2023年4月17日发(作者：求长生)抗人球蛋白（Coombs）试验标准操作规程
1.【目的】
规范抗人球蛋白试验标准操作规程。
2.【职责】
1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签
字：室负责人、科主任。
3.【标本类型及实验前准备】
1．标本类型
EDTA-2K抗凝全血
2.患者准备
静脉采血
3.容器、添加剂类型
EDTA-2K抗凝静脉血2ML,混匀。
4.仪器设备
低速离心机
5.实验试剂
1.抗人球蛋白血清（广谱、单价），市售合格产品。
2.用不完全抗D致敏的5%RH（D）阳性红细胞盐水悬液，供阳性对照用。取3
个人的O型红细胞，混合，经盐水洗涤后取压紧的红细胞，加等量抗D血清，置
37℃水浴致敏30min,取出后离心去除上清液，用盐水洗涤3次，最后再用盐水
配成5%红细胞悬液。
3.巡视组组长
正常人5%D阳性红细胞悬液（未致敏），供阴性对照用，除不用抗D血清致
敏外，按上法配制。
4.【测定原理】
利用抗人球蛋白血清可与体内已被不完全抗体或补体致敏红细胞产生凝集反应，
可检查红细胞是否已被不完全抗体所致敏，如新生儿溶血病（胎儿红细胞被母亲
血型抗体致敏）、溶血性输血反应（输入的不相合红细胞被受血者不完全抗体致
敏）、自身免疫性溶血性贫血（患者红细胞被自身抗体致敏）以及药物诱导产生
的自身抗体（由甲基多巴类药物、青霉素等致敏）。
5. 【程序性操作步骤】
1.取受检者红细胞，以生理盐水洗涤3次，末次洗涤后，将上层盐水倒尽，再以
滤纸将管口附着的盐水吸去，配成5%红细胞盐水悬液晓之以理
。
2.取上述5%受检者红细胞生理盐水悬液1滴，移入一小试管（10mm*60mm），加
抗人球蛋白血清1滴，混匀。
3.阳性对照 用不完全抗D血清致敏的5%D阳性红细胞悬液1滴，加抗人球蛋白
血清1滴，混匀。
4.阴性对照 正常人5%D阳性红细胞悬液1滴加抗人球蛋白血清1滴，混匀。
5.受检者以及阳性、阴性对照管同时以1000r/min离心1min，轻轻侧动，观察
结果。
6.【生物参考区间】
正常人阴性
7.【临床意义】
直接试验是检查被检红细胞上有boss的意思
无不完全抗体，间接试验是检查血清中游离的不
完全抗体。直接Coombs’试验较间接试验对AIHA更有诊断价值。用特异性单价
抗血清可将AIHA分为三型：IgG／C3阳性，占67％；单独IgG性，占20％；单
独C3性，占13％；本试验怎么酱牛肉好吃又简单
阳性在传染性单核细胞增多症、SLE、恶性淋巴瘤、
慢性淋巴细胞白血病、癌肿、铅中毒、结节性动脉周围炎结果主要见于下列几种
情况：
1.1 自身免疫性贫血，（IgG）型引起的溶血性贫血，本试验直接反应常呈强阳
性，间接反
外貌成语
应大多阴性，但亦可阳性。
1.2 药物诱发的关于元宵的诗句
免疫性溶血性贫血①-甲基多巴型：直接及间接反应均阳性。
②青霉素型：
直接反应阳性，间接反应阴性，以上二型如以正常红细胞先与有关药物于
37℃培育后
鹅蛋脸美女
再加病人血清、间接反应均为阳性。③福阿亭型：（奎宁等药换门
物）抗体通常
为IgM，偶
有IgG型者，直接反应为阳性，间接反应阴性，但如用IgG抗血清做试剂
则结果大部
分均为阴性，但如培育时加入新鲜正常人血清（供应补体）则结果为阳性。
1.3 冷凝集素综合征直接反应阳性，间接反应阴性（试验需在37℃下进行）由
于本病红细
胞膜附着的是补体C4和C3而不是IgG或IgM，如果用抗IgG或抗IgM抗
血清做试验
时，则结果阴性，如以抗补体的抗血清做试验则直接反应阳性。
1.4 新生儿同种免疫溶血病，因Rh血型不合所致溶血病，直接及间接反应均强
阳性，持续
数周、换血输血后数天内可变为阴性，由于“ABO”血型不合引起的溶血病，
结果常为
阴性或弱阳性。
1.5企业违反
红细胞血型不合引起的输血反应，ABO或Rh血型不合输血，供者的红细胞
被受者的血
型抗体致敏，在供者被补气血的中药方子
致敏的红细胞完全破坏以前，直接反应阳性，Rh阴
性者如过去
不曾接受过Rh阳性者的血或曾妊娠胎儿为Rh阳性者，间接反应阳性，如
无上述接触，
第一次输血后（Rh阳性的血），数天之内间接反应也会变为阳性。
8.【注意事项】
1.红细胞洗涤不充分，微量残留的未结合的球蛋白将要中和抗体球蛋白试剂。
2.直接抗球蛋白试验的试管在初读结果之后，再放在室温中5-10分钟。这样孵
育之后，若细胞被C3d或IgA所致敏时，重新离心观察结果可使阴性试验转变为
阳性结果。而IgG致敏的红细胞在孵育以后可能反应更弱。
3.试剂含有0.1%W/V叠氮钠，如果摄入会中毒。
