2023年4月16日发(作者：高温作业分级)维普资讯
２ｏｏ２￣第２４卷第２期Ａｎａｔ Ｒｅｓ，２０Ｏ２，Ｖｏｌ ２４。Ｎｏ．２
颞下窝的手术员工奖励
中用于牵开颞下窝的牵开器压迫气管
造成窒息。对于眼．上颌神经的吸引人
显露，均采用颈前两
侧垂直切口。切开皮肤和皮下组织后，钝性分离出
甲状舌骨肌和下颌骨，在两者之间用蚊氏钳向背侧 ）洗切片（１０ ｍｉｎ３次）。在室温下用生物素化兔
分离直到显露出翼内肌及其在翼状窝的附着处。用
曲别针作成的拉钩保持该显露状态。
为了显露眼．上颌神经，将翼内肌附着处的吻侧
部分从翼状窝骨面分离。分离时注意勿损伤外侧的
脑膜中动脉，因为该分离过程在脑膜中动脉与内侧
的翼内板和尾侧的岩鼓缝围成的近似三角区内进行
（图１）。将该区域内的颅底骨质用电钻小心地磨
除，当接近颅内颅底时，用细钩挑除该靠近眼．上颌
神经的薄层骨壁。暴露出的眼．上颌神经为完整的
一
束，其直径约为２～３ｍｍ。所磨的骨也与之近似，
以充分暴露神经而又不损伤周围的结构，尤其是圆
孔。我们用电凝和细钩完全离断神经后，去除拉钩，
缝合切口，吸去大鼠咽腔和气管内的分泌物，关闭气
管皮肤瘘。将大鼠置于温暖环境中，直到苏醒。
ＭＰＰ
ＯＦ
ｍ
ＥＣＦ
ＰＴＦ
图１去除部分翼状窝骨质（斜线部分）以暴露神经。主
要的临近结构包括岩骨缝（ＦｒＦ）、鼓泡（１１３）、内侧翼
状板（ＭＰＰ）、颈外动脉孔（ＥＣＦ）、卵圆孔（ＯＦ）、脑膜
中动脉（ＭＭＡ）。
１．２灌注固定和冰冻切片
手术后２～７ ｄ，用三溴乙醇（２５０ ｍｇ／ｋｇ）重新麻
醉动物。经心脏灌注肝素化的（１５ ０００ ＩＵ／小学教学设计
Ｌ）磷酸钠
缓冲液（ｐＨ ７．４），继而灌注Ｓｔｅｐｈａｎｉｎｉ固定液（２％多
聚甲醛，０．２％苦味酸，用０．１Ｍ磷酸钠缓冲液稀释，
ｐＨ ７．２）。灌注１０ ｍｉｎ后，取出松果体、三叉神经节
和三叉神经，在相同的固定液中后固定２４ ｈ。人
２０％蔗糖溶液过夜后，用冷冻切片机对松果体行矢 被部分切断的大鼠（图２Ｂ），ＰＡＣＡＰ．ＩＲ神经纤维的
状方面的切片，厚２５ ，收集在明胶玻片上。
１．３免疫组织化学反应
用小鼠抗ＰＡＣＡＰ单克隆抗体为第一抗（ｃｏｄｅ
ｎｏ．Ｍａｂ ＪＨＨ１，Ｂｉｓｐｅｂｊ奢侈的英文
ｅｒｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｄｅｎｍａｒｋ；稀释
１：５）［１６］，采用以下生物素化酪胺盐放大步骤
１２９
（ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄ ｔｙｒａｍｉｄｅ ａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ） １２ Ｊ：切片
在４℃下经抗ＰＡＣＡＰ抗体孵育１２—１８ ｈ后，用
０．２５％牛血清白蛋白（含０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ．１ＯＯ）（ＰＢＳ－
抗鼠抗血清（Ｅ４６４，Ｄａｋｏ，Ｇｌｏｓｔｒｕｐ，Ｄｅｎｍａｒｋ；稀释１：
１ ６ｏｏ）孵育切片６０ｍｉｎ。用ＰＢＳ．ＢＴ洗切片５ ｍｉｎ３
次后，室温下在ＡＢＣ．过氧化物酶复合体（Ｖｅｃｔｏｒ，
Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ，ＵＳＡ；稀释１：１５ｏ）中孵育３０ ｍｉｎ。用ＰＢＳ．
洗５ ｍｉｎ３次后，切片在生物素化酪胺盐
（ＤｕＰｏｎｔ ＮＥＮ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ；稀释１：１００）中孵育。用
ＰＢＳ—ＢＴ洗５ ｍｉｎ３次后，用ＡＢＣ．过氧化物酶复合
体孵育（稀释１：１５０）。用ＰＢＳwin10浏览器edge
．ＢＴ洗切片５ ｍｉｎ２
次后，再用０．０５Ｍ ＴｍＳ（ｐＨ ７．６）洗１０ ｍｉｎ。切片在
０．０５％３，３’．二氨基联苯胺／ＨＣ１和０．００５％ＨｚＯｚ ｉｎ
ＴＲＩＳ／ＨＣＬ缓冲液（ｐＨ ７．６）中孵育１５ ｍｉｎ。用蒸馏
水洗切片终止反应。最后，切片干后用ＤｅｐｅｘＲ封
片。在Ｚａｉｓｓ显微镜下观察结果并照相－ｏ
计数每只大鼠近松果体中线８张切片的ＰＡＣＡＰ
免疫反应神经纤维，算出手术和对照组每只动物的
神经纤维平均数。两个实验组神经纤维平均数间的
比较用Ｍａｎｎ．Ｗｈｉｍｅｙ非配对ｔ检验。为检验ＰＡＣＡＰ
抗血fashion
清的特异性，采用经用抗原（２０ ｔｃｃ＇ｍ￣）预吸收
的抗体孵育切片，结果反应为阴性。
