三阴性乳腺癌中β 肾上腺素能受体的表达
及与上皮间质化相关性研究
王 敏１，郭梅艳２，董 雨１，苗 玲１，王友明２，吕 晶３
（１．邯郸市中心医院胸外科，河北邯郸０５６００１；２．河北工程大学附属医院，河北邯郸０５６００２；
梦见别人穿新衣服３．河北工程大学医学院，河北邯郸０５６０３８）
ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．１２．０１９收稿日期：２０２０ １０ １３；修回日期：２０２０ １０ １３
基金项目：邯郸市科技局专项计划一般项目（编号：１９４２２０８３００８ ６５）作者简介：王敏，女。主要从事乳腺科临床与研究工作。通讯作者：吕晶，博士。Ｅ ｍａｉｌ：ｌｖｊｉｎｇ＠ｈｅｂｅｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
摘要：目的 探究三阴性乳腺癌（ＴＮＢＣ）中β 肾上腺素能受体（β
ＡＲｓ）的表达及与上皮间质化（ＥＭＴ）的关系。方法７２例ＴＮＢＣ患者组织标本选自河北工程大学附属医院。通过免疫组织化学法对肿瘤切片进行染色以评估β ＡＲｓ的表
达。通过Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测ＥＭＴ标记蛋白Ｅ 钙黏蛋白和波形蛋白的表达。分别通过χ２检验及Ｓｐｅａｒｍａｎ秩相关分析确定β ＡＲｓ表达与ＴＮＢＣ临床病理特征的相关性以及β ＡＲｓ表达与ＥＭＴ标志物的关系。结果 与对照组织中的表达水平
相比，ＴＮＢＣ组织中的β１ ＡＲ和β２ ＡＲ而非β３ ＡＲ的表达显著增加（Ｐ＜０．０５），且β１ ＡＲ和β２ ＡＲ的表达与ＴＮＭ分期和ＬＮ转移显著相关（Ｐ＜０．０５）。在ＴＮＢＣ组织中，Ｅ 钙黏蛋白表达显著降低，而波形蛋白表达显著升高（Ｐ＜０．０５）。高β２ ＡＲ组织中Ｅ 钙黏蛋白的表达明显低于低β２ ＡＲ组织（Ｐ＜０．０５）。高表达β１ ＡＲ和β２ ＡＲ的组织中，波形蛋白的表达显著增加（Ｐ＜０．０５）。ＴＮＢＣ组织中β２ ＡＲ和Ｅ 钙黏蛋白之间呈显著负相关，而β１ ＡＲ和β２ ＡＲ表达与波形蛋白水平呈正相关。结论 β１ ＡＲ和β２ ＡＲ在ＴＮＢＣ中过表达，可能通过调节ＥＭＴ过程促进ＴＮＢＣ的发生和发展。关键词：三阴性乳腺癌； β 肾上腺素能受体； 上皮间质化； 免疫组织化学； 蛋白印记法中图分类号：Ｒ７３７．９ 文献标识码：Ａ
ＴｈｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆβ
ＡｄｒｅｎｅｒｇｉｃＲｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎＴｒｉｐｌｅ ＮｅｇａｔｉｖｅＢｒｅａｓｔＣａｎ
ｃｅｒａｎｄＩｔｓＣｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈＥｐｉｔｈｅｌｉａｌＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｉｚａｔｉｏｎ
ＷＡＮＧＭｉｎ１，ＧＵＯＭｅｉｙａｎ２，ＭＩＡＯＬｉｎｇ１，ＷＡＮＧＹｏｕｍｉｎｇ２，ＬＹＵＪｉｎｇ
３（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｈｏｒａｃｉｃＳｕｒｇｅｒｙ，ＣｅｎｔｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨａｎｄａｎ，Ｈａｎｄａｎ０５６００１，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｈｏｒａｃｉｃＳｕｒｇｅｒｙ，
ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨｅｂｅｉＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｄａｎ０５６００２，Ｃｈｉｎａ；３．Ｍｅｄｉｃａｌｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｅｂｅｉ
ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈａｎｄａｎ０５６０３８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆβ ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｓ（β
