㊀Ｇｕｉｈａｉａ㊀Ｊｕｌ.２０２１ꎬ４１(７):１１８１－１１８７
ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２００４０３０
张华玲ꎬ韩静ꎬ刘绪ꎬ等.苹果渣乙醇提取物抗菌活性及防腐作用研究[Ｊ].广西植物ꎬ２０２１ꎬ４１(７):１１８１－１１８７.
ＺＨＡＮＧＨＬꎬＨＡＮＪꎬＬＩＵＸꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄａｎｔｉｓｅｐｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ
２０２１ꎬ４１(７):１１８１－１１８７.
苹果渣乙醇提取物抗菌活性及防腐作用研究
张华玲１ꎬ２ꎬ韩㊀静１ꎬ刘㊀绪１ꎬ２∗ꎬ蒲㊀柳１ꎬ管媛媛１ꎬ段洁莹１(１.成都师范学院化学与生命科学学院ꎬ成都６１１１３０ꎻ２.酿酒生物技术及应用四川省重点实验室ꎬ四川自贡６４３０００)摘㊀要：为提高苹果渣资源利用率ꎬ探究苹果渣乙醇提取物的抗菌活性和防腐性能ꎬ该文采用微波辅助提取法制取苹果渣乙醇提取物ꎬ用抑菌圈实验测定其抗菌活性ꎬ并研究了其防腐作用ꎮ结果表明:(１)苹果渣乙醇提取物对酵母菌抑制作用不明显(抑菌圈直径<１ｍｍ)ꎬ对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用较明显(抑菌圈直径为６~９ｍｍ)ꎬ最佳抑菌浓度为４.０ｇ Ｌ￣１ꎮ(２)ｐＨ值和盐浓度对其抑菌效果有影响ꎬｐＨ值为６~７ꎬ盐浓度为５.０ｇ Ｌ￣１ꎬ抑菌效果最好ꎮ(３)对百香果有较好的保鲜防腐效果ꎬ最佳使用浓度为０.２％ꎮ在该浓度下贮藏后的百香果腐烂率为６.７％(对照组为６７％)ꎬ失重率为
５.５％(对照组为３６.３％)ꎬ可溶性固形物㊁总酸含量均与贮藏前差异不显著(Ｐ>０.０５)(对照组Ｐ<０.０５)ꎬ且果实较饱满ꎬ硬度较高ꎬ鲜艳有光泽ꎬ酸甜适中ꎮ综上所述ꎬ苹果渣乙醇提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有良好的抑制作用ꎬ对百香果的保鲜防腐效果佳ꎬ可应用到天然食品的保鲜防腐ꎮ
关键词：苹果渣ꎬ乙醇提取物ꎬ百香果ꎬ抗菌活性ꎬ防腐作用
中图分类号:ＴＳ２０９㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀文章编号:１０００￣３１４２(２０２１)０７￣１１８１￣０７
Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄａｎｔｉｓｅｐｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆ
ｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅ
ＺＨＡＮＧＨｕａｌｉｎｇ１ꎬ２ꎬＨＡＮＪｉｎｇ１ꎬＬＩＵＸｕ１ꎬ２∗ꎬＰＵＬｉｕ１ꎬＧＵＡＮＹｕａｎｙｕａｎ１ꎬＤＵＡＮＪｉｅｙｉｎｇ１(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＣｈｅｎｇｄｕＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＣｈｅｎｇｄｕ６１１１３０ꎬＣｈｉｎａꎻ２.Ｌｉｑｕｏｒ￣ＭａｋｉｇｎＢｉｏ￣Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ＆ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅꎬＺｉｇｏｎｇ６４３０００ꎬＳｉｃｈｕａｎꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｉｍｐｒ
ｏｖｅｔｈｅｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｒｅｓｏｕｒｃｅｓꎬｖｅｒｉｆｙｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄａｎｔｉｓｅｐｔｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅꎬｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｚｏｎｅｔｅｓｔ.ＩｎａｄｄｉｔｉｏｎꎬｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐＨａｎｄｓａｌｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｈａｄｂｅｅｎｓｔｕｄｉｅｄ.ＡｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅꎬｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｔｈｅｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆＰａｓｓｉｆｌｏｒａｅｄｕｌｉａꎬｕｓｉｎｇｓｅｎｓｏｒｙｓｃｏｒｅｓａｎｄｖａｒｉｏｕｓｐｈｙｓｉｃａｌａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ(Ｖｃꎬｓｏｌｕｂｌｅｓｏｌｉｄｓꎬｔｏｔａｌａｃｉｄꎬｓｏｌｉｄａｃｉｄｒａｔｉｏ)ａｓｔｈｅｂａｓｉｓｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｎｔｉｓｅｐｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ:(１)Ｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｈａｄｎｏｏｂｖｉｏｕｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｎｙｅａｓｔｓ(ｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｚｏｎｅ<１ｍｍ)ꎬｂｕｔｉｔｈａｄｏｂｖｉｏｕｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｎＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓａｎｄＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ(ｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｚｏｎｅｗａｓ６－９ｍｍ).(２)Ｔｈｅｂｅｓｔ
收稿日期:２０２０－１１－０３
基金项目：酿酒生物技术及应用四川省重点实验室开放基金项目(ＮＪ２０１７￣１３)ꎻ国家大学生创新创业项目(２０１８１４３８９１４２)ꎻ四川省科技计划重点研发项目(２０１９ＹＦＧ０１７０)[ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙＬｉｑｕｏｒ￣ＭａｋｉｇｎＢｉｏ￣Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ＆ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ(ＮＪ２０１７￣１３)ꎻＣｏｌｌｅｇｅＳｔｕｄｅｎｔｓＩｎｎｏｖａｔｉｏｎａｎｄＥｎｔｒｅｐｒｅｎｅｕｒｓｈｉｐＰｒｏｇｒａｍ(２０１８１４３８９１４２)ꎻＫｅｙＲ＆ＤＰｒｏｊｅｃｔｓｏｆＳｉｃｈｕａｎＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＰｒｏｇｒａｍ(２０１９ＹＦＧ０１７０)]ꎮ
怎样格式化c盘
作者简介：张华玲(１９８２－)ꎬ硕士ꎬ讲师ꎬ主要从事作物遗传及农副产品加工技术研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｚｈａｎｇｈｕａｌｉｎｇ２０１０＠１６３.ｃｏｍꎮ
∗通信作者：刘绪ꎬ硕士ꎬ副教授ꎬ主要从事食品原料及加工技术研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)４６５６８５８５３＠ｑｑ.ｃｏｍꎮ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｓｅｓｔｒａｉｎｓｗａｓ４.０ｇ Ｌ￣１.ＩｎａｄｄｉｔｉｏｎꎬｗｈｅｎｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｗａｓｏｐｔｉｍａｌꎬｔｈｅｐＨｗａｓ６－７ａｎｄｔｈｅｓａｌｔｃｏｎｃ
ｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓ５.０ｇ Ｌ￣１.(３)ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｆｏｒＰａｓｓｉｆｌｏｒａｅｄｕｌｉａｗａｓ０.２％ꎬａｎｄｔｈｅｒｏｔｒａｔｅａｆｔｅｒｓｔｏｒａｇｅａｔｔｈｉｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓｏｎｌｙ６.７％(ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗａｓ６７％)ꎬａｎｄｔｈｅｗｅｉｇｈｔｌｏｓｓｒａｔｅｗａｓ５.５％(ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗａｓ３６.３％).Ｔｈｅｓｏｌｕｂｌｅｓｏｌｉｄｓａｎｄｔｏｔａｌａｃｉｄｃｏｎｔｅｎｔｗｅｒｅｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍｔｈｏｓｅｂｅｆｏｒｅｓｔｏｒａｇｅ(Ｐ>０.０５)(ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐＰ<０.０５).Ａｎｄｍｏｓｔｏｆｔｈｅｆｒｕｉｔｓｗｅｒｅｐｌｕｍｐꎬｆｉｒｍꎬｂｒｉｇｈｔａｎｄｓｈｉｎｙꎬｍｏｄｅｒａｔｅｌｙｓｗｅｅｔａｎｄｓｏｕｒ.Ｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｘｔｒａｃｔｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｈａｓａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｎｔｉｓｅｐｔｉｃｅｆｆｅｃｔꎬａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓａｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｒｅｓｏｕｒｃｅｓ.
