液相色谱质谱操作步骤
开机
1.将废气管放入窗外;
2.将氮气罐拧开(氮气总压不能低于2MPa),氮气时候足够,注意氮气分压表压力可能在左右;
阿修罗装备3.打开电脑,进行自检;
4.打开液相自动进样器,自检后绿灯亮即可完成自检;
5.打开泵电源
6.接着打开质谱,自检3分钟,听见两次声响后自检成功;
7.打开masslynx软件后,抽真空4小时左右,直到真空值为e-5次方,即可利用;
调谐
1.抽好真空后,准备调谐;六个字的游戏名
2.成立个人“Project”:在Masslynx 界面点File-Project wizard点yes,输入名称,选择成立新的Project;
3.进行质谱调谐。在TQ Detector软件中单击API加氮气,然后调源温度(参考80),去溶剂温度(参考300),点击软件右下角I图标加电压。等到温度升到设定值后,在Fluidics中设定参数,调谐前,FLOW STATE 先选择waste对管路进行清洗(单击purge the Fluidics system);清洗完毕后,FLOW STATE当选择infusion,在Analyr中设定参数:若是选择单MS则参数为15,15,1,Entrance 50,Collision 2,Exit50,并在软件右边选择母离子扫描,点击start进行调谐,改变cone的电压值,使选择的峰信号达到最高,即达到最优值;若果选择MS-MS扫描,要先打开氩气,参数为13,13,,Entrance -2,Collision-2,Exit 2,点击start进行调谐,点status infusion出现信号,选择子离子扫描,固定corn的电压值,改变collision,使目标峰达到最高即达到最优值。达到最优值后进行收集,改变DATA 和MASSES参数打开一个色谱图,点小闹钟,在出现的色谱图上点鼠标左键水平向右拖动鼠标,可取得收集母离子或子离子信息。要进行下次收集时先关闭上次收集。保留好调谐方式到个人的Project中;
4.调谐完毕后用溶剂清洗管路,在Fluidics中设定FLOW STATE择waste,点击purge the Fluidics system,设流速放空洗液。洗完后先关电压(右下角圆环),降温,温度下降到设定值后关闭氮气;
方式编辑及测定
1.别离点击inlet method和mass method编液相和质谱的方式。编好后别离将该文件存到Project中;(注意:液相时间应与质谱时间一致)
2.编辑样品序列:先成立个人“project”,在最初的界面instrument中输入样品名,瓶号,进样量,然后别离调出液相方式与质谱方式;
3.在操作平台中打开mass console,在Acquity uplc sysytem当选择control下拉菜单中start up system选择A(纯有机相),B(纯水相)流动相进行系统清洗(一般清洗4个循环,流速8ml/min大约10分钟);
数学100分
4.做样前,一般设定min流速平衡色谱柱及系统,先用建好的液相方式平衡柱子,在点Inlet method,界面当选LC-Load Method ,观察Delta值小于50方可开始测试样品(若利用缓冲
盐则应小于10)。选中序列中要进的样,点击start出现start list,(选from—to—)肯定后开始走样。可点击谱图进行观测,点时钟进行不时观测;
5.测样完成以后,先去电压(TQ Detector 中右下角圆圈),等源温度和脱溶气温度都降到100度以下时单击API去氮气。(注意:必然要先去电压,在去氮气)然后在mass console中将流量改成0;
6.冲洗色谱柱:按照测试进程流动相选择用不同比例的有机相/水相冲洗柱子,最后用纯有机流动相冲洗柱子至柱压降至最低;
7.设流速为零;
注意事项
1.天天进行测样前先点mass console进行Starts up system清洗;
2.测定完毕后将无机相溶剂滤头放入纯有机相瓶中;
3.改换柱子时注意:连接柱子之前要等管路有水出来后再进行;质化研究
顾亚龙
4.调谐时注意:必然要先开气,再加压;
5.电脑不能关闭超过10分钟,不然仪器自动卸真空;
6.卸真空前不能关闭质谱电源及自动进样器电源;
7.用紫外检测器时要先开溶剂泵,20分钟左右以后打开紫外检测器电源;
8.测定前确保流动相足够;
9.实验前后都要填写仪器利用记录表,实验完成后填写仪器利用记录;
10.正确操作仪器,利用进程中如发现仪器出现异样情况,应及时与实验室管理人员联系;
11.要求用托盘盛放药品,避免药品直接放在实验台上,实验结束及时清洁实验台,带走所有实验试剂及样品;
12.仪器利用人员有义务打扫实验室卫生;
13.加拿大圣玛丽大学仪器利用人员有义务和责任负责实验室内实验仪器的安全;
立体三角形
14.仪器利用人员有义务和责任负责实验室内水、电安全;