黄素珍

更新时间:2023-04-19 13:07:13 阅读: 评论:0


2023年4月19日发(作者:长沙气候)
食品中单核增生细胞李斯特氏菌快速检测研究
单核细胞增生李斯特氏菌在病原学上作为一种人畜共患和食源性疾病的致
病菌已得到世界范围普遍的公认。近年来,如何分离和鉴定食品中单核细胞增生
李斯特氏菌已成为qq直播怎么开 研究热点。本文结合近十年的各种该病菌的快速检测方法作了
系统综述,介绍了针对该病菌的快速检测方法, 如显色培养基快速检测方法、
酶联免疫试验检测方法、结合单克隆抗体技术got的意思 的免疫学检测方法、反转录-PCR
检测方法、生物芯片,以期对食品中单核细胞增生李斯特菌的检测起到帮助和指
导作用。

标签:单核增生细胞李斯特氏菌;检测方法

单核细胞增生李斯特氏菌是一种短小的革兰氏阳性无芽孢杆菌[1],它能引
起人畜的李氏菌的病,该病发病率较低,但致死率高达 20%30%[2],感染后
主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在
于自然界中,食品中存在的单核细胞增生李斯特氏菌对人类的安全具有危险,
菌在4℃的环境中仍可生长繁王者干将莫邪 殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一,
因此,在食品卫生微生物检验中,必须加以重视。本文拟对单核细胞增生李斯特
氏菌的检测方法及其当前存在的问题等作系统介绍,以期为进一步深入研究提供
参考。

1快速检测方法

1.1 显色培养基快速检测方法

显色或荧光鉴别培养基的基本原理是针对李斯特氏菌的-D-葡萄糖苷酶和
毒力因子PI-PLC酶,设计相应的底物,加入到常规选择性培养基中,利用酶对
底物的分解,产生荧光或显色物质,使其菌落形态或颜色不同于其他李斯特氏菌
和非李斯特氏菌,从而实现对李斯特氏菌快速定性鉴定和菌落数目快速定量。
淑红等[3]检测了显色培养基的特异性和灵敏度。实验证明此种检测方法具有较
高灵敏度、特异性和选择性,是非常有价值的分离平板。

1.2 免疫学检测方法

1.2.1 酶联免疫试验检测方法(ELISA

早期起初人们采用简单直接的细胞计数法进行检测,运用细胞计量术对牛奶
中的单核细胞增生李斯特氏菌进行检测。但是由于病原微生物的含量跨年祝福语 很低,仅通
过细胞计数的方法检测灵敏度无法达到。之后,基于抗原抗体的ELISA技术被
广泛应用于食品检测中,用酶联荧光的方法检测食品中的单核细胞增生李斯特氏
菌。ELISA的方法虽然灵敏度较细胞计数方法有很大的提高,但是由于ELISA
检测的结果容易受多种因素影响,并且容易出现假阳性的结果,所以不能满足检
测的要求。



1.2.2 结合单克隆抗体技术的免疫学检测方法

针对和学习前人的科学成果,人们在ELISA的基础上结合单克隆抗体技术
建立了一种快速检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法[4]。建立了以高度特异的
针对单核细胞增生李斯特菌和无害单增生李斯特氏菌的共同表位的单抗构建的
快速酶免疫检测方法以及以抗单核细胞增生李斯特氏菌的特异单抗为试剂所建
立的快速检测方法[5]。国内焦新安等制备了针对单核细胞增生李斯特菌的特异
性单抗并研制了检测该菌的ELISA检测试剂盒,推动了单核细胞增生李斯特氏
菌检测方法的发展。

1.3 分子生物学检测方法

1.3.1 反转录-PCR检测方法

PCR反应中,死细胞的存在使得DNA扩增数要大大降低,从而造成实验
结果的假阳性,分辨活细胞和死细胞对避免假阳性至关重要。反转录-PCR
mRNA反转录成cDNA,然后通过特异引物扩增目标cDNA进行PCR,因其具
有高度敏感性,被应用于检测具有活性的单核细胞增生李斯特氏菌。采用反转录
-PCR的检测结果与一般PCR的检测结果无显著差异,但其反转录-PCR却有效
地检测到单核细胞增生李斯特氏菌活菌。李晓红等[6]利用反转录-PCR方法对出
口食品中单核细胞增生李斯特氏菌进行检测,结果通过传统检测方法确证,符合
率达到100%,灵敏度高。

1.4 生物芯片

生物芯片补中益气汤的标准配方 是近年来在生命科学领域中迅速发展起来的一项高新技术,它主要
通过微加工技术和微电子技术在固体芯片表面构建的微型生物化学分析系统,
实现对细胞、蛋白质、DNA以及其他生物组分的准确、快速、大信息量的检测,
使样品检测、分析过程连续化、集成化、微型化。生物芯片能够在短时间内分析
大量的生物分子,使人们快速准确地获取样品中的生物信息,它为食源性疾病快
速检测提供了良好的发展空间。王刚等正用含有小牛血清BSA(减少对其它菌
的非特异性吸收)SiO2包被的蛋白芯片对C11EG抗体驾驶证扣分新规定 (单核细胞增生李斯特
氏菌一种IgG抗体)进行研究[7]。目前,应用于食品中致病菌检测的生物芯片
技术还在研究中,但我们相信建立、应用生物芯片技术将成为食品中单核细胞增
生李斯特氏菌检测方法的一个发展方向。

2. 展望

单核细胞增生李斯特氏菌是WHO关注的食源性致病菌之一,也是我国食品
污染物监测网中检测的重要食源性致病菌之一。随着多学科的交叉,食源性致病
菌的检测一方面向综合的方向发展,即集多种检测技术于一体的多功能、全自动
化大型检测仪器不断出现;另一方面,针对单个菌种和菌属的新型培养基、免疫
试剂盒和分子试剂盒也会不断推向市场。无论是从哪个角度,未来检测的方向都


是向着敏感性高、特异性强、检测时间短的检测方法的方向发展。相信随着对李
斯特氏菌的全方位深入了解和认识,更方便快捷的检测工具会不断出现。

参考文献

[1] 吴清平, 李善志, 张菊梅, . 单核细胞增生李斯特菌检测技术研究
进展[J]. 中国卫生检验杂志, 2005 157 888-890.

[2] 沈晓盛, 郑国兴, 李庆, . 食品中单核细胞增生李斯特菌的危害及
其检测[J]. 食品与发酵工业, 2004 308 87-91.

[3] 張淑红, 吴清平, 张菊梅. 显色培养基在单核细胞增生李斯特菌快速
检测中的应用研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2007 171 43-45.

[4] 梁锐萍, 黄素珍, 胡慧强. 单核细胞增生性李斯特氏菌及其检验[J].
物科学与动物医学, 2004 2111 47梦鸽歌曲 -49.

[5] 焦新安, 刘秀梵. 李斯特氏菌快速检测研究进展[J]. 肉品卫生, 1996
111 28-31.

[6] 李晓红, 蒋琴娣, 祛皱紧致 吴仲梁, . 利用反转录-PCR方法快速检测食品
中单增李斯特菌[J]. 检验检疫科学, 2003 136 20-22.

[7] 王刚, 邱阳. 单核细胞增生李斯特菌及其快速检测[J]. 微生物学杂志,
2011 211 52-53.



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