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅꎬｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓꎬＰａｓｓｉｆｌｏｒａｅｄｕｌｉａꎬａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙꎬａｎｔｉｓｅｐｔｉｃｅｆｆｅｃｔ
㊀㊀目前中国已成为世界上苹果(Ｍａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａ)产量最多的国家ꎮ但是苹果渣的利用率非常低ꎬ更多被当作废物处理ꎬ造成资源浪费和环境污染ꎮ每１０００ｔ苹果中约有２００ｔ苹果渣ꎮ因此ꎬ苹果渣的加工潜力巨大ꎮ新鲜苹果渣含水量为７４％~９０％ꎬ苹果渣经过干燥后约有５５ｔ可利用ꎮ因此ꎬ苹果渣再利用问题已经成为一个亟待解决的问题(刘永清等ꎬ２０１５)ꎮ
苹果渣中的干物质主要是粗蛋白㊁粗脂肪㊁粗纤维ꎬ以及多糖㊁酚类㊁黄酮等活性物质ꎬ具有较大的开发利用价值(杨福有等ꎬ２０００ꎻ东莎莎ꎬ２０１７)ꎮ现有研究主要利用苹果渣制备多糖(房斐等ꎬ２０１９)ꎬ提取纤维素(陈雪峰等ꎬ２０１８)㊁多酚(田莉等ꎬ２０１７)ꎬ以及作为畜禽饲料开发(靳文广等ꎬ２０１８)等ꎮ相关研究表明苹果渣提取物具有良好的抑菌作用ꎮ董彩文等(２００８)从苹果渣中提取的黄酮对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有较好的抑菌效果ꎻ单静敏等(２０１１)从苹果中提取原花青素ꎬ证实其对变形链球菌㊁金黄色葡萄球菌都有抑制作用ꎻ周春娣(２０１４)的研究发现苹果渣多酚对大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌和枯草杆菌显示了不同程度的抑制作用ꎮ此外ꎬ有研究表明苹果渣提取物具有抗氧化性㊁清除自由基的特性ꎮ李珍(２０１４)的研究表明苹果皮渣多酚对ＡＢＴＳ自由基㊁ＤＰＰＨ 自由基㊁超氧阴离子自由基均有较强的清除作用ꎬ对Ｆｅ３＋具有显著的还原能力ꎻ卢艺惠等(２０２０)证实了从苹果籽壳中提取的色素对ＤＰＰＨ 自由基㊁羟基自由基以及超氧阴离子自由基有较好的清除能力ꎻ陈文超(２０１７)的研究表明苹果渣的低聚糖提取液也有一定的ＤＰＰＨ ㊁羟基自由基的清除能力ꎮ上述研究表明了苹果渣提取物具有良好的抑菌和抗氧化的作用ꎬ在医药及功能性食品开发方
面为苹果渣的综合利用提供了科学依据ꎮ微生物大量滋生和氧化反应也是引起食物腐烂变质的重要因素ꎬ大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌也是腐败食物中常见的菌群ꎬ而上述研究揭示了苹果渣提取物有用于食物防腐的可能ꎮ苹果渣提取物是否能用于食物防腐ꎬ特别是易腐烂水果上的应用还鲜有报道ꎬ其抑菌效果是否能达到防腐的要求ꎬ这一问题尚需深入研究和证实ꎮ为了解决苹果渣资源浪费的问题ꎬ以及探究苹果渣乙醇提取物的抗菌活性和在天然食品上的实际保鲜防腐作用ꎬ本研究采用微波辅助法提取苹果渣乙醇提取物ꎬ以大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌和酵母菌为指示菌ꎬ研究了苹果渣乙醇提取物抗菌活性和较优抑菌条件ꎻ以热带水果百香果
眉什么目什么(Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａｅｄｕｌｉａ)为实验对象ꎬ研究苹果渣乙醇提取物的实际防腐作用ꎬ为利用苹果渣开发新型天然食品防腐剂提供科学依据ꎮ
１㊀材料与方法
１.１材料㊁仪器㊁设备
材料：新鲜红富士苹果ꎬ市售ꎻ新鲜红皮百香果ꎬ采购于广西靖西县百香百味铺ꎮ