ＡＲｓ）ａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ（ＥＭＴ）ａｎｄｔｈｅｉｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｉｎｔｒｉｐｌｅ ｎｅｇａｔｉｖｅｂｒｅａｓｔｃａｎ
ｃｅｒ（ＴＮＢＣ）．ＭｅｔｈｏｄｓＡｔｏｔａｌｏｆ７２ＴＮＢＣｐａｔｉｅｎｔｓｆｒｏｍｔｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ．Ｔｕｍｏｒ
ｓｅｃｔｉｏｎｓｆｒｏｍａｌｌｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｓｔａｉｎｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｆｏｒａｓｓｅｓｓｉｎｇβ
ＡＲｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＥＭＴｍａｒｋｅｒｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇＥ ｃａｄｈｅｒｉｎａｎｄＶｉｍｅｎｔｉｎｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ．Ｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ
ｏｆβ ＡＲｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗｉｔｈＴＮＢＣｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆβ ＡＲｓａｎｄＥＭＴｍａｒｋｅｒｓｗｅｒｅａｎａｌｙｓｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆβ１ ＡＲａｎｄβ２ ＡＲｎｏｔβ３
ＡＲｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎＴＮＢＣｔｉｓｓｕｅｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｔｉｓｓｕｅｓ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄｔｈｅβ１
ＡＲａｎｄβ２ ＡＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＴＮＭｓｔａｇｅａｎｄＬＮｍｅｔａｓｔａｓｉｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｕｔｖｉｍｅｎｔｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎＴＮＢＣｔｉｓｓｕｅｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＥ ｃａｄｈｅｒｉｎｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｉｎｈｉｇｈβ２
ＡＲｔｈａｎｉｎｌｏｗβ２ ＡＲｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｔｉｓｓｕｅｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｖｉｍｅｎｔｉｎｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｈｉｇｈβ１ ＡＲａｎｄβ２ ＡＲｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｔｉｓｓｕｅｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｒｅｗａｓａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ
ｂｅｔｗｅｅｎβ２ ＡＲａｎｄＥ ｃａｄｈｅｒｉｎａｎｄｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅβ１ ＡＲａｎｄβ２
ＡＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｖｉｍｅｎｔｉｎ２
０１２ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｄｅｃ．２０２０，Ｖｏｌ．
２７，Ｎｏ．１２
