以便选择电离⽅式；如有特殊要求者，请提供具体实验条

件。

（4）液相⾊谱–质谱联⽤时，所有缓冲体系⼀律⽤易挥发性缓冲剂，如⼄酸、醋酸铵、氢氧化四丁基铵等配成。凡要求

定量分析者请提供标准对照品。

5.飞⾏时间质谱仪

（1）试样的种类、组分及样品量

本仪器擅长测定多肽、蛋⽩质，也可以测定其它⽣物⼤分⼦如多糖、核酸和⾼分⼦聚合物、合成寡聚物以及⼀些相对分

⼦质量较⼩的有机物，如，C60或C60的接枝物等。被测样品可以是单⼀组分也可以是多组分的，但样品组分越多，谱

图就越复杂，谱图分析的难度也越⼤；如果电离过程中组分之间存在相互抑制作⽤，则不⼀定能保证每个组分都出峰，

常规测定的样品量约为1-10⽪摩尔/微升。

（2）样品的溶解性

被测样品必须能够溶于适当的溶剂、最好是未溶解的固体或纯液体。若样品为溶液，则应提供样品的溶剂、浓度或含量

等信息。

（3）纯度

为取得⾼质量的质谱图，多肽和蛋⽩质样品应避免含氯化钠、氯化钙、磷酸氢钾、三硝基甲苯、⼆甲亚砜、尿素、⽢

油、吐温、⼗⼆烷基硫酸钠等。如果被测样品在预处理过程中不能避免使⽤上述试剂，则必须⽤透析法和⾼效液相⾊谱

法对样品进⾏纯化。⽔、碳酸氢铵、醋酸铵、甲酸铵、⼄腈、三氟⼄酸等都是⽤于纯化样品的合适试剂。蛋⽩质样品纯

化后，应尽可能冻⼲。样品中的盐可通过离⼦交换法祛除。

6.紫外-可见吸收光谱仪

（1）样品溶液的浓度必须适当，且必须清澈透明，不能有⽓泡或悬浮物质存在；

（2）固体样品量>0.2g，液体样品量>2mL。

7.⽓相⾊谱仪

能直接分析的样品应是可挥发、且是热稳定的，沸点⼀般不超过300℃，不能直接进样的，需经前处理。

8.液相⾊谱仪

样品要⼲燥，最好能提供要检测组份的结构；对于复杂样品，尽可能提供样品中可能还有其它哪些成分。

9.元素分析仪

（1）填写元素分析送样登记表，尽可能提供分⼦式和元素的理论含量或其它相关信息；

（2）样品必须是不含吸附⽔的均匀固体微粒或液体，并经过提纯。如，样品不纯（含吸附⽔、有机溶剂、⽆机盐或其

它杂质）会影响分析开学啦图片大全 结果，使测试值与计算值不符；

（3）样品应有⾜够的量，以满⾜⽅法和仪器的线性和灵敏度。

10.离⼦⾊谱仪

送检样品可以溶于⽔，或稀酸、稀碱，所⽤的酸碱不能含有待测离⼦。对于样品中含有待测元素，但在⽔、酸、碱溶液

中以⾮离⼦状态存在的化合物，需要进⾏相应的样品前处理。

11.等离⼦体原⼦发射光谱仪

（1）对送检样品（检测条件）的要求：

①请告知样品来源、种类、属性（如，矿⽯、合⾦、硅酸盐、特种固熔体、⾼聚物等）。

尽可能列出主要成份、杂质成份及其（估计）含量；待检元素中最低（估计）含量是多少？对于溶液，请写明介质成份

（溶剂、酸碱的种类及其（估计）含量）、 含氟（ F-）与否？因为氟（F-）将严重腐蚀雾化器！

②固体样品要制成不含任何有机物的溶液，其最终酸度控制为1mol，样品量：5-50mL 。如，含悬浮物或沉淀，务必过

滤；另请同时送上试剂空⽩溶液⽤作扣除空⽩，此项不收费！

③样品要求处理成溶液以后才送⾄测试中⼼。

（2）由于条件限制，本室⽆法分析下列元素和某些物质：

①样品加热、加酸溶解时易挥发损失者（如，B,Hg,S-2,Se及⽤氢氟酸(HF)溶样时的Si）；

②陶瓷、玻璃类及其它⽤⽆机酸不能溶解、只可⽤碱融熔者；

③有机硅、硅橡胶、塑料制品、纤维类或任何在500℃以内灰化、及其后的酸消解中：

A.易挥发损失者；

B.⽆法灰化或⽆法溶解者（如，B,Bi,Ge,Hg,Os,Ru,Sb,Se,Sn,Tl及⽤氢氟酸（HF） 溶样时的Si；特种固熔体、⾼聚物

等。）

12.原⼦荧光光谱仪

（1）样品分析⼀般要求

（1）样品分析⼀般要求

原⼦荧光光谱仪分析的对象是以离⼦态存在的砷（As）、硒（Se）、锗（Ge）、碲（Te）等及汞（Hg）原⼦，样品必

须是⽔溶液或能溶于酸。

（2）固体样品

①⽆机固体样品：样品经简单溶解后保持适当酸度。

检测砷（As）、硒（Se）、碲（Te）、汞（Hg），介质为盐酸（5% ，v/v）；

检测锗（Ge），介质为硫酸（5%，v/v）；