检测菌株：大肠杆菌(Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ)㊁金黄色葡萄球菌(Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ)㊁酵母菌(Ｙｅａｓｔ)ꎬ均由成都师范学院实验室提供ꎮ材料与菌种均由成都师范学院刘绪副教授鉴定ꎮ
主要试剂：钨酸钠㊁钼硫酸锂为国产分析纯ꎻ没食子酸标准品(五峰赤诚生物科技股份有限公司)ꎮ主要设备:５１００Ｂ型紫外分光光度计(上海元析仪器有限公司)ꎻＲＥ￣５２ＡＡ型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)ꎻＲＭ５０型折光率仪(上海昊扩科技有限公司)ꎻＷＩ２７７４０型自动滴定仪(北京北瑞达医药科技有限公司)ꎮ
１.２方法
１.２.１苹果渣乙醇提取液的制备㊀榨汁后的苹果渣压片置于干燥箱(１２０ħꎬ１０ｈ)烘干备用ꎬ每次
２８１１广㊀西㊀植㊀物４１卷
称取５.００ｇ苹果渣片于破碎机中破碎ꎬ置于１００ｍＬ三角瓶中加入正己烷浸泡２４ｈꎬ阴干后ꎬ按料液比１ʒ３０(ｇ ｍＬ￣１)加入６０％乙醇溶液ꎬ微波功率７００Ｗ提取７０ｓ后ꎬ真空吸滤２ｈ(Ｅｓｃａｒｐａ＆Ｇｏｎｚａｌｅｚꎬ１９９８)ꎬ收集成品溶液ꎮ
１.２.２苹果渣乙醇提取物抑菌性测定㊀接种大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌和酵母菌于试管中培养后ꎬ加入１０ｍＬ无菌水充分震荡洗涤ꎬ制成菌悬液备用(梁峙ꎬ１９９８)ꎮ将滤纸打成直径为６ｍｍ滤纸片灭菌后备用ꎮ将苹果渣乙醇提取物干燥ꎬ并配制成１０ｇ Ｌ￣１样品溶液备用ꎮ
１.２.３苹果渣乙醇提取物抗菌活性实验设计１.２.３.１抑菌圈直径的测定㊀在培养基中加入１００μ
Ｌ的菌悬液ꎬ均匀涂抹ꎬ分别制成含有大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌和酵母菌的平板ꎬ对照组加入等量无菌水ꎮ在３７ħ和２８ħ恒温下ꎬ大肠杆菌和金黄色葡萄球菌培养２４ｈꎬ酵母菌培养４８ｈꎬ用直尺测定抑菌圈直径ꎮ
１.２.３.２抑菌性分析㊀将苹果渣乙醇提取物稀释成浓度为０.５㊁２.０㊁５.０㊁８.０ｇ Ｌ￣１的溶液ꎬ将已杀菌烘干的６ｍｍ圆形滤纸片放入苹果渣乙醇提取物２ｍｉｎꎬ捞出沥干后贴在含菌平板ꎮ在３７ħ和２８ħ恒温下ꎬ大肠杆菌和金黄色葡萄球菌培养２４ｈꎬ酵母菌培养４８ｈꎬ测定抑菌直径(唐传核和彭志英ꎬ２００１)ꎬ重复３次ꎬ以无菌水为对照ꎮ
１.２.３.３最佳抑菌浓度实验㊀苹果渣乙醇提取物的浓度为３㊁４㊁５㊁６㊁７ｇ Ｌ￣１ꎬ处理方法同抑菌性分析ꎬ测定抑菌圈直径ꎮ
１.２.３.４ｐＨ值对苹果渣乙醇提取物抑菌活性影响㊀将苹果渣乙醇提取物用盐酸和氢氧化钠梯度调配成ｐＨ值为４㊁５㊁６㊁７㊁８ꎬ方法同抑菌性分析ꎬ测定抑菌圈直径ꎮ
１.２.３.５盐浓度对苹果渣乙醇提取物抑菌活性影响㊀用氯化钠将苹果渣乙醇提取物调制成浓度分别为１㊁３㊁５㊁７㊁９ｇ Ｌ￣１盐溶液ꎬ方法同抑菌性分析ꎬ测定抑菌圈直径(Ｌｕ＆Ｆｏｏꎬ２０００)ꎮ
１.２.４苹果渣乙醇提取物防腐作用测定㊀取同等数量的百香果ꎬ称取与其质量相应的０.１％㊁０.２％㊁０.３％的苹果渣乙醇提取物ꎬ配制成５０ｍＬ溶液ꎬ离心备用ꎮ将上述苹果渣乙醇提取物溶液均匀涂抹在百香果表面ꎬ再设置一组空白对照组(不做任何处理的百香果)ꎮ套上保鲜膜ꎬ自然风干ꎬ放于同一环境下(温度１９~２１ħꎬ湿度５５％~６５％)进行培养观察ꎮ每个实验组处理６盒ꎬ每盒５个ꎬ做好标记(空白组:０１－０６ꎻ苹果渣乙醇提取物组:１１－
１６㊁２１－２６㊁３１－３６)ꎮ仔细观察百香果的感官品质(颜色㊁大小㊁气味等)ꎮ分析不同保鲜条件下百香果的理化指标数值变化及感官品质变化ꎮ感官品质评价由１０名专业感官评价员完成ꎻ失重率用电子分析天平测定ꎻ腐烂率由统计结果计算ꎻＶＣ含量采用紫外分光光度法测定(马宏飞等ꎬ２０１２)ꎻ可溶性固形物采用折光率仪测定ꎻ总酸度采用酸碱滴定法测定(自动滴定仪)ꎻ固酸比为可溶性固形物值与总酸度的比值ꎮ
