肾素-血管紧张素系统2条通路在油酸致大鼠BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝中的作用

更新时间:2023-07-06 22:20:19 阅读: 评论:0

皇帝顺序南京农业大学学报2020,43(5) :910-918
Journal  of  Nanjing  Agricultural  University http ://nauxb.njau.edu DOI  : 10.7685/jnau.201906050王换换,刘颖,李帅,等.肾素-血管紧张素系统2条通路在油酸致大鼠BRL-3A 细胞非酒精性脂肪肝中的作用[J ].南京农业大学学报, 2020,43(5):910-918.
WANG  Huanhuan  , LIU  Ying , LI  Shuai , et  al. Role  of  two  pathways  of  renin-angiotensin  system  in  oleic  acid-induced  non-alcoholic  fatty  liver  dia  in  mou  BRL-3A  cells [ J ]. Journal  of  Nanjing  Agricultural  University ,2020,43(5) :910-918.
肾素-血管紧张素系统2条通路在油酸致大鼠
复活节彩蛋BRL-3A 细胞非酒精性脂肪肝中的作用
王换换,刘颖,李帅,何晟,朱斌,张源淑*
(南京农业大学农业农村部动物生理生化重点开放实验室,江苏南京210095)
摘要:[目的]通过建立油酸诱导的大鼠肝脏间质BRL-3A 细胞非酒精性脂肪肝(NAFLD )损伤模型,探讨BRL-3A 细胞中 RAS 的ACE/AngH/ATIR 和ACE2/Ang-l-7/Mas 这2条通路相互负向调节与NAFLD 细胞损伤的关系。[方法]采用不同 浓度油酸(0.025、0.05、0.1和0.2 mmol-L -1 )处理BRL-3A 细胞24 h ,通过检测细胞活力、细胞内甘油三酯(TG )含量、丙氨酸 氨基转移酶(ALT )活性、天门冬氨酸氨基转移酶(AST )活性以及油红染色确立NAFLD 细胞模型条件,然后选取低、中、高3个 浓度(0.025,0.1和0.2 mmol-L -1)油酸作用于细胞24 h ,用ELISA 法检测细胞上清液中血管紧张素H  ( AngH  )、血管紧张素 1-7( Ang1-7)水平;Western  blot 分析细胞内血管紧张素转化酶(ACE )、血管紧张素转化酶2( ACE2)、血管紧张素H 受体1 (AT1R )、Mas 受体(MasR )蛋白水平撕皮尔曼相关分析法分析油酸浓度与细胞内ACE 、ACE2表达水平的相关性。[结果] 1)用0.1 mmol-L -1油酸处理BRL-3A 细胞24 h ,成功建立BRL-3A 细胞NAFLD 模型。2)油酸处理24 h 后,BRL-3A 细胞出 现脂滴沉积,在0.025 mmol-L -1油酸(低浓度)组,ACE2、MasR 表达水平和Ang1-7水平有升高趋势,AngH 水平与AT1R 表 达水平下降,ACE/ACE2值下降;0.1 mmol-L -1油酸(中浓度)组ACE 、AT1R 表达水平显著升高,其他RAS 成员变化不明显; 0.2 mmol-L -1油酸(高浓度)组,ACE2、MasR 表达水平和Ang1-7水平下降,AngH 水平和ACE 、AT1R 表达水平及ACE/ACE2 值升高。3)斯皮尔曼相关分析显示,油酸浓度、血液相关生化指标(TG 含量、AST 和A
LT 活性)和脂滴数及脂滴面积与 ACE2表达水平和Ang1-7水平负相关,而与ACE 表达水平和AngH 水平正相关。[结论]BRL-3A 细胞中的2条轴共同参与 了油酸致BRL-3A 细胞NAFLD 损伤的发生和发展过程。低浓度油酸时,ACE2介导的Angl-7/MasR 通路占优势;高浓度油 酸处理细胞损伤加重,ACE 介导的AngH/ATIR 通路占主导地位。ACE2与油酸致细胞炎性损伤的程度呈显著负相关关系。 关键词:血管紧张素系统(RAS ) ;BRL-3A 细胞;非酒精性脂肪肝病(NAFLD )细胞模型
用字组词
中图分类号:S852.2 文献标志码:A  文章编号:1000-2030( 2020) 05-0910-09Role  of  two  pathways  of  renin-angiotensin  system  in  oleic  acid-induced
中国历史年代表non-alcoholic  fatty  liver  dia  in  mou  BRL-3A  cells WANG  Huanhuan ,LIU  Ying ,LI  Shuai ,HE  Sheng ,ZHU  Bin ,ZHANG  Yuanshu  *(Key  Laboratory  of  Animal  Physiology  and  Biochemistry  and  Rural  Affairs , Ministry  of  Agriculture ,
Nanjing  Agricultural  University ,Nanjing  210095,China )
少儿爵士舞视频Abstract : [ Objectives ]The  relationship  between  the  negative  regulation  of  ACE/AngH/ATIR  and  ACE2/Ang-l-7/Mas  pathways  of  RAS  and  the  damage  of  non-alcoholic  fatty  liver  dia ( NAFLD ) in  mou  liver  stromal  cells ( BRL-3A ) was  investigated  by  establi ­shing  injury  model  of  NAFLD  in  mou  BRL-3A  cells  induced  by  oleic  acid. [ Methods  ] BRL-3A  cells  wer
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坠的成语e  treated  with  different  concentrations (0.025,0.05,0.1 and  0.2 mmol  • L -1 ) of  oleic  acid  for  24 h. The  cell  viability  assay , intracellular  TG  content , ALT  and  AST  activities  and  oil  red  staining  were  ud  to  confirm  the  NAFLD  cell  model. Then , three  oleic  acid  concentrations  ( 0.025,0.1 and  0.2 mmol  *L -1) were  applied  to  the  cells  for  24 h  for  subquent  experiments. The  content  of  Ang  H  and  Ang1 -7 in  the  supernatant  was  detected  by  ELISA. The  expression  levels  of  angiotensin  converting  enzyme ( ACE ) ,angiotensin  converting  enzyme ( ACE2) ,angiotensin  typel  receptor ( AT1R ) and  Mas  receptor ( MasR ) in  the  cells  were  analyzed  by  Western  blot. Meanwhile ,Spearman  correlation  analysis  was  ud  to  analyze  the  correlation  between  different  concentrations  of  oleic  acid  treated  for  24 h  and  the  levels  of  intracellular  ACE  and  ACE2. [ Results  ] 1) Using  0. 1 mmol  • L -1 oleic  acid  to  treat  cells  for  24, the  NAFLD  model  of  BRL-3A  cells  was  successfully  established. 2)Using  oleic  acid  to  treat  cells  for  24, lipid  droplets  were  deposited  in  BRL-3A  cells. The  expression  levels  of  ACE2, MasR  and  Ang1 -7 content  incread  with  0.025 mmol  • L -1 oleic  acid , however , the  expression  level  of  AT1R , Ang  H  content  and  the 收稿日期:2019-06-25
基金项目:国家自然科学基金项目(30871838);江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD )
作者简介:王换换,助理实验师。*通信作者:张源淑,教授,博士,主要从事动物营养和机能生物化
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学研究,E-mail  :zhangyuanshu@ njau.edu 。

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