血小板功能分析試驗中文解說
介紹
血小板功能檢測因科技及樣本不易處理之故，而長期被忽略其在臨床上的重要性。近年來有科學家利用Shear-Flow rate原理，於體外模擬血管受傷後血小板黏附和凝集過程，其只需一管含抗凝劑的血液就可以使血小板功能檢測在體外利用儀器真實的操作並取得分析結果。如此可以使醫師對病患的血小板功能 (Primary Hemosatsis Capacity) 多一份瞭解，以幫助其在臨床上的治療。關於PFA的適用的範圍如下：
PFA的適應症：
1. 類血友病（vWD）及血小板功能障礙篩檢。
2. DDAVP在第一型類血友病患者之治療評估。
3. 阿斯匹靈之治療評估。
4. 術前之出血危險評估。
健保局於2008年5月1日通過
編號 | 診療項目 | 支付點數 | 備註 |
08131C | 血小板功能閉鎖時間-膠原蛋白/腎上腺素 Platelet function closure time-Col/Epi 註：不得與08018C、08019C、08069C同時申報。 | 367 | 增列 |
08132C | 血小板功能閉鎖時間-膠原蛋白/二磷酸腺苷酸 Platelet function closure time-Col/ADP 註：不得與08018C、08019C、08069C同時申報。 | 367 | 增列 |
| | | 悲喜交集 |
08018C、08019C：出血時間（Bleeding Time）
08069C ：血小板凝集試驗（代数Platelet Aggregation test）
PFA的適用範圍說明：
血小板抑制劑<Aspirin>的用藥評估：阿斯匹靈<Aspirin>是心臟內科與神經內科的常用藥品，其主要功能在抑制Thrombaxne generation，使血小板的凝集功能降低使保護血管再次栓塞。長久以來臨床的經驗發現約有25~45%的病患對阿斯匹靈有所謂的Non-responding的現象，但一直無理想的檢驗工具來協助。同時經過國內及本科的研究發現在國人也有相同的情況，並以PFA作為評估工具與Mark J. Alberts, Alan D. Michelson, Armin J. Grau, Jacek Golan´ski, Kjell Andern等人研究發現相同8 9 10 11，既Col/EPI對ASA-induced platelet dysfunction非常敏感，所以在臨床上PFA被建議可以用於阿斯匹靈的用藥評估。
Patrono對阿斯匹靈阻抗（無反應）的定義：
Aspirin resistance：Definition, mechanisms and clinical read-outs
C. Patrono, Journal of Thrombosis and Haemostasis 2003
Inability of Aspirin to
1. Protect individuals from thrombotic complication.
2. Cau a prolongation of bleeding time.
3. Inhibit thromboxane(TX) biosynthesis.
4. Produce an anticipated effect on one or more in vitro tests of platelet function.
優於血時間(Bleeding Time)：根據 Dr. Paul Harrison, Dr.Carcao1等人自1998年起的研究與觀察，確認除極為罕見的血管異常外，PFA在疾病的敏感性上明顯優於出血時間(BT)，與血小板凝集試驗相關性達86%以上2。Col/EPI其對初級凝血障礙的陰性預測值（Negative predictive Value NPV）為93.4%，陽性預測值（Positive predictive Value PPV）為81.8%。Col/ADP其對初級凝血障礙的陰性預測值（Negative predictive Value NPV）為79.4%，陽性預測值（Positive predictive Value PPV）為77.3%。
術前的出血評估：平常大多只做到aPTT或PT而已（condary haemostasis），對primary hemostasis capacity的檢查大多忽略或只做出血時間(Bleeding Time)，此時容易出現非必要的輸血或致死情形。所以Juergen Koscielny et al 12在其研究中發現利用PFA、病人病史及其他檢查並配合部份治療，可有效地降低非必要的輸血或出血致死情形。
在血液科或小兒血液科方面，對類血友病（von Willebrand dia; vWD）、血小板無力症（Glanzmann's thrombasthenia）及Storage Pool Dia的篩檢一直缺乏有效且適合的工具，據歐洲多位臨床醫師及學者3 4於1998~2003麦花雪白菜花稀年對上述疾病的研究發現PFA與BT的敏感性分析是(97% vs 66%)、(96% vs 59%)、(84% vs 55%)，所有結果顯示出PFA優於BT。另一方面接受desmopressin(DDAVP)治療的vWD病人其治療效果有從PFA的檢測中顯現出來5 6 7。
分析方法
本檢驗方法是以含3.2% (0.105 M) 檸檬酸鈉緩衝液（抗凝劑）的血液為樣本 進行血小板