１.３实验数据处理
所有实验均重复进行３次ꎬ采用ＳＰＳＳ２０.０软件进行数据分析ꎬ实验数据采用ＡＮＯＶＡＬＳＤ法(最小显著差数法)处理ꎬ结果以平均值ʃ标准偏差表示ꎬＰ<０.０１为极显著ꎬＰ<０.０５为显著ꎬＰ>０.０５为不显著ꎮ
２㊀结果与分析
２.１苹果渣乙醇提取物抑菌性结果
２.１.１抑菌性实验㊀苹果渣乙醇提取物的抑菌作用可以根据抑菌圈的直径来判断抑菌量与抑菌强度是否呈正相关(张杰等ꎬ１９９６)ꎮ由表１可知ꎬ苹果渣多酚提取物对酵母没有明显的抑菌作用ꎬ对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用ꎮ随着苹果渣乙醇提取物含量浓度的增加ꎬ抑菌强度增大ꎬ大肠杆菌的抑菌环直径为０.８４ｃｍꎬ金黄色葡萄球菌为０.６５ｃｍꎮ
２.１.２最佳抑菌浓度实验㊀由图１可知ꎬ当苹果渣乙醇提取物浓度为４.０ｇ Ｌ￣１时ꎬ对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径都达到最大ꎬ之后随着提取物浓度的增加ꎬ对金黄色葡萄球菌抑菌性呈减小趋势ꎬ而对大肠杆菌的抑制作用变化不明显ꎮ方差分析结果显示ꎬ不同浓度苹果渣乙醇提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌效果有显著差异(Ｆ>Ｆ０.０５(４ꎬ４)ꎬＰ<０.０５)ꎮ
２.１.３ｐＨ值对苹果渣乙醇提取液抑菌活性影响㊀由图２可知ꎬ在中性偏弱酸性的条件下ꎬ提取物表现出良好的抗菌活性和稳定性ꎮ当ｐＨ值为６~７时ꎬ其抗菌活性最强ꎬ之后苹果渣乙醇提取物的抗菌活性随着ｐＨ值的增加而降低ꎮ方差分析显示ꎬ不同ｐＨ处理后的苹果渣乙醇提取物对大肠杆菌
３８１１
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７期张华玲等：苹果渣乙醇提取物抗菌活性及防腐作用研究
表１㊀苹果渣乙醇提取物的抑菌效果评价Ｔａｂｌｅ１㊀Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆ
ａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓ
供试菌种
Ｓｅｌｅｃｔｅｄｓｔｒａｉｎｓ抑菌效果Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｅｆｆｅｃｔ
大肠杆菌
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ＋＋＋金黄色葡萄球菌Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ＋＋＋酵母菌Ｙｅａｓｔ
－
㊀注:－表示苹果渣乙醇提取物未表现出抑菌活性(抑菌圈的直径<１ｍｍ)ꎻ＋表示苹果渣乙醇提取物表现出轻度抑菌活性(抑菌圈的直径为１~３ｍｍ)ꎻ＋＋表示苹果渣乙醇提取物表现出中度抑菌活性(抑菌圈的直径为４~５ｍｍ)ꎻ＋＋＋表示苹果渣乙醇提取物表现出高抑菌活性(抑菌圈的直径为６~９ｍｍ)ꎮ
㊀Ｎｏｔｅ:－ｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｄｏｎｏｔｅｘｈｉｂｉｔａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ(ｔｈｅｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｃｉｒｃｌｅ<１ｍｍ)ꎻ＋ｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｓｈｏｗｍｉｌｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ(ｔｈｅｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｃｉｒｃｌｅｉｓ１－３ｍｍ)ꎻ＋＋ｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｓｈｏｗｍｏｄｅｒａｔｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ(ｔｈｅｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｃｉｒｃｌｅｉｓ４－５ｍｍ)ꎻ＋＋＋ｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｓｈｏｗｈｉｇｈａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ(ｔｈｅｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｃｉｒｃｌｅｉｓ６－９
ｍｍ).
图１㊀苹果渣乙醇提取物的最佳抑菌浓度实验Ｆｉｇ.１㊀Ｔｈｅｂｅｓｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｔｅｓｔｏｆ
ａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓ
和金黄色葡萄球菌的抑制作用差异不显著(Ｆ<Ｆ０.０５(４ꎬ４)ꎬＰ>０.０５)ꎮ
２.１.４盐浓度对苹果渣乙醇提取物提取液抑菌活性影响㊀由图３可知ꎬ苹果渣乙醇提取物抑菌效果与盐浓度先呈正相关ꎬ当浓度为５.０ｇ Ｌ￣１
时ꎬ抑菌圈直径最大ꎬ之后随着盐浓度的增加ꎬ抑菌性逐渐减小ꎮ方差分析结果显示ꎬ不同盐浓度处理苹果渣乙醇提取物后对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用差异不显著(Ｆ<Ｆ０.０５(４ꎬ４)ꎬＰ>０.０５)
桃始华
ꎮ情愿
图２㊀ｐＨ值对苹果渣乙醇提取物抑菌活性影响Ｆｉｇ.２㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｐＨｖａｌｕｅｏｎａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ
ａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓ
图３㊀盐浓度对苹果渣乙醇提取物
提取液抑菌活性影响
服装海报Ｆｉｇ.３㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓａｌｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ
ｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓ
２.２苹果渣乙醇提取物防腐作用结果
由表２可知ꎬ空白组百香果手感软ꎬ颜色差ꎬ且皱缩严重ꎬ有异味产生ꎬ已经失去了研究和基本的商品食用价值ꎮ苹果渣乙醇提取物处理组百香果的硬度㊁色泽㊁饱满度㊁风味都保持较好ꎬ这是由于苹果渣乙醇提取物具有抗氧化㊁抑菌特性ꎬ能抑制腐烂变质ꎬ显示了其良好的保鲜效果ꎬ极大维持了果实优良的感官品质ꎮ
由表３可知ꎬ苹果渣乙醇提取物处理后的各组百香果ꎬ相较于空白组均表现出较好的贮藏优势ꎬ防腐保鲜效果明显ꎮ但是随着乙醇提取物使用剂量的增大ꎬ贮藏效果呈现先升高后降低的趋势ꎮ即０.２％苹果渣乙醇提取物组(２１－２６组)处理后ꎬ经过４０ｄ的保鲜实验ꎬ百香果腐烂率最低为６.７％ꎬ
４
８１１广㊀西㊀植㊀物４１卷
表２㊀处理后百香果的感官品质
