一、请教关于水稻愈伤组织的问题

更新时间:2023-07-14 23:11:33 阅读: 评论:0

组培常见英汉对照
abortion(败育)新生儿的祝福语adenine(腺嘌呤)故人西辞黄鹤楼烟花三月下扬州agar (琼脂)anther(花粉)apical(顶端的)aptic(无菌的) auxin(生长素)axillary bud (腋芽)calluscalli(愈伤组织)cellular totipotency(细胞全能性) cellula(纤维素酶)cellulo绿色小清新(纤维素)centrifuge(离心)chloroplast(叶绿体) chromosome doubling(染色体加倍)colony(细胞团,菌落)cybridcytoplasmic hybrid,胞质杂种) cytokinin(细胞分裂素) cytoplasm(细胞质)degeneration (败育)dedifferentiation (脱分化)redifferentiation(再分化)dicotyledonous(双子叶的)dihaploid(二单倍体)diploid(二倍体)disct隐藏的数字(剥离)dormancy(休眠)eliminate (除去) embryo(胚胎)embryoid(胚状体)embryogenesis(胚胎发生方式)epidermis(表皮,上表皮)exci(切除)explant (外植体)filter paper(滤纸) gelo(琼脂糖)genetype(基因型)germplasm(种质) global embryo (球型胚) haploid(单倍体)heterokaryon(异核体)homozygous(纯合的)hormone (激素)interspecific(种间的)intraspecific(种内的)in vitro(体外)in vivo(活体)kinetin(激动素)macerozyme(离析酶)male sterile(雄性不育)medium(培养基)membrane(膜)meristem(分生组织)meristem culture(茎尖培养)micropropagation(微繁)microspore
(小孢子)monocotyledon/moncots(单子叶植物) nod culture (茎段培养)organelle(细胞器)organgenesis(器官发生方式)osmotic(渗透的)pith(髓)plantlet(小植株,苗)pollen culture(花粉培养)pollinate(授粉)protocormPLB)原球茎protoplast fusion(原生质体融合)rapid propagation(快繁)regeneration(再生)lf-incompatibility (自交不亲和) shoot tip(茎尖) sodium hypochloriteNaClOsomatic embryo(体细胞胚)somatic hybridization(体细胞杂交)somatic hybrid(体细胞杂种)stem(茎)stem tip culture(茎尖培养)sterilant(消毒剂)sterile distilled water(蒸馏水)sterilization(消毒)stock plant (母株)subculture (继代) sucro(蔗糖) terminal bud(顶芽)transfer (转移)virus eradication(脱毒)
常用缩略语
ABA(脱落酸) CM(椰子汁) CPW(细胞-原生质体清洗液)
DMSO(二甲基亚砜) IAA(吲哚乙酸) IBA(吲哚丁酸)
KT(激动素) NAA(萘乙酸) PEG(聚乙二醇)
LH国庆旅游好去处(液氮) CH(水解酪蛋白) GA3(赤霉素)
一、请教关于水稻愈伤组织的问题:
我的水稻愈伤组织经过转化后,基本上不分化,听说TDZ能帮助分化,请问是用TDZ完全代替KT,还是按一定比例加入?还有就是在分化过程中还需要再加入潮霉素和羧苄吗?
我用的水稻品系是台北309,以前的分化培养基为MS+0.5/l谷氨酰胺+0.5g/l脯氨酸+0.3g/l水解酪蛋白+2mg/l KT+0.5mg/l 6BA+0.2mg/l NAA+300MG/L羧苄+50MG/L潮霉素。
请查阅华南农业大学杨跃生老师的两篇文章,发在水稻科学上的,上面介绍了二价铜离子在水稻离体培养中的作用
植物生理学学报,1998年第3期, 水稻高效转化系统的建立
二、关于外植体消毒
我做蝴蝶兰的花梗培养,用如下三法消毒,均有较多染菌,请各位指教,谢谢!方法一:75%酒精30s,剥去腋芽包片,0.1%升汞10min,水洗,2%次氯酸钠20min,水洗接种。
方法二:75%酒精30s0.1%升汞15min,水洗,剥去腋芽包片,0.1%升汞8min,水洗接种。
方法三:75%酒精30s0.1%升汞20min,水洗直接接种。
你先用自来水冲洗半个小时,然后用上述方法一。我不知道结果,我只是遇到一个老师曾经这样做
水稻组培中的问题及解决方法:
1、做愈伤组织培养是一定要用植物胶(phytagel)吗,可以用琼脂粉代替可以吗?期中考试奖状 还有在一些文献里看到一个叫gelrite的东西,作用是不是也跟植物胶一样啊?
完全可以,就是没有phytagel外观漂亮。而且在做分化培养时,琼脂粉的效果比phytagel还要好。
手工火车制作
gelrite就是植物凝胶
我们实验室用的都是琼脂粉
有一种叫卡拉胶的效果也不错,比琼脂粉还要便宜些。有一种叫卡拉胶的效果也不错,比琼脂粉还要便宜些。
2我是用水稻的幼胚培养的愈伤,转化并共培养之后转移到筛选培养基上,已经好几天了,
愈伤怎么越变越呈褐色了呢,是不是基因没转进去死啦?急啊!

顺便问一下大家,构建好的载体导入农杆菌后都怎么做检测啊?我就用菌液和抽的质粒做了PCR,同时还做了阳性和阴性对照,阴性对照是没有扩增出目的条带的。这样可靠吗?我农杆菌用的是卡那和利福平双抗性。

有人告诉我还要把从农杆菌抽的质粒回转E.coli,再抽质粒酶切检测。可是我想,如果前面的PCR是因为被含有该载体的E,coli污染才做出来的,那么回转后酶切检测的结果不是也不可靠吗?

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