功能的評估。使用的产销PFA-100® 檢測盒（由毛細管、樣本槽（sample rervoir）和中央具有孔洞的生化活性膜等數個部份組成）， 將加入抗凝劑的全血從樣本儲存器經由毛細管和孔洞抽出，此舉能讓血小板暴露在高速的剪力流（shear flow）下， 生化膜上覆有一層膠原蛋白，学而不 血小板附著到膠原蛋白後會誘發活化血小板的初始生理刺激， 此外，膜上還塗覆腎上腺素或ADP，這些是廣泛在凝集度試驗（aggregometry testing）中和膠原蛋白一起使用，以活化血小板的其他幾種生理促效劑（physiologic agonists）。在PFA-100®檢測一開始，配製誘發溶液（Trigger Solution）浸濕生化膜， 檢測期間，血小板會黏附到覆有膠原蛋白的生化膜上， 接著，與凝集度試驗類似，當血小板與像是ADP或腎上腺素等促動劑接觸時會被活化並且釋放出顆粒物質， 釋放出顆粒物質之後的血小板會彼此相黏而形成聚合體（aggregate），PFA-100®系統中測量血小板功能的方式是，血小板聚合在孔洞中形成血小板血栓，並因此逐漸使血流減少到最後阻礙血液的流動。
PFA-100® 儀器偵測從檢測開始到血小板栓子封住孔洞的時間，此一時間即為封閉時間（Closure Time; CT）， CT是分析全血樣本用來表示血小板功能的指標， 如同一般的認知，系統中血小板栓子的形成會受到血小板數目太少和/或活性太低、血漿中類血友病因子（von Willebrand factor）不足、以及其他因為流動過程造成血球容積比降低等的影響。
膠原蛋白/腎上腺素檢測盒（Collagen/Epinephrine [Col/EPI] Test Cartridge）是最原始用來檢測由內在血小板缺陷、類血友病、或暴露到血小板抑制劑而誘發之血小板功能障礙的檢測盒， 而膠原蛋白/ADP檢測盒（Collagen/ADP [Col/ADP] Test Cartridge）是用來做為Col/EPI檢測盒是否因為ASA或含ASA藥物的作用而導致檢測結果異常的指標。
結果判讀與意義
PFA-100檢測結果為以秒為單位的封閉時間（Closure Time; CT）， 當結果落在參考數值（reference range）範圍內且病人病史及醫師檢查均正常時，表示血小板功能為正常，落在參考數值範圍上限以上（prolong）時表示血小板功能為低下（不易凝集），若超出極限值300c.時，受檢者其出血頃向的可能性較高。
參考範圍（reference range）3.2% Sodium Citrate
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. COL/EPI test：84~163 c.
2. COL/ADP test：63~115 c.
Source:
Y.-C. CHEN, T.Y. CHAO, S.N. CHENG, S.H. HU & J.-Y. LIU, Prevalence of von Willebrand dia in women with iron deficiency anaemia and menorrhagia in Taiwan, Haemophilia (2008)
評估檢測結果時應同時考量病患病史、臨床醫師的檢查，及血球容積比（<35%）或血小板數目（<150,000/µL）是否符合，當其中一項或兩項出現偏低時，CT可能出現假性延長。PFA 檢測提供血小板功能的指標，CTCTCT高於實驗室建立之參考範圍可能代表需要做進一步的診斷檢測，若是 PFA-100® 結果與臨床評估不一致時，應進行更多檢測。
| 正常受試者 | Mild platelet defect | Sever platelet defect |
Col/EPI | Normal | Prolong | Prolong （clo to 300 c.） |
Col/ADP | Normal | Normal | Prolong （clo to 300 c.） |
臨床意義 | 病人病史及醫師檢查均正常時，代表血小板功能正常。 | 由阿斯匹靈所引起之血小板功能低下，或中程度血小板功能低下。 | vWD补肝血、血小板無力症 （Glanzmann's thrombasthenia）及Storage Pool Dia或多種藥物所引起的血小板功能障礙。 建議病人可執行其他確認檢測。同時注意其出血的危險發生。 |
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Source: PFA-100 package inrt from Dade Behring Inc.
阿斯匹靈（或其他抗血小板藥物）PFA數值判讀
| ASA Non responder | ASA Responder | ASA Hyper-responder | ASA Hyper-responder |
Col/EPI | ＜163c. (<193 c.) | 163＜xxx＜300 (193＜xxx＜300) | ＞300 | ＞300 |
Col/ADP | 63~115 | 63~115 | 63~115 | ＞300 |
| 阿斯匹靈治療無反應 | 阿斯匹靈治療有反應 | 阿斯匹靈治療有反應 | 治療反應較為強烈 可能有出血情形 |
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Source：
M. Coakley, R. Self, W. Marchant,；Anaesthesia, 2005（60）
M. Creascente, A. Di Castelnuovo,；Thromb Haemost, 2008（99）