ｐｒｏｔｅｉｎｌｅｖｅｌｓｉｎＴＮＢＣｔｉｓｓｕｅｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆβ１ ＡＲａｎｄβ２
ＡＲｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＴＮＢＣｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＥＭＴ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｔｒｉｐｌｅ ｎｅｇａｔｉｖｅｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ； β ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒ； Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ；
Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ 三阴性乳腺癌（ｔｒｉｐｌｅ ｎｅｇａｔｉｖｅｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ，ＴＮＢＣ）作为乳腺癌高侵袭亚型，与被诊断为非ＴＮＢＣ
患者相比，ＴＮＢＣ患者病理特征和临床预后较差［１］
，
且ＴＮＢＣ患者在诊断后约３年内有更远的复发趋
势，接受诊断后约５年内则死亡［２］
。因此，评估潜在
的生物标志物对于Ｔ
ＮＢＣ的预测、改善患者的预后及寻找特定抗癌疗法至关重要。
越来越多的证据表明，应激及其相关激素肾上腺素和去甲肾上腺素在癌症的发展包括肿瘤的生长、耐药性、复发以及患者的预后不良中起着至关重要的作用
［３ ４］
。β肾上腺素能受体（β
ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，β ＡＲｓ）作为肾上腺素能下游受体，其相关信号的激活被认为与应激介导的癌症进展有关［５］
。
文献报道，β
ＡＲｓ在多种癌组织中有所表达，包括舌鳞状细胞癌
［６］
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，卵巢癌
［７］
和非小细胞肺癌
［８］
。不仅
如此，最近有报道称，β肾上腺素能信号通路的激活可促进肿瘤生长，加速转移并导致不良的临床病理特征，例如肿瘤复发和存活率降低
［９ １０］
。然而，使用
β受体阻滞剂可以减少肿瘤血管生成、
细胞增殖、迁移和侵袭［３，１１］
。这些研究的结果表明，β ＡＲｓ可能是致癌过程中与癌症相关的生物标志物，并且是癌症治疗的潜在靶标。
众所周知，上皮 间质转化（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ，ＥＭＴ）是导致癌细胞侵袭和转移的关键过程
［１２］
。癌细胞可以通过调节ＥＭＴ标记蛋白，包括
Ｅ 钙黏蛋白（Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ）、波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ）、某些细胞角蛋白和Ｎ
钙黏蛋白的表达来获得迁移和侵袭的能力。最近的研究表明，β
ＡＲｓ信号的激活参与了Ｅ
ＭＴ［６，１３ １４］，并促进了结直肠腺癌、胃癌和非小细胞肺癌的侵袭和转移。但是，对于ＴＮＢＣ患者中β
ＡＲｓ和ＥＭＴ之间的相关性知之甚少。因此，本研究中通过临床病理学研究检测ＴＮＢＣ患者中β ＡＲｓ（β１ ＡＲ、β２ ＡＲ和β３
ＡＲ）的表达，并探讨了β
ＡＲｓ与各种临床病理特征之间的关系，评估ＥＭＴ标记蛋白水平及其与β ＡＲｓ表达的相关性，为更有效的ＴＮＢＣ预测及治疗提供新的视角。
材料和方法
１ 样本收集
ＴＮＢＣ组织取自于２０１７年１月至２０１８年１２月
在河北工程大学附属医院接受手术切除的女性患者。所有患者均首次接受ＴＮＢＣ治疗，除ＴＮＢＣ以外均未接受其他治疗。所有受试者均缺乏ＥＲ、ＰＲ和ＨＥＲ ２的表达。组织取出后立即液氮冰冻，－８０℃冻存。均获得患者知情同意书，并通过医院伦理委员会批准。
２ 免疫组织化学染色（Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
ＩＨＣ）及评估
使用标准的免疫组织化学方法测量β ＡＲｓ的表达。组织石蜡包埋、切为５μｍ的薄片、脱蜡、样本
处滴３％过氧化氢溶液，随后微波热源修护，烧杯内缓冲液沸腾后停止加热，重复上述步骤３次。拿出组织片自然冷却应用５％Ｂ
