2023年4月16日发(作者:国际名品)围产期孕妇B组链球菌检测的临床意义
【中图分类号】r71 【文献标识码】a 【文章编号】1004—7484
(2013)09—0711—02
b族链球菌(group b streptococci,cbs)是一种革兰阳性球菌,
常定植于人下生殖道及胃肠道,也可定植于婴幼儿上呼吸道[1-2]。
20世纪60年代首次发现其可导致严重的新生儿感染,随后进行了
大量的研究,发现b族链球菌在围产期感染中是第一位的致病菌,
可导致围产儿死亡。同时也是孕产妇生殖道感染的重要致病菌,可
以导致泌尿系统感染、羊膜绒毛膜炎、产褥感染、孕产妇败血症和
早产[3-6]。1996年美国疾病控制和预防中心(centers for dia
control and prevention,cdc)联合其他专业机构,制定了“围
产期b族链球菌疾病预防指南”,于2002年进行了一次较大的修改,
并在2010年11月更新了指南。经过10年多的实践,新生儿gbs
感染率下降了约80%[7]。长期以来我国对b族链球菌感染现状不够
重视,直至近期,国内报道了一些b族链球菌感染导致新生儿死亡
的病例,且研究提示,新生儿肺炎死亡病例中,b族链球菌是第一
位的致病菌[8-急性肾衰竭
9]。因此,本研究旨在比较不同方法检测b族链球
菌阳性的准确性,了解妊娠晚期b族链球菌带菌状况及其对妊娠结
局的影响。
1 材料与方法
1.1 研究对象 收集2011年5月~2012年12月在我院妇产科住院
和门诊进行b组链球菌检测的孕妇1100例,孕期为35~37周,平
均年龄26.514.2岁,其中高龄孕妇(≥35岁)109例。经产妇
81例,初产妇910例。所有孕妇的孕周均经末次月经、早中孕期b
超检查进行确认和核对。近期药物应用史,经孕妇知情同意,取材
由临床医师规范采集阴道和直肠拭子2份,立即送检。
1.2 实验材料 todd hewrtt培养肉汤、哥伦比亚血琼脂、胎牛血
清购于美国gibco公司,rapid id 32 staep鉴定板条购于法国梅
里埃公司,b组链球菌核酸检测试剂盒由中国泰普生物科技有限公
司提供,实时荧光pcr仪购自是美国stratagen创业之道
e公司。
1.3 方法
1.3.1 标本采集:具体方法参照2002年cdc推荐的取材方法[10],
取材时不需要使用阴道窥器,每例孕妇用两根拭子(阴道下1/3内
分泌物,肛门括约肌上2~3 cm处直肠分泌物)同时取材,一份用
于细菌培养,一份用于实时pcr技术检测。
1.3.2 gbs的分离细菌与培养鉴定:将采集的拭子及时送检实验室,
首先在安全柜内将沾有分泌物拭子头剪下置于增菌todd hewrtt肉
汤中,37℃18~24h后,分别接种于10%胎牛血清和哥伦比亚血琼
脂平皿,5%co2环境、37℃18~36h,挑取有溶血环的细小菌落,
经革兰染色镜检为阳性球菌,触酶试验阴性,进行rapid id 32 staep
板条鉴定,若为b组链球菌,再进行细菌药敏mic实验。
1.3.3 gbs核酸的提取和实时荧光pcr检测:将取样后的拭子内加
入1ml 清洗液(试剂盒内提供),室温震荡5min,收集清洗拭子后
的液体至1.5ml离心管,12000rpm/报答父母的作文
min 离心3min,弃上清,加入
清洗液1ml,离心后弃上清,再取80l清洗液重悬沉淀,加入固
型dna提取物0.1g,震荡5min后,95℃ 2min,冰上5min,
12000rpm/min 离心5min,然后取上清进行pcr扩增。实时荧光pcr
扩增程序参照说明书进行操作。
1.3.4 测序鉴定:扩增后pcr产物送上海生物工程股份有限公司进
行测序分析。
1.4 统计学分析 应用统计学软件spss13.0对所有检测数据进行
分析,计量资料以xsd表示,计数资料进行x2检验,以p6h、初
产妇产程延长、阴道检查次数>6次、伴发子宫内膜炎及施行剖宫产
时更易发生感染。在产科发热患者血培养所分离到的细菌中,gbs
高达11%~21%。gbs感染后的临床特点是发热出现早,平均产后11五大淡水湖
h
即发热,伴有畏寒、心率快、腹胀、子宫复旧不良,宫旁或附件触
痛。有报道在gbs(+)而行剖宫产的妇女中,产后子宫内膜炎发生
率为61.1%,显著高于gbs(-)组,gbs(+)也与产后盆腔炎、蜂
窝组织炎等相关,35%由gbs单独引起,65%与其他细菌混合感染
[13]。在本研究中,gbs感染与否对孕妇早产的影响没有统计学差
异,但在导致新生儿获得性感染方面,gbs感染阳性组新生儿感染
机率明显高于gbs检测阴性的。原因可能为:根据新生儿gbs感染
发生的时间分为早发型、晚发型及复发型。早发型指出生后7d内
发病,通常发生在出生后24h或72h内,以新生儿败血症为主,由
宫内垂直感染所致;晚发型感染通常指出生7~90d内的感染,可
由产时垂直传播、院内感染或其他因素所致,90%为ⅲ型gbs,以芹菜馅包子
肺
炎、脑膜炎为主。有产科并发症的早产儿易受感染,发病率是足月
儿的7倍,因脓毒血症死亡者高达90%;复发性是指新生儿gbs菌
血症、脑膜炎等治愈后,经过一段时间间隔发生了与gbs菌血症、