Ｔａｂｌｅ２㊀Ｓｅｎｓｏｒｙｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｐａｓｓｉｏｎｆｒｕｉｔａｆｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ
处理组
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐ感官得分
Ｓｅｎｓｏｒｙｓｃｏｒｅ硬度(手捏)
Ｈａｒｄｎｅｓｓ色泽
Ｃｏｌｏｕｒａｎｄｌｕｓｔｒｅ饱满度
Ｆｕｌｌｎｅｓｓ风味
Ｆｌａｖｏｕｒ
空白组
Ｂｌａｎｋｇｒｏｕｐ３５软Ｓｏｆｔ暗沉㊁无光泽
Ｄｕｌｌａｎｄｍａｔｔｅ皱缩
Ｓｈｒｉｎｋｉｎｇ有异味
Ｆａｕｌｔｙ
对长辈的生日祝福苹果渣乙醇提取物组
Ｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｏｆａｐｐｌｅｐｏｍａｃｅ８０较硬Ｓｔｉｆｆｅｒ鲜艳㊁有光泽
Ｂｒｉｇｈｔａｎｄｌｕｓｔｒｏｕｓ大多饱满
Ｈｉｇｈｐｌｕｍｐｎｅｓｓ酸甜适中
Ｍｏｄｅｒａｔｅｌｙ
许冠杰个人资料
ｓｗｅｅｔａｎｄｓｏｕｒ㊀注：表中数据为各实验组中随机取样一盒的测定值ꎮ
㊀Ｎｏｔｅ:Ｔｈｅｄａｔａｉｎｔｈｅｔａｂｌｅａｒｅｔｈｅｍｅａｓｕｒｅｄｖａｌｕｅｓｏｆｏｎｅｂｏｘｒａｎｄｏｍｌｙｓａｍｐｌｅｄｆｒｏｍｅａｃｈｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐ.
表３㊀不同处理组腐烂率及相关理化指标测定结果
Ｔａｂｌｅ３㊀Ｔｈｅｄｅｃａｙｒａｔｅａｎｄｒｅｌａｔｅｄｐｈｙｓｉｃａｌａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｉｎｄｅｘｅｓｏｆｅａｃｈｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ
处理组Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐ
平均
腐烂率
Ａｖｅｒａｇｅ
ｄｅｃａｙ
ｒａｔｅ(％)
平均
失重率
Ａｖｅｒａｇｅ
ｗｅｉｇｈｔ
ｌｅｓｓ(％)
ＶＣ
ＶｉｔａｍｉｎＣ(ｍｇ １００ｇ￣１)
贮藏前
Ｂｅｆｏｒｅ贮藏后
Ａｆｔｅｒ
可溶性固形物
Ｓｏｌｕｂｌｅｓｏｌｉｄ(％)
贮藏前
Ｂｅｆｏｒｅ贮藏后
Ａｆｔｅｒ
总酸
Ｔｏｔａｌａｃｉｄｉｔｙ(％)
贮藏前
Ｂｅｆｏｒｅ贮藏后
Ａｆｔｅｒ
固酸比
ＳＣ/ＴＡｒａｔｉｏ
贮藏前
Ｂｅｆｏｒｅ贮藏后
Ａｆｔｅｒ
０１－０６(空白)６７ʃ０.３ａ３６.３ʃ０.３ｄ２９.８ʃ０.１ａ２４.２ʃ０.１ａ１９.６ʃ０.１ａ１６.０ʃ０.３ｃ３.１ʃ０.１０ａ２.０８ʃ
０.１０ｃ６.３ʒ１ʃ
０.１ａ７.７ʒ１ʃ
０.２ａ１１－１６１３.３ʃ０.３ｂ７.９ʃ０.２ｃ２９.８ʃ０.２ａ２６.５ʃ０.２ｃ１９.６ʃ０.１ａ１８.３ʃ０.３ｂ３.１ʃ０.１２ａ２.７２ʃ
０.２０ｂ６.３ʒ１ʃ
０.１ａ６.７ʒ１ʃ
０.２ｂ２１－２６６.７ʃ０.３ｃ４.３ʃ０.３ａ２９.８ʃ０.１ａ２８.０ʃ０.２ｂ１９.６ʃ０.１ａ１９.２ʃ
０.２ａｂ３.１ʃ０.０５ａ２.９５ʃ
０.０５ａ６.３ʒ１ʃ
０.２ａ６.５ʒ１ʃ
０.４ｂｃ３１－３６１０ʃ０.２ｂｃ６.８ʃ０.２ｂ２９.８ʃ０.３ａ２７.８ʃ０.２ｂ１９.６ʃ０.２ａ１８.９ʃ０.１ａ３.１ʃ０.１５ａ２.８８ʃ
０.１２ａ６.３ʒ１ʃ
０.１ａ６.６ʒ１ʃ
０.１２ｂ㊀注：表中数据为各个剂量组(６个平行数据)的平均值ꎮ同列不同小写字母表示在０.０５水平上差异显著ꎮ
㊀Ｎｏｔｅ:Ｔｈｅｄａｔａｉｎｔｈｅｔａｂｌｅａｒｅｔｈｅｍｅａｎｖａｌｕｅｓｏｆｅａｃｈｄｏｓｅｇｒｏｕｐ(６ｐａｒａｌｌｅｌｄａｔａ).Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｔｔｈｅ０.０５ｌｅｖｅｌ.
