解离常数kd与平衡解离常数KD的区别
先来看动力学(Kinetics)与亲和力(Affinity)的区别。
Kinetics 可以告诉我们的信息:
∙ How fast do things happen? – Time-dependent
∙ Association – how fast molecules bind
∙ Dissociation – how fast complexes fall apart
∙ Kinetics determine whether a complex forms or dissociates within a given time span
Affinity可以告诉我们的信息:
∙ How strong is a complex? – Time-independent
∙ Affinity determines how much complex is formed at equilibrium (steady state where association balances dissociation)
下面总结解离常数kd与平衡解离常数KD的区别。
1 解离常数Kd不可能大于1, Kd的单位是S-1阶段英语;
2 Kd月行表示单位时间内解离了的AB(即AB)占解离前初始AB的比例,由此可见水浒传评价K广州减肥d能表示解离反应的快慢,Kd越大代表解离越快,Kd越小代表解离越慢;
我爱祖国手抄报3 平衡解离常数KD=K健腹轮的正确使用d/Ka,KD单位是M(mol/L);
4 KD=[A][B]/[AB],KD可以表示出处于平衡状态时AB的解离程度,KD越大说明解离越多,代表AB之间亲和力越弱,KD越小说明解离越少,代表AB间亲和力越强;
5 根据KD,可以计算出AB发生解离的比例(百分比),反之亦可推导。如:解离百分比为哈哈镜打一成语20%,则KD=0.2*0.2/(1-0.2)=0.05(M);再如KD=10-6 M,则解离百分比约为0.1% 。
问题:Kd是否受配体,受体的浓度影响?怎样计算Kd? 需要测多个浓度吗?
答:Kd检测亲和力。在温度,PH值,盐浓度等影响亲和力的因素不变的情况下,Kd本身
维持恒定,不受配体和受体浓度的影响。Kd等于一半的受体被配体结合是,配体的浓度。可以由公式推导:Kd=[A][B]/[AB],一半受体(B)被被配体(A)结合时,[B]=[AB],Kd=[A]。
参保证明但是测量Kd的实际操作中,无需恰好使一半受体被配体结合。只需要测量[A],[B],[AB]三者的浓度即可计算出Kd。
抗体亲合力的测定涉及抗体结合部位和抗原决定簇,因此要求抗体和抗原为液体的纯品。目前测定抗体亲和力的方法比较多,如平衡透析法、竞争结合法、荧光增强法、硫氰酸盐洗脱法、酶联免疫测定法(ELISA)和固相放射免疫测定法(SPRIA)等。其中ELISA法和SPRIA法是最敏感的检测方法,但其是否依赖抗体的亲和力尚存在争论.通常采用竞争结合及Scatchard作图法。McAb的亲和力通常为1×105~1×1012mol-1。