脑膜炎有关的新的临床疾病,并从体液中找到gbs。发病高峰在出
生后90d内,发病率为0~8.8%[14]。由于新生儿疾病的基础背景
不同,预防感染的措施对于早发型感染有效,但是不能预防晚发型
感染。
本研究显示,实时荧光定量pcr方法检测围产期孕妇是否伴有gbs
感染,具有较高的敏感性和特异性,如有gbs感染阳性的孕妇,该
方法有利于临床接诊医生及时采取诊疗措施,降低母体宫腔感染和
新生儿早期侵入性感染的发生率,提高母婴的生活质量,该方法有
望成为围产期孕妇监测体内是否有感染的常规检测项目。
小结:围产期孕妇b族链球菌感染阳性明显增加宫内感染及新生儿
入侵性感染的发生率,对妊娠结局造成不良影响。实时pcr检测b
族链球菌感染有较高的敏感度和特异度,有望成为妊娠晚期孕妇常
规检测b族链球菌的方法。
参考文献:
[1] 时春燕,曲首辉,杨磊,等.妊娠晚期孕妇b族链球菌带菌状
况的散文二篇
检测及带菌对妊娠结局的影响.中华妇产科杂志,2010,45:
12-16.
[2] edwards ms, nizet v, baker cj. group b streptococcal
infections//remington js, klein jo, wilson cb, et
ious dias of the fetus and newborn infant. 6th
elphia: elvier, 2006
[3] sweet rl,gibbs ious dias of the female
genital trael kluwer:lippincott
williams&wilkim.2009,1-9.
[4] centers for dia control and ti黑加仑
on of
perinatal group b streptococcal d guidelines
from recomm rep.2002,51:1-22.
[5] van byke mk,phares cr,lynfield r,et al. evaluation
funiversal antenatal screening for group b 8streptococcus.n
engl .j med,2009,360:2626-2636.
[6] barcaite e,bartuvieius a,tameliene r,et ence
of maternal group b streptococcal colonization in european
obstet gynecol scand,2008,87:260-271.
[7] jordan ht, farley mm, craig a, et al. revisiting the
need for vaccine prevention o牛油果英语
f late-ont neonatal group b
streptococcal dia. pediatr infect dis j, 2008, 27:
1057-1064.
[8] 李铁耕.秦雨春.新生儿b族链球菌败血症合并化脓性脑膜炎
两例.中国新生儿科杂志,2006,21:304暗棋规则
-305.
[9] 孙芾,林宏,于俊峰,等.孕妇b型链球菌感染率及药物敏感
性分析.江西医学检验,2005,23:193-194.
[10] centers for dia control and tion
of perinatal group b streptococcal d
guidelines from cdc.
[11] 马延敏,吴连方,黄醒华.孕妇b族溶血性链球菌带菌与母婴
预后的关系.中华妇产科杂志,2000,35:32-35.
[12] verani jr, mcgee l, schrag sj. prevention of perinatal
group b streptococcal dia: revid guidelines from cdc,
2010. mmwr recomm rep, 2010,59:1-36.
[13] daniels j, gray j, pattison h, et al. rapid testing
for group b streptococcus during labour: a test accuracy
study with evaluation of acceptability and
cost-effectiveness. health technol asss, 2009,13 :1-154.
[14] nabil abdullah el aila, inge tency, geert claeys, et
ison of culture with two different qpcr assays for
detection of rectovaginal carriage of streptococcus
agalactiae (group b streptococci) in pregnant women. res
microbiol. 2011,162(5):499-505.