ELISA实验中CUT OFF值的设定

更新时间:2023-07-07 05:21:04 阅读: 评论:0

CUT OFF值的设定
定性免疫检测中,决定结果阴阳性的依据是CUT OFF值(阳性判断值)。确定合适的CUT OFF值对于准确判定结果有重要意义。CUT OFF值的确定要使依其得到的检测结果假阴性和假阳性的发生率最低。
CUT OFF值是怎么来的?
在学习怎样设定CUT OFF值前,先学习灰区的概念。定性检测将结果区分为阴性、阳性。在实际检测过程中,检测大量阴性样本与阳性样本后,会有少量样本测值有重叠。这一部分样本的检测结果归为可疑,即“灰区”。
CUT OFF值的设定有多种不同方法,常见的方法包括:
    1.使用阴性血清测定结果均值的2或3倍作为CUT OFF值。该方法是取一定数量(通常不多)的阴性血清样本,使用免疫检测试剂盒进行测定,取阴性样本的测值的平均值。若上述阴性样本的平均值为X,则该次测定的CUT OFF值为2X或3X。例如,试剂盒结果判定以S(样本测值)/N(阴性对平均测值)≥2.1为阳性,其依据即是以阴性参考血清的2.1倍作为C猪排
护理实习总结UT OFF值。通常为了避免阴性样本测值过低导致的CUT OFF值过低,还会规定阴性样本平均测值不到某一特定值,如0.05时,以0.05计算,即CUT OFF值不低于0.105。采用这种方法设定CUT OFF值,可以有效避免假阳性结果的出现,但易导致假阴性结果较多,是一种非常粗糙的CUT OFF值设定方法。
2.阴性对照平均测值+2个标准差(SD)或3SD作为CUT OFF值。先取大量(数千)正常人(阴性)血清样本进行检测,当阴性样本量足够大时,使用试剂盒检测所得测值将呈正态分布,若要求95.3%(单侧)的可信度,可将阴性样本平均测值+2SD作为CUT OFF值;若要求99%(单侧)的可信度,则以阴性样本平均测值+3SD作为CUT OFF值。这种方法建立在统计学计算的基础上,相比于第一种方法,更为科学。但这种方法仅考虑正常人群(阴性样本),因此难以界定“灰区”,几乎所有灰区样本都阴性结果处理,可能会出现较多假阴性。
3.综合阴性对照均值+2或3SD及阳性对照均值-2或3SD建立CUT OFF值。先测定大量阴性血清样本,若测值为正态分布,在具有95.3%(单侧)的可信度的情况下,可以将从阴性样本中得到的测值+2SD得到一侧CUT OFF值,若要求99%(单侧)的可信度,则以测值+
周国平语录3SD为一侧CUT OFF值。然后检测大量阳性样本,在具有95.3%(单侧)的可信度的情况下,可以将从阳样本中得到的测值-2SD得到另一侧CUT OFF值,若要求99%(单侧)的可信度,则以测值-3SD为另一侧CUT OFF值。阴性和阳性样本的CUT OFF值确定后,根据“灰区”的大小,综合平衡考虑假阳性率和假阴性率,确定试剂盒的CUT OFF值。这种方法对比方法二,对阳性人群也有考虑,并且对“灰区”的存在有一定估计,不会出现将“灰区”全部归为阴性结果的情况。若样本测值为非正态分布,可采用“百分位数法”,以阴阳性样本测定结果的百分位数单侧95%或99%分别来确定两侧CUT OFF值,再综合平衡考虑假阳性率和假阴性率。竹组词
日本纯音乐4.在方法三的基础上,增加检测血清转化盘样本。在检测大量阴性及阳性样本基础上,检测转化型血清(从阴性转变为阳性过程中的系列血清)样本,取假阳性和假阴性发生率最低、且能区别抗原转化至抗体出现点的吸光度值作为CUT OFF值。由此确定的CUT OFF值能有最佳区分阴阳性样本的能力。
5.ROC曲线(受试者工作曲线)法。ROC曲线是以假阳性率(1-特异性)为横坐标,真阳性率(灵敏度)为纵坐标所绘制的一条曲线,是反映敏感度和特异度连续变量的综合指标。
1960年大饥荒母兔>孕妇祛斑不同的检测项目,对应不同的疾病特征和试剂盒的预期用途,CUT OFF值的选取会有区别。当疾病是严重的、可治疗的,假阳性结果不会造成严重的心理压力和经济损失,不适当的治疗不会造成严重后果时,不应漏检,试剂盒应具有高灵敏度。当疾病是严重的、但不能治疗,假阳性结果可能引起严重的心理压力或经济损失时,试剂盒应具有高特异性。

本文发布于:2023-07-07 05:21:04,感谢您对本站的认可!

本文链接:https://www.wtabcd.cn/fanwen/fan/89/1071216.html

版权声明:本站内容均来自互联网,仅供演示用,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系,我们将在24小时内删除。

标签:阴性   样本   结果   检测   阳性
相关文章
留言与评论(共有 0 条评论)
   
验证码:
推荐文章
排行榜
Copyright ©2019-2022 Comsenz Inc.Powered by © 专利检索| 网站地图