野黄芩素改善高糖诱导小胶质细胞活化引起的血脑屏障功能障碍

更新时间:2023-06-14 23:36:20 阅读: 评论:0

网络出版时间:2020-11-49:54 网络出版地址:https://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20201103.0913.024.html插入备注
野黄芩素改善高糖诱导小胶质细胞活化
引起的血脑屏障功能障碍
王梦娜,梅茜钰,陆 宾,徐 红
(上海中医药大学中药研究所,上海市复方中药重点实验室,中药标准化教育部重点实验室,
中药新资源与质量标准综合评价国家中医药管理局重点研究室,上海 201203)
doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2020.11.012
文献标志码:A文章编号:1001-1978(2020)11-1542-06中国图书分类号:R 332;R284 1;R322 12;R322 81;R329 24;R587 1;R977 6
摘要:目的 研究野黄芩素(scutellarein)对高糖诱导的小胶质细胞活化引起的血脑屏
障功能障碍的改善。方法 将神经小胶质细胞BV 2与小鼠脑血管内皮细胞bEnd 3共培养,建立血脑屏障细胞模型。跨内皮电阻实验和细胞渗漏实验检测内皮细胞屏障的损伤情况;酶联免疫吸附法测定BV2细胞上清中TNF α的含量;免疫印迹法检测bEnd 3细胞中紧密连接蛋白,包括occludin、claudin1、claudin5和claudin19的表达。结果 用高糖诱导活化BV 2细胞或用TNF α直接刺激bEnd 3细胞都会损伤bEnd 3细胞构成的细胞屏障,野黄芩素可逆转这种损伤。野黄芩素可以减少高糖诱导活化的BV 2细胞中TNF α的分泌。TNF α可以降低bEnd 3细胞中紧密连接蛋白claudin1、claudin5和claudin19的表达,野黄芩素能够逆转TNF α降低的claudin1和claudin19蛋白表达。结论 野黄芩素可以阻断高糖诱导的神经小胶质细胞活化,减少炎性因子TNF α的释放,缓解高糖诱导激活神经小胶质细胞和TNF α直接刺激脑血管内皮细胞所导致的血脑屏障破损。
关键词:野黄芩素;血脑屏障;高糖;脑血管内皮细胞bEnd 3;神经小胶质细胞BV 2;TNF α
开放科学(资源服务)标识码(OSID):
收稿日期:2020-04-16,修回日期:2020-07-24
基金项目:上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划[NoZY
速度与激情三(2018 2020) CCCX 5002]
作者简介:王梦娜(1994-),女,硕士生,研究方向:中药药理学,E
mail故事奶奶
英语知识树:761497832@qq.com;徐 红(1966-),女,博士,研究员,硕士生导师,研究方向:中药药效物质与质量标准,通讯作者,E mail:xu hongtcm@163.com
  中枢神经系统(centralnervoussystem,CNS)微血管内皮细胞对维持CNS稳态有着至关重要的作富贵竹水培
学习理念
用,也是构成血脑屏障(
bloodbrainbarrier,BBB)的关键成分[1]
。据报道,糖尿病进程中的高糖环境会
引起微血管内皮功能障碍,会加速许多CNS疾病进
程,包括中风、阿尔茨海默病和创伤性脑损伤[
2-4]
。BBB是由高度特异性的CNS微血管内皮细胞组成,许多脑疾病常伴有BBB破坏,进而导致疾病发展的
加剧[5]
。在BBB中,紧密连接(tightjunctions,TJs)
蛋白主要包括Claudin和Occludin两大家族,主要功能为连接内皮细胞,封闭间隙,在维持血脑屏障功能和调节血管内皮通透性方面扮演了重要的角
色[6]。
need的过去式  野黄芩素(scutellarein)是从灯盏细辛(erigeron tisherba)、木蝴蝶(oroxylisemen)等具有抗炎镇痛中药中分离鉴定的活性单体成分,具有抗癌、神经保
北花园
护和抗炎等作用[7-9]。有报道发现,野黄芩素可抑
制缺氧诱导的血管内皮细胞增殖和血管内皮生长因子表达,从而有助于减轻糖尿病微血管并发症糖尿
病视网膜病的发生[10]。本研究主要探讨野黄芩素
对高糖诱导激活神经小胶质细胞所介导的BBB破损的改善作用。1 材料
1.1 药物 野黄芩素(scutellarein,纯度≥98%),购自上海益宏生物化工有限公司。
1.2 细胞 小鼠脑内皮细胞株bEnd 3购自LifeTechnology(Carlsbad,CA);小鼠神经小胶质细胞BV 2得自上海中医药大学中药研究所吴晓俊老师
课题组馈赠。
1.3 主要试剂 Occludin(货号sc 133256)、clau din 1(货号sc 166338)和claudin 19(货号sc 390274)抗体均购自SantaCruz(CA);claudin 5(货号GTX84681)抗体购自GeneTax(AltonParkwayIr vine,CA);anti RabbitIgG(H+L)(货号312 005 003)和anti MouseIgG(H+L)(货号415 005 166)均购自J
acksonImmunoResearch(WestGrove,PA);酶联免疫吸附试验盒(ELISA)购自R&D(Minneap olis,MN);葡萄糖和其他试剂,除非另有说明,均购
·2
451·中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2020Nov;36(11):1542~7

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标签:细胞   中药   内皮细胞   诱导   高糖   胶质
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