ＳＡ封闭２０ｍｉｎ，轻甩表面残留液体。然后将载玻片与兔抗β１ ＡＲ（ａｂ３４４２），兔抗β２ ＡＲ（ａｂ１８２１３６）和兔抗β３ ＡＲ（ａｂ９４５０６）在３７°Ｃ孵育９０ｍｉｎ，所有抗体均购自Ａｂｃａｍ公司。用ＰＢＳ洗涤样品后，添加二抗并孵育２０ｍｉｎ。随后ＤＡＢ染色、显微镜观察、拍片。显微镜下取不同视野仔细确定染色情况，根据染色比例和强度评估受体表达，染色程度＝染色比例（０～３分）＋强度（０～３分）。≤２为阴性染色，≥３为阳性染色。得分≥４为高
β
ＡＲｓ表达，＜４为低β ＡＲｓ表达。 ３ 蛋白印记法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＷＢ）
应用ＷＢ检测ＴＮＢＣ组织中Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ表达。蛋白提取后经电泳（１０％ＳＤＳ ＰＡＧＥ）、转膜ＰＶＤＦ、５％牛奶孵育、一抗（１∶１０００）４℃过夜，其中包括兔抗Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ（３１９５ｓ），兔抗Ｖｉｍｅｎｔｉｎ（５７４１ｓ）和兔抗ＧＡＰＤＨ（５１７４ｓ）抗体。洗涤后，将它们与抗兔ＩｇＧ、ＨＲＰ连接的二抗（７０７４ｓ）室温下孵育２ｈ。所有抗体均购自Ｃ
ｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，然后通过增强的化学发光（ＥＣＬ，ＰｉｅｒｃｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＵＳＡ）测量蛋白质表达水平。 ４ 统计学处理
使用ＳＰＳＳ１９．０或ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ６软件分析所有数据。两组之间的差异通过ｔ检验计算。通过χ２招聘启示
检验确定β１ ＡＲ和β２ ＡＲ表达与临床病理参数之间的关系。ＷＢ结果表示为ｘ
±ｓ。通过Ｓｐｅａｒｍａｎ秩相关分析比较β１ ＡＲ／β２ ＡＲ与ＥＭＴ标记蛋白之间的关系。Ｐ＜
０．０５为差异具有统计学意义。３
０１２标记免疫分析与临床 ２０２０年１２月第２７卷第１２期
结 果
１ ＴＮＢＣ患者中β１ ＡＲ和β２ ＡＲ过表达 ＩＨＣ结果显示，β１ ＡＲ在细胞膜和细胞质中表达，而β２ ＡＲ主要表达在细胞核和细胞质中（图１Ａ）。统计评分表明，相对于正常组织，ＴＮＢＣ组织中β１ ＡＲ和β２ ＡＲ的表达水平显著增加（ｔ１＝
２．４３１，Ｐ１＝０．０１７；ｔ２＝３．１９１，Ｐ２＝０．００２）。虽然β３
ＡＲ位于细胞膜中，但正常组织和ＴＮＢＣ组织之间未检测到β３ ＡＲ表达的差异（ｔ＝１．０４７，Ｐ＝０．２９８）。７２例ＴＮＢＣ病例中，β１ ＡＲ和β２
ＡＲ阳性染色分别为３
３．３％（２４／７２）和４８．６％（３５／７２）
。注：与正常组织相比， Ｐ＜
０．０５图１ ＴＮＢＣ组织中β ＡＲｓ的表达（Ａ）与ＩＨＣ评分（Ｂ）
２ β１ ＡＲ和β２
ＡＲ表达与ＴＮＢＣ临床病理特征的关系
如表１所示，χ２
分析表明，β１
ＡＲ表达与ＴＮＭ分期（Ｐ＝０．０２９）和ＬＮ转移（Ｐ＝０．０１２）相关，而
β２
ＡＲ的表达与肿瘤大小（Ｐ＝０．０３４），ＴＮＭ分期（Ｐ＝０．０３４）和ＬＮ转移（Ｐ＜０．００１）显著相关。β１ ＡＲ和β２
ＡＲ表达均与年龄或组织学分级无关。表１ ＴＮＢＣ中β１ ＡＲ和β２
ＡＲ表达与临床病理特征的关系组别β１ ＡＲ＋
－
－
Ｐ值
β２ ＡＲ＋
－
－
Ｐ值
年龄（岁）≥５０１５３７１．６９６
０．１９３
２４１８２．９３７
０．０８７
＜５０９
１１
１１
１９
肿瘤大小（ｃｍ）
≥５１３２２０．４４５
０．５０５
２２１４４．５０３
０．０３４
＜５１１
２６
１３
２３
ＴＮＭ分期Ⅰ＋Ⅱ９３１４．７５３
０．０２９
１４３０１２．７７２
０．００１
Ⅲ１５
１７
２１
７
组织学分级Ｇ１＋Ｇ２１４２５０．２５２
０．６１６
２７２１３．３６４
０．０６７
Ｇ３１０
２３
８
１６
ＬＮ转移
＋１８２１６．２９４
０．０１２独自旅行
２３７１６．２０５
０．００１
－
６
２７
１２
３０
４
０１２ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｄｅｃ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１２
３ ＴＮＢＣ患者中ＥＭＴ标志物的表达
结果显示，与正常组相比，ＴＮＢＣ组织中Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的蛋白质水平显著降低（ｔ＝－６．３９４，Ｐ＜０．００１，图