２结果
对照组松果体的ＰＡＣＡＰ－ＩＲ神经纤维数量多
（图２Ａ）。这些神经纤维先进入松果体包膜，然后或
沿血管走行或分布于松果体细胞之间的腺实质中。
这种分布形式也见于其他种类的松果体神经纤
维［１ ７＿。
经手术的２０只大鼠，６只的眼．上颌神经被完全
切断，其它则为部分切断。该５只眼．上颌神经被完
全切断的大鼠之松果体的ＰＡＣＡＰ．ＩＲ神经纤维，包
括被膜上和腺实质中的神经纤维，对照组被膜为
２５．８３５．４２；手术组被膜为１１．６７３．７５；对照组腺
实质为１４．５８６．６７；手术组腺实质为Ｏ．４２Ｏ．０４，
均显著少于对照组大鼠；腺实质中的神经纤维减少
更加显著，在一些切片几乎完全消失在眼一上颌神经
减少不明显，说明切断神经以前的操作不影响松果
体的ＰＡＣＡＰ．ＩＲ神经纤维数量。
３讨论
以上研究结果表明，大鼠松果体的ＰＡＣＡＰ．ＩＲ
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ｌ３０
堂 窒２Ｑ 年第２４卷第２期Ａｎａｔ Ｒｅｓ，２Ｏ０２，ｖ０１ ２４，Ｎ０．２
神经纤维起源于三叉神经节。切除颈上神经节、蝶
ａｄｅｎｙｌａｔｅ ｃｙｃｌａｓｅ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ（ＰＡＣＡＰ）：ＣＯｌｎｐ￣ｓｏｎ
腭神经节和耳神经节对松果体ＰＡｃＡＰ．ＩＲ神经纤维
ｗｉｈｔ ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｉｔｎａｌ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ（ＶＩＰ）ｂｉｎｄｉｇｎ ｓｉｔｅ
数量无影响（另文发表）。因此，可以排除这些部位
ｌｅｃＭｉＴ￣ｆｉｏｎ ｉｎ ｒａｔ ｂｒａｉｎ ｓｅｃｔｉｏｎｓ．Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ，１ Ｉ２，５７５：ｌ１３
是大鼠松果体ＰＡＣＡＰ．ＩＲ神经纤维的主要来源。
１２３．
１０．Ｓｉｍｏｎｎｅａｕｘ Ｖ，Ｏｕｉｃｈｏｕ Ａ，Ｐｅｖｅｔ Ｐ．Ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ａｄｅｎｙｌａｔｅ ｃｙｃｌａｓｅ－
三叉神经节中有支配脑血管的ＣＧＲＰ．ＩＲ和ＳＰ．
ａｃｔｉｖａｔｉｇｎ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ（ＰＡＣＡＰ）ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ ｍｅｌａｔｏｎｉｎ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ
ＩＲ的胞体【１８，１９ Ｊ，我们还知道刺激这些神经引起脑动
ｆｒｏｍ ｒａｔ ｐｉｎｅａｌ ｌｇｎａｄ．Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ，１９９３，６０３：１４８—１５２．
脉的收缩 。松果体的血管来自于蛛网膜下腔，因
１１．Ｓｉｍｏｎｎｅａｕｘ Ｖ，Ｋｉｅｎｌｅｎ ＣＰ，Ｌｏｅｍｅｒ ＪＰ，ｅｔ ａ１．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ，
此该腺体内的血管有三叉神经节来源的神经纤维并
ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ
ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ／ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ａｄｅｎｙｌａｔｅ ｃｙｃｌａｓｅ－ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ
不奇怪。支持这点的是将ＰＡＣＡＰ注射进兔血管引
ｒｃｅｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ ｐｉｎｅａｌ ｇｌｎａｄ
Ｎｅ￣ｉｅｎｃｅ，１９９８，８５：８８７—
起了松果体血流的增加【２０ Ｊ。
８９６．
本实验见到的在切断眼．上颌神经后，松果体腺
１２．Ｍｏｉｌｅｒ Ｍ， Ｊ，Ｈａｎｎｉｂａｌ Ｊ．Ｉｎｎｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔ
