化粧品中美白成分鑑別及含量測定方法
Identification and Assay for Whitening Ingredients in Cosmetics
1.適用範圍：本方法適用於化粧品中含維他命C磷酸鎂 (magnesium ascorbyl phosphate)、維他命C葡萄糖苷(ascorbyl glucoside)、麴酸(kojic acid)、熊果素(arbutin)、對苯二酚(hydroquinone)之鑑別及含量測定。
2.檢驗方法：高效液相層析法(high performance liquid chromatography, HPLC)
2.1. 裝置：高效液相層析儀
2.1.1. 檢出器：光二極體列陣檢出器(photodiode array detector)。
2.1.2. 層析管：COSMOSIL 5C18-AR-II，內徑4.6 mm ×吐的四字成语 250 mm或同級品。
2.2. 試藥：甲醇採HPLC穹顶之下柴静級，磷酸及磷酸二氫鉀(potassium dihydrogen phosphate)採用試藥特級，維他命C磷酸鎂、維他命C葡萄糖苷、麴酸、熊果素、對苯二酚對照用標準品。
2.3. 器具及材料：
2.3.1. 容量瓶：20 mL, 100 mL, 1000 mL, Pyrex材質。
2.3.2. 濾膜：孔徑0.45 m，Nylon材質。
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2.4. 0.05 M磷酸二氫鉀溶液之配製：
取磷酸二氫鉀6.8 g，加水至1000 mL，並以磷酸調整pH值至2.5。
2.5. 移動相溶液之配製：
0.05M磷酸二氫鉀溶液：甲醇(99：1, v/v)混液，以濾膜過濾，取濾液，供作移動相溶液。英文论文
2.6. 標準溶液之配製：
2.6.1. 金瓶双艳下载分別取適量維他命C磷酸鎂、維他命C葡萄糖苷、麴酸、熊果素、對苯二酚對照用標準品，精確稱定，以去離子水溶解並定容，供作標準原液，使用時再以去離子水稀釋至2.6.2節各美白成分線性範圍內。
2.6.2. 標準溶液之線性範圍：
2.6.2.1. 維他命C磷酸鎂：4400 g/mL。
2.6.2.2. 維他命C葡萄糖苷：2200 g/mL。
2.6.2.3. 麴酸：0.440 g/mL。
2.6.2.4. 熊果素：汉武帝的功绩2200 g/mL。
2.6.2.5. 對苯二酚：1100 g/mL。
2.7. 檢液之調製：
取檢體約1 g，精確稱定，以0.05M磷酸二氫鉀溶液溶解並定容至20 mL，於超音波中震盪約30分鐘，置室溫冷卻，以濾膜過濾，濾液供作檢液。
2.8. 鑑別試驗及含量測定：
取檢液及標準溶液各 20 L，分別注入高效液相層析儀，參照下列條件進行液相層析，就檢液與標準溶液所得波峰之滯留時間比較鑑別之。並依下列計算式，求出檢體中各美白成分之含量(mg/g)：
CV
檢體中各美白成分之含量(mg/g) =
M103
C：由標準曲線求得檢液中各美白成分之濃度(g/mL)
M：取樣分析檢體之重量(g)
V：檢體定容之體積(mL)
高效液相層析測定條件：
光二極體列陣檢出器：波長280 nm。
層析管：COSMOSIL 5C18-AR-II，內徑4.6 mm × 250 mm。
移動相溶液：依2.5節配製之溶液。
移動相流速：0.9 mL/min.。
附註：1.头人本檢驗方法之檢出限量分別為維他命C磷酸鎂鹽0.08 mg/g，維他命C葡萄糖苷0.04 mg/g，麴酸0.008 mg/g，熊果素0.04 mg/g，對苯二酚0.02 mg/g。
2.化粧品中若有影響檢驗結果之物質，應自行檢討。
參考文獻：
1. Huang S. C., Lin C. C., Huang M, C. and Wen K. C. 2004. Simultaneous Determination of Magnesium Ascorbyl Phosphate, Ascorbyl Glucoside, Kojic Acid, Arbutin and Hydroquinone in Skin Whitening Cosmetics by HPLC. Journal of Food and Drug Analysis, Vol. 12, No.1:13-18.
2. Shih, Y. 2001. Simultaneous determination of magnesium L-ascorbyl-2-phosphate and kojic acid in cosmetic bleaching products by using a microbore column and ion-pair liquid chromatography. J. AOAC Int. 84: 1045-1049.
