1、目的
为了规范雅培丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒的检测工作，保证血液检测结果的准确性、正确性和可靠性，保障血液质量，根据《 》制定本操作规程。
2、职责
血液检测岗位人员负责献血者血液标本丙型肝炎病毒抗体的检测。
3、适用范围
适用于献血者血液标本丙型肝炎病毒抗体的检测。
4、原理
在Murex抗—HCV4.0试剂中，稀释后的样品与包被在微孔板上的超纯度的核心。NS3，NS4，NS5抗原一起孵育,样品中的抗-HCV抗体与包被抗原结合。通过洗涤去除未结合的物质，被捕捉的抗体和过氧化物酶标的抗人IgG单克隆抗体孵育形成抗原-抗体—酶结合物，通过洗涤去除多余的酶结合物后，加入底物TMB和过氧化氢显色,当样品中有抗—HCV抗体存在,
颜色呈紫色。加入硫酸终止酶反应,应用酶标仪测吸光值，样品中的浓度与颜色深浅有直接关系。
5、标本要求
5.1血液标本容器和添加（抗凝）剂
分离胶试管或不抗凝试管
5.2 5ml静脉血离心分离后的血清或血浆(血辫）.
6、所需仪器设备
微量振荡器、可调微量移液器、电热恒温水浴箱、离心机、全自动酶免检测系统（STARLET前处理和FAME16/20后处理）、MUTISKAN MK3酶标仪、汇松洗板机、定时器。
7、试剂材料
7。1 一次性移液器（与微量加样器配套），一次性加样尖（与STARLET配套）、量筒、蒸馏水。
7.2贴有本站质量管理科“质检合格”标签的由Murex Biotech S.A.(PTY）Ltd.生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(ELISA）。 康彻思坦生物或卫生部临床检验中心提供的弱阳性质控血清。
8、检测环境要求
温度18-25℃ ， 湿度30%—70%。
9、步骤与方法
9。1实验前的准备
9.1.1环境确认
观察实验室环境温度、湿度是否在要求范围内,如不在范围应使用空调、加湿器等设备使检测环境条件符合要求。
9.1。2仪器设备的准备
对本次检测需用的设备MUTISKAN MK3酶标仪、汇松洗板机、微量振荡器、可调微量移液器运行状态和37℃水浴箱的温度及环境温湿度进行确认,按《MUTISKAN MK3酶标仪操作规程》和试剂盒说明书编制结果判读程序（如酶标仪中贮存有相应的程序可直接调用）。按《汇松PW—960洗板机操作规程》和试剂盒说明书编制编制洗板程序（如洗板机中贮存有相应的程序可直接调用）。
如使用全自动酶免分析系统进行实验，应进行仪器初始化。详见《FAME16/20操作规程》及《全自动酶免分析系统实验操作规程》
9。1。3试剂的准备
(1)从冰箱中取出雅培丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒和抗—HCV标准物质(质控血清）。对标准物质（质控血清)的含量、批号、有效期、外观、容量和开始使用日期等是否符合要求等内容进行确认；如标准物质（质控血清)为冰冻保存的 ,应待其完全溶化。
(2)对丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒应检查的外包装，字迹是否清晰、内容是否齐全、是否
有质量管理科抽检并贴有“质检合格”标签，是否在有效期内、试剂盒内组分是否齐全、液体组分是否澄清均匀无异物、是否无溢液及渗漏等。
（3）将试剂盒于室温放置30分钟以上，使其温度平衡到室温，并充分混匀各试剂。
（4)如果使用自动加样器和酶免后处理进行实验,进行如下操作：将试剂槽和阴阳性对照，以及质控品载架从冰箱中取出,放置平衡至室温，检查试剂槽内液体和阴阳性对照，以及质控品等是否对应载架上的相应位置,是否足量，是否在一周之内开启，质控品是否变质，是否混浊，新开启的质控品应标明时间.如果不足应将试剂倒入相应仪器试剂槽中.试剂倒入前应检查试剂瓶标识和仪器试剂槽标识，防止试剂错误倒入。
（5）小数乘小数将浓缩洗液用蒸馏水按20倍比例稀释，按实际需要,配制适量的工作洗液.浓缩洗液使用前检查是否有结晶出现,若出现结晶，应置于37℃至溶解后再使用.如使用酶免后处理器进行实验，进行如下操作:将配好的洗液倒入相应的仪器洗液瓶中，洗液倒入前应检查原洗液瓶标识和仪器洗液瓶标识，防止倒入错误，然后将洗液瓶置于酶免后处理器洗板架上待用。
9。1。4实验微板的准备
（1）经平衡后，从密封袋中取出微板后，检查酶免板板底是否无划痕、平整，用手轻压微板检查，使之平整；并且检查微板孔内有无异物。
（2)计算所需的孔数。每板3孔阴性对照，2孔阳性对照，1孔质控。加样示意见图1。根据检测标本数量及对照孔数量，把需用的微孔板条拼组于微孔板架上，微孔板条必须平放于微孔板架上，各微孔在同一水平高度，避免高低不平.
（3)如使用全自动酶免分析系统，应在余板空位上用清洁的废旧板条补满板，补齐后应用手轻压微板检查，使之平整。再放置于仪器相应位置执行《STARLET的使用和维护保养操作规程》及《全自动酶免分析系统实验操作规程》？。
9.1.5标本的准备
将离心处理后的标本放置在标本槽内，标本需要插入标本槽底部，献血条码面对着标本槽缺口处，如手工检测应将标本编流水号，放入试管架上.
9。2实验操作（全自动检测见《STARLET的使用和维护保养操作规程》和《FAME16/20操作规程》及《全自动酶免分析系统实验操作规程》？)
9.2.1加样（手工或STARLET加样器)：
（1）每反应孔加入180ul样品稀释液
（2)按图1规定的位置分别加入待检血样、阴阳性对照品、弱阳性质控血清各20为什么爱国 ul。阴、阳性对照、质控血清在待检血样加完后再依次加入.其中H1孔和未使用的余孔可根据具体情况需要加入重验标本、质控血清或其他标本，加样完毕后，必须确认标本、对照品、质控血清加注完全、位置正确，并振荡混匀（振荡时不要让液体溅出）。手工操作时应确保加样时吸嘴未接触微孔的底部和边缘。
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A | NC | SM1 | SM9 | SM17 | SM25 | SM33 | SM41 | SM49 | SM57 | SM65 | SM73江南扇舞 | SM81 |
B | NC | SM2 | SM10 | SM18 | SM26 | 表格>北京周边SM34 | SM42 | SM50 | SM58 | SM66 | SM74 | SM82 |
C | NC | SM3 | SM11 | SM19 | SM27 | SM35 | SM43 | SM51 | SM59 | SM67 | SM75 | SM83 |
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| 怎么提高 E | PC | SM5 剑灵壁纸 | SM13 | SM21 | SM29 | SM37 | SM45 | SM53 | SM61 | SM69 | SM77 | SM85 |
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G | | SM7 | SM15 | SM23 | SM31 | SM39 | SM47 | SM55 | SM63 | SM71 | SM79 | SM87 |
H | | SM8 | SM16 | SM24 | SM32 | SM40 | SM48 | SM56 | 30字SM64 | SM72 | SM80 | SM88 |
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图1加样示意图