实质细胞间的神经纤维的消失，加上他人的ＰＡＣＡＰ
ｐｉｎｅａｌ ｇｌａｎｄ ｂｙ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ａｄｅｎｙｌａｔｅ ｃｙｃｌａｓｅ－ａｃｔｉｖａｔｉｇｎ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ
能够刺激松果体腺细胞分泌褪王源图片
黑素的实验结
（ＰＡＣＡＰ）－ｉｍｍｕｎｏｒｅａｅｆｉｖｅ ｎｅｒｖｅ ｉｆｂｒｅｓ．Ｃｅｌｌ Ｔｉｓｕｅ Ｒｅｓ，１９９９，
２９６：２４７—２５７．
果［２０，２１ Ｊ，支持三叉神经的感觉神经在松果体内起调
１３．ＵｕＷ，Ｆａｈ￣ｒｎｇ Ｊ，Ｈａｎｎｉｂａｌ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｅｓｅｎｃ￣ｏｆ ＰＡＣＡＰ－
节褪黑素分泌作用的假说。但是这种影响的程度尚
ｉｍｍｕｎｏｒｅａｅｆｉｖｅ ｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｉｇｅｍｉｎａｌ ｇａｎｇｌｉｏｎ ｏｆｔｈｅ ｓｈｅｅｐ：
需进一步研究。
Ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ａ ｔｒｉｇｅｍｉｎａｌ ｉｎｎｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｉｎｅａｌ ｇｌａｎｄ．
松果体腺细胞分泌褪黑素由多个神经通路调
Ａｎｎａｌｓ ｏｆ ｈｔｅ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０００，９２１：３４０一
ｌ３．
节，其中颈上神经节的交感神经支配似乎占主要地
１４．Ｓ ｏｔａｎｉ Ｙ，Ｙａｍａｎｏ Ｍ，Ｓｈｉｏｓａｋａ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ａｎｄ
位。哺乳动物松果体具有来自不同部位的多种肽能
ｏｒｉ６ｎｓ ｏｆ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ Ｐ（ＳＰ）一，ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ ｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｄｅ ｐｅｐｆｉｄｅ
神经支配。本文证实三叉神经节ＰＡＣＡＰ－ＩＲ神经元
（ＣＧＲＰ）一，ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ（ＶＩＰ）－ｎａｄ
的轴突分布到松果体。 （本文图２见图版７）
ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ Ｙ（ＮＰＹ）・ｃｏｎｔａｉｎｉｇｎ ｎｅｒｖｅ ｆｉｂｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｉｎｅａｌ
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１４３６—１４４０沟壑的意思
．
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ｎａｄ ｓｅｎｓｏｒｙ ｉｎｎｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｔｅ ｉｎｔｒａｃｒａｎｉａｌ ｓｅｇｍｅｎｔ ｏｆ ｈｔｅ ｉｎｔｅｒｎａｌ
２０４．
ｃａｒｏｔｉｄ ａｒｔｅｒｙ ｉｎ ｍａｎ．Ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｖａｓｃｕｌａｒ
５．Ｋｌｅｉｎ ＤＣ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｉｎｅａｌ ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ Ｎ－ａｃｅｔｙｈｒａｎｓｆｅｒａｓｅ
ｈｅａｄａｃｈｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｌ Ｓｃｉ，１９９１，１０４：１９—３１．
ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｏｃ Ｔｒａｍ，１９９２，２０：２９９—３０４．
１９．Ｕｄｄｍａｎ Ｒ，Ｇｏａｄｓｂｙ ＰＪ，Ｊａｎｓｅｎ Ｉ，ｅｔ ａ１．ＰＡＣＡＰ，ａ Ｖ】ｌＰ．１ｉｋｅ
６．Ｚｈａｎｇ ＥＴ，Ｍｉｋｋｅｌｓｅｎ ＪＤ，Ｍｏｉｌｅｒ Ｍ．Ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ－ａｎｄ
ｐｅｐｔｉｄｅ： ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔ ｕｐｏｎ ｃａｔ
ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ Ｙ－ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ ｎｅｒｖｅ ｆｉｂｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｉｎｅａｌ
Ｄｉａｌ ａｒｔｅｒｉｅｓ ａｎｄ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｆｌｏｗ．Ｊ Ｃｅｒｅｂｒ Ｂ１ｏ０ｄ Ｈｏｗ
ｃｏｍｐｌｅｘ ｏｆ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ｒａｔｓ ａｎｄ ｒａｔｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｒｅｍｏｖａｌ ｏｆ ｔｈｅ
Ｍｅｔａｂｏｌ，１９９３，１３：２９１—２９ｒ７．
ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｇａｎ ａ．ｃｅｕ Ｔｉｓｓｕｅ Ｒｅｓ，１９９１，２６５：６３—７１．
２０．Ｎｉｌｓｓｏｎ ＳＦ．ＰＡＣＡＰ．２７ ａｎｄ ＰＡＣＡＰ．３８：ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｆｆｃｅｔｓ ｉｎ ｔｈｅ
７．Ｍｏｉｌｅｒ Ｍ．Ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｍａｍｍａｌｉｎａ ｐｉｎｅａｌ ｇｌａｎｄ．
ｅｙｅ ａｎｄ￣ｏｎｌｅ， ｏｔｈｅｒ ｔｉｓｕｅｓ ｉＩ１ ｔｈｅ ｒａｂｂｉｔ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，
Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ａｄｖ Ｐｉｎｅａｌ
１９９４，２５３：１７—２５．
Ｒｅｓ，１９９４，７：３—１３．
２１．Ｙｕｗｉｌｅｒ Ａ，Ｂｒｍｍａ￣ｒ ＧＬ，Ｂｅｎｎｅｔｔ ＢＬ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ
８．Ｍｏｉｌｅｒ Ｍ，Ｒａｖａｕｌｔｓ ＪＰ，Ｃｏｚｚｉ Ｂ． ｃｈｅｍｉｃａｌ ｎｅｕｒｏａｎａｔｏｍｙ ｏｆ格力空调遥控器怎样解锁
ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ ａｎｄ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ ｐｉｎｅａｌ：ｐｉｔｕｉｔａｒｙ
ｈｔｅ ｍａｍｍａｌｉｎａ ｐｉｎｅａｌ ｌｇａｎｄ：ｎｅｕｒｏｅｐｐｆｉｄｅｓ．Ｎｅｔｔｒｃｅｈｅｍ Ｉｎｔｅｒｎ，
ａｄｅｎｙｌａｔｅ ｃｙｃｌａｓｅ－ａｃｔｉｖａｔｉｇｎ ｐｅｐｔｉｄｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，１９９５，６４：
１９９ｌ６，２８：２３—３３．
２２７３—２２８０．
９．Ｍａｓｕｏ Ｙ，Ｏｈｔａｋｉ Ｔ，Ｍａｓｕｄａ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｂｉｎｄｉｇｎ ｓｉｔｅｓ ｆｏｒ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ
（收稿日期：２００２－０２－０５）
图版说明
图２未切断眼一上颌神经（Ａ）和切断眼．上颌神经后（Ｂ）大鼠松果体的ＰＡＣＡＰ免疫反应神经纤维。后者腺实质的神经纤维消
失。标尺为２５ｔｍ￣