２Ａ）。相反，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ在ＴＮＢＣ组织中的表达高于对照组（ｔ＝６．０８６，Ｐ＜０．００１，图２Ｂ）
。
注：与正常组织相比， Ｐ＜
０．０５图２ ＴＮＢＣ组织中ＥＭＴ标志物Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ（Ａ）和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ（Ｂ）的表达
４ ＴＮＢＣ中β１ ＡＲ和β２
ＡＲ表达与ＥＭＴ标志物相关性分析
如表２所示，高表达β２ ＡＲ的ＴＮＢＣ组织中Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ表达明显低于低表达β２ ＡＲ组织（ｔ＝－４．５８３，Ｐ＜０．００１）。高β１ ＡＲ和低β１
ＡＲ表达组织中Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白无明显变化（ｔ＝－１．００８，Ｐ＝０．３２７）。相反，在高表达β１ ＡＲ和β２ ＡＲ表达的组织中Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表达显著增加（ｔ１＝３．３２０，Ｐ１＝０．００４；ｔ２＝２．７４０，Ｐ２＝
一棵小树０．０１３）。此外，根据ＴＮＢＣ组织中Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表达水平，我们发现ＴＮＢＣ中β１ ＡＲ与Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ表达之间无显著相关性（ｒ＝－０．１５０，Ｐ＝０．５２７），而β２ ＡＲ与Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ之间呈显著负相关（ｒ＝－０．５５５，Ｐ＝０．０１１）。然而ＴＮＢＣ组织中β１ ＡＲ和β２ ＡＲ表达均与Ｖｉｍｅｎｔｉｎ蛋白水平呈正相关（ｒ１＝０．６５３，Ｐ１＝０．００２；ｒ２＝０．６９２，Ｐ２＝
０．００１）。表２ Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ在高和低β１ ＡＲ／β２
ＡＲ 表达ＴＮＢＣ组织中的表达
项目Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎＶｉｍｅｎｔｉｎｐｒｏｔｅｉｎ
β１
ＡＲｈｉｇｈ０．２４１±０．０２４０．９８１±０．０７３
β１
ＡＲＬｏｗ０．２７８±０．０２７
０．７１８±０．０６３
β２
ＡＲｈｉｇｈ０．１７４±０．０２３
１．００６±０．０７１
β２
ＡＲＬｏｗ０．３４５±０．０２９０．６９２±０．０６２
注：与低表达组相比， Ｐ＜
０．０５讨 论
本研究我们评估了ＴＮＢＣ组织样品中β ＡＲｓ受
体的蛋白表达，结果显示，三个β ＡＲｓ在ＴＮＢＣ组织
中都有所表达，但相对于正常组织，β１ ＡＲ和β２
ＡＲ在ＴＮＢＣ中呈过表达。我们还发现，β１ ＡＲ和β２ ＡＲ的表达增加与多种ＴＮＢＣ病理特征密切相关，例如肿瘤大小，ＴＮＭ临床分期和淋巴结转移。这些结果表明，β１ ＡＲ和β２
ＡＲ蛋白表达失调可能与ＴＮＢＣ的肿瘤发生有关。进一步的分析表明，β１
ＡＲ和β２ ＡＲ的过表达与ＥＭＴ之间存在显著相关性，其中β１ ＡＲ和β２
ＡＲ的过表达与ＴＮＢＣ组织中的Ｅ 钙黏着蛋白呈负相关，与波形蛋白水平呈正相关。提示ＴＮＢＣ的发展可能与β１ ＡＲ和β２ ＡＲ信号失控进而调节ＥＭＴ有关。
已知应激会增加患癌症的风险，而β ＡＲｓ信号
会在应激情况下被激活。研究发现，β
ＡＲｓ通路参与癌症发生和发展中，其中β１
ＡＲ已被证明有助于恶病质的脂解［１５］，β３ ＡＲ错义突变与肥胖人群的乳腺癌相关［１６］。大量研究表明，β２ ＡＲ刺激与癌细胞增殖和肿瘤生长有关，β２
ＡＲ激活后可通过ｃＡＭＰ ＰＫＡ信号通路驱动肿瘤微环境改变并促进肿瘤细胞侵袭
和假足形成而导致侵袭和转移增加［９，１１，１７］
。在本研
究中，与正常组织相比，ＴＮＢＣ组织中发现β１
ＡＲ和β２ ＡＲ过表达。进一步的分析表明，β１ ＡＲ和β２
ＡＲ的表达增加与ＴＮＭ临床分期和淋巴结转移呈正相关，这一结果与口腔鳞状细胞癌的发现相似［１８］。值得注意的是，ＳＡＲＡＨ等和ＧＡＲＧＩＵＬＯ等［９，１９］报道，β２ ＡＲ的异常表达与促进乳腺癌的致癌特性、增加腋窝淋巴结转移以及导致无病生存期
差有关。这些发现表明β
ＡＲｓ无疑在癌症中起重要作用，并且β１ ＡＲ和β２
ＡＲ信号传导的激活在５
０１２标记免疫分析与临床 ２０２０年１２月第２７卷第１２期
ＴＮＢＣ的侵袭和