检测汞（Hg），介质也可为硝酸（5%，v/v），检测（As）介质也可为硫酸（2%，v/v）。

由于铜、银、⾦、铂等⾦属对待测元素的⼲扰较⼤，因此，该⼏类合⾦样品中的砷、硒、碲、汞不宜采⽤本仪器测定。

②有机或⽣物固体样品：样品经硝化处理为溶液并保持适当酸度，其介质酸度与⽆机样品同。

（3）样品中待测元素限量要求

由仪器灵敏度及分析⽅法决定，样品含待测元素上下限为0.05g/g-500g/g，不在此含量范围内的样品使⽤本仪器检测

将⽆法保证检测结果的准确可靠。

（4）样品份量

每检测1个元素，要求固体样品量不少于2g，液体样品量不少于20mL，⽔样不少于100mL 。

（5颐和园介绍 ）其它

送样前请查阅相关⽂献资料，尽量提供相关信息。

13.差⽰扫描量热仪

固体样品，在所检测的温度范围内不会分解或升华，也⽆挥发物产⽣。

样品量：单次检测⽆机或有机材料不少于20mg，药物不少于5mg。送样时请注明检测条件（包括：检测温度范围，

升、降温速率，恒温时间等）。

14.热重分析仪

样品量：不少于30mg。送样时请注明检测温度范围，实验⽓氛（空⽓、N2或Ar），升温速率，⽓体流量（如有特殊要

求）。

15.X-射线粉末衍射仪

送检样品可为粉末状、块状、薄膜及其它形状。粉末样品需要量约为0.2g（视其密度和衍射能⼒⽽定）；块状样品要求

具有⼀个⾯积⼩于45px x 45px的近似平⾯；薄膜样品要求有⼀定的厚度，⾯积⼩于45px x 45px；其它样品可咨询实验

室。

16.X-射单晶末衍射仪

送检样品必须为单晶。选择晶体时要注意所选晶体表⾯光洁、颜⾊和透明度⼀致。不附着⼩晶体，没有缺损重叠、解理

破坏、裂缝等缺陷。晶体长、宽、⾼的尺⼨均为0.1 -0.4mm，即晶体对⾓线长书香伴我成长演讲稿 度不超过0.5mm（⼤晶体可⽤切割⽅法取

样，⼩晶体则要考虑其衍射能⼒）。

样，⼩晶体则要考虑其衍射能⼒）。

17.透射电⼦显微镜

由于受电镜⾼压限制，透射电⼦束⼀般只能穿透厚度为⼏⼗纳⽶以下的薄层样品。除微细粒状样品可以通过介质分散法

并直接滴样外，其它样品的制备⽅法主要有物理减薄（离⼦和双喷减薄等）和超薄切⽚法。

⼀般情况下，需要采⽤物理减薄法的样品制备过程，须由⽤户⾃⼰完成（不具备此制样条件的院系，可租⽤本室的相关

设备）。超薄切⽚样品的制备，需经样品前处理、包埋、切⽚等复杂⼯序，周期较长（约⼀周左右）。

由于该仪器是⾼分辨型电镜，为确保仪器性能和发挥其⾼分辨象观察特点，⽬前主要接受材料领域的样品。

18.场发射扫描电⼦显微镜

送检样品必须为⼲燥固体、块状、⽚状、纤维状及粉末状均可。应有⼀定的化学、物理稳定性，在真空中及电⼦束轰击

下不会挥发或变形；⽆磁性、放射性和腐蚀性。含⽔分较多的⽣物软组织的样品制备，要求⽤户⾃⼰进⾏临界点⼲燥之

前的固定、清洗、脱⽔及⽤醋酸（异）戊酯置换等处理，最后由本室进⾏临界点⼲燥处理。

观察图像样品应预先喷⾦膜。⼀般情况下，样品尽量⼩块些 (≤10x10x5mm 较⽅便)。粉末样品每个需1克左右。纳⽶样

品⼀般需超声波分散，并喷涂超细微⾦膜。

19.扫描电⼦显微镜-X射线能谱仪

送检样品必须为⼲燥固体，块状、⽚状、纤维状、颗粒或粉末状均可。应有⼀定的化学、物理稳定性，在真空中及电⼦

束轰击下不会挥发或变形；⽆磁性、放射性和腐蚀性。

对含⽔份较多的⽣物软组织样品，要求⽤户预先进⾏临界点⼲燥前的固定、清洗、脱⽔及⽤醋酸（异）戊酯置换等处

理。最后再由本室进⾏临界点⼲燥处理。图像观察样品应预先镀⾦膜，成份分析样品必需镀碳膜。⼀般情况下,样品体积

不宜太⼤（≤5x5x2mm较适合）。

20.电⼦探针

定量分析的样品必须磨平抛光、清洗⼲净。若样品不能进⾏表⾯磨平抛光（将影响分析精度）处理应事先说明。

为测试⽅便和节约机时，样品应先切成⼩薄⽚，不能切割制样，必须先与测试⼈员商量。应先标记好分析⾯上的测试

点，⽆标记测试位置时，测试时只选有代表性、较平整位置测试。

液体样必须先浓缩⼲燥。分析的样品必须是在⾼能电⼦轰击下物理和化学性能稳定的固体、不分解、不爆炸、不挥发、

⽆放射性、⽆磁性。送样时最好注明样品可能包含什么元素。样品必须喷涂⼀层碳膜。

END