目录
引言 (1)
材料与方法 (6)
结果 (10)
讨论 (16)能源审计报告
小结 (20)
参考文献 (21)
综述 (23)
中英文词缩略表 (30)
攻读学位期间公开发表的论文 (31)
国际贸易结算致谢 (32)
引言
2019年除夕膀胱癌（bladder cancer）是一种发生率高并极具侵袭性的恶性肿瘤。2011年，在已诊断的频发恶性肿瘤中，膀胱癌发病率在男性中居第四位，女性中居第九位。世界范围内，2011年膀胱癌男性患者的
死亡人数达11.3万，女性患者约为其1/3。随着年龄的增长，膀胱癌的发生率急剧增加，65岁以下人群中发病率为535/10万，65岁以上约为11976/10万[1]。
膀胱癌主要的病理学类型是移行细胞癌，也称之为膀胱尿路上皮癌（bladder urothelial carcinoma，BUC），其发病率占膀胱癌的90%以上。尿路上皮癌浸润肌层之后，癌细胞转移风险随之增大，因此，是否浸润肌层是影响膀胱癌患者预后的关键因素[2]。膀胱癌的早期诊断极大的影响疾病预后情况，早期确诊的患者有较低的肌层浸润发生率，因此可以获得更好的预后。另一方面，膀胱癌是高复发肿瘤，以非浸润性膀胱尿路上皮癌（non-muscle invasive bladder urothelial carcinoma，NMIBUC）为例，目前主要治疗方式是经尿道膀胱肿瘤切除术以及辅助性膀胱灌注治疗，现今还没有达成共识的膀胱灌注治疗药物及最佳的治疗方案[3]，术后有10~67%的患者会在12个月内复发，术后5年内有24~84%的患者复发[4]。因而，针对膀胱癌患者，早期诊断、早期治疗、术后定期随访及预防术后复发是成功治疗膀胱癌的关键[4]。
半月瓣
鉴于膀胱癌的高发率、诊治及术后随访需要，作为诊断金标准的膀胱镜检查是目前针对膀胱癌患者标准的常规检查手段，但膀胱镜检查为有创性检查，同时有10%的假阴性率[5]，所以急需一种非侵袭性、廉价且易于操作的检查方法。理想的检查方法应该在疾病的早期易于发现病变。此外，检查还应该尽可能提高精确度，以降低假阳性、假阴性结果。目前应用最广泛的非侵袭性检查是尿脱落细胞学检查。因尿液连续性接触肾盂、输尿管、膀胱及尿道的尿路上皮，在尿液中寻找恶性病变的生物标记
物是有意义的[6]。据文献报道[7]，尿脱落细胞学检测膀胱尿路上皮癌的敏感性为36%（13~70%），特异性为94%（85~100%）。敏感性与癌细胞恶性分级密切相关，分级低的膀胱尿路上皮癌敏感性较低，一方面是由于肿瘤细胞分化较好，其特征与正常细胞相似，不易鉴别，另一方面由于癌细胞之间黏结相对紧密，没有足够多的癌细胞脱落到尿中而被检测到，所以尿细胞学阴性并不能排除低级别尿路上皮癌的存在；相反，
分级高的膀胱尿路上皮癌或原位癌，敏感性和特异性均较高[8-10]。伴随化学免疫等技术的发展，如bladder tumor antigen(BTA)等诸多尿液标记物检测方法的出现，尿脱落细胞学检查面临巨大挑战。虽然此类检查方法在敏感性上有较大提高，但在特异性上远远达不到尿脱落细胞学检查的水平[5]。近年来，随着细胞学检测技术的发展，敏感性有了较大的提高，这也使尿脱落细胞学检查有了更大的发展前景。
20世纪40年代希腊医生Papanicolaous(巴氏)发明传统巴氏(Pap)涂片技术，是最早的细胞涂片检查技术，并成为宫颈细胞学筛查项目成功的主要驱动因素，但其技术本身具有极大的局限性以及较低的灵敏度。Frable报道假阳性率高达20% ~40%，假阴性率达15% ~ 40%，异常细胞检出率只有20%[11]。传统尿脱落细胞学检查亦采用巴氏涂片法，造成了检测中较低的敏感率。
为克服传统制片方法的不足，细胞涂片技术在不断改进。1996年美国PDA批准了新柏氏TCT(Thinprep
cytologic test)技术。即采用过滤法ThinPrep的半自动的液基细胞学检测技术。该技术是将标本收集入装有特殊缓冲固定液的容器中，经过分离、分层等技术将细胞团块松散、分离，使细胞单层、均匀分布在图片上，提高了制片的质量及诊断的敏感性。TCT也因此成为目前国际领先的一种宫颈防癌细胞学检查技术。TCT在敏感率上将传统巴氏涂片的50~60%提升到90%。另据文献报道，在检测不满意率上，TCT以其2.3% 的概率明显优于传统细胞学检测的11%[12]。1999 年，最先进的全自动液基细胞学染色技术—细胞富集BD SurePath(超柏式液基薄层细胞学)诞生，并与ThinPrep一起成为目前各大实验研究机构常用的液基薄层细胞学制片技术。在敏感度上，各大实验研究机构所报道的数据显示两种方法差异不大，但在不满意率上，SurePath的不满意率为0.3%，优于ThinPrep1.3%的不满意率[13]。
童千斤目前，以BD SurePath离心沉降技术和新柏氏(ThinPrep TCT)模式技术为代表的液基细胞学检测技术已经在妇科细胞学检测领域成熟应用，如宫颈细胞学检查。特别是BD SurePath制片技术在细胞数量、背景去除非诊断性杂质、全自动制片染色及诊断质量尤为突出。美国FDA认证[14]：超柏式液基薄层细胞学检查是所有液基细胞学技术中检出率最高的技术。2005年美国病理协会非妇科细胞学实验室比较液基制片方法与传统制片方法在体液样本检测能力，证实液基制片方法更容易检出肿瘤[15]。
目前液基细胞学检查技术在非妇科领域的应用仍未得到推广，相关研究不多，其实液基细胞学技术在处理非妇科标本（胸腹水、尿液等）等时，其优势也是明显的，包括：
春风柳上归1.SurePath液基技术能及时固定标本，CytoRich独特的固定液能有效去除尿液标本中的非诊断性细胞碎屑、粘液、过多的炎细胞和血细胞，同时富集保留了标本中有诊断意义的细胞，大大提高了阳性检出率；
2.细胞涂膜面积明显缩小，阅片时间明显缩短，工作效率得到提高；
小飞镖的折法3.涂片背景清晰，细胞分布均匀，形态保存良好，三维立体突出，基本保持组织学结构，能最大限度地发现异常细胞，因而提高了筛查阳性率和诊断准确率；
4.液基制片具有独特的一个标本多张制片技术，能为进一步的分子生物学检查如免疫组织化学、FISH（fluorescence in situ hybridization）等提供优良的标本片，使得细胞学检查不再是简单的良恶性诊断，符合现代细胞病理学的发展方向。
此外，标本中含血量在1000ul至3000ul之前，SurePath制片系统的制片质量基本不受影响；而ThinPrep 系统在第一次含血量50ul或100ul时，上皮细胞的数量立即下降至接近于0[16]，因此，相比于ThinPrep技术，SurePath更适用于血尿标本。
本实验采用新一代SurePath液基细胞学技术运用于尿脱落细胞学检查中，探讨液基细胞学检查技术在尿液标本细胞学检查中应用的可行性，并通过与传统尿脱落细胞学检查技术的比较，探讨其在膀胱尿路上皮癌诊断中的应用价值。摄影比赛主题