失重率最低为５.７％ꎬＶＣ含量最高为２８.０ꎬ固酸比最低为６.５ʒ１ꎮ经０.２％苹果渣乙醇提取物组(２１－２６组)处理的百香果ꎬ各项指标远优于空白组ꎬ也略优于０.１％苹果渣乙醇提取物组(１１－１６组)㊁０.３％苹果渣乙醇提取物组(３１－３６组)ꎬ并且该组理化指标值最接近贮藏前理化指标值ꎬ保鲜效果最好ꎬ这与抑菌浓度实验结果具有一致性ꎬ并不是浓度越高效果越好ꎮ对０１－０６组和２１－２６组贮藏后的指标变化进行统计学检验ꎬ结果表明空白组百香果与经过苹果渣乙醇提取物处理对百香果保鲜存在极显著差异(Ｐ<０.０１)ꎻ对比２１－２６组贮藏前后ꎬ结果表明在该处理下ꎬ百香果贮藏后各项指标变化不显著
(Ｐ>０.０５)ꎮ因此ꎬ使用０.２％的苹果渣乙醇提取物处理百香果能够起到较好的保鲜防腐作用ꎮ３㊀讨论与结论
３.１苹果乙醇提取物的抗菌活性
苹果渣乙醇提取物对大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌具有抑制作用ꎬ且对前者的抑制作用大于后者ꎬ而对酵母菌抑制效果不明显ꎬ这与廖春丽等
(２０１２)㊁Ｐｉｒｅｓｅｔａｌ.(２０１８)的研究结果相似ꎮ抑菌效果与浓度有关系ꎬ但对不同的菌影响不同ꎮ在浓度上升到４.０ｇ Ｌ￣１时ꎬ抑菌作用最强ꎬ之后随着浓度的增加ꎬ对金黄色葡萄球菌抑菌性呈减小趋势ꎬ而对大肠杆菌的抑制作用变化不明显ꎮ可能是苹果渣乙醇提取物对这两种菌存在不同
的抑菌机理ꎬ不同的成分可以作用于不同的微生物ꎮ本实验苹果渣乙醇提取物是由原花青素㊁没食子酸等多种物质组成ꎬ抑菌性是否由一种或几种物质作用或协同效应ꎬ还有待进一步的研究(Ｓｕáｒｅｚｅｔａｌ.ꎬ２０１０)ꎮｐＨ值和盐浓度对抑菌效果也有影响ꎬ在中性偏弱酸性比碱性条件下抑菌效果好ꎬ可能是由于抑菌活性物质在酸性条件下受到的保护比较稳定ꎬ而在碱性条件下会被氧化分解ꎬ或者结构遭到破坏ꎮ已有研究表明苹果色素㊁多酚等有抑菌作用的成分ꎬ在酸性条件下较稳定(高昌勇ꎬ２０１０ꎻ袁歆贻ꎬ２０１４)ꎮ一定盐浓度能增强苹果渣
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７期张华玲等：苹果渣乙醇提取物抗菌活性及防腐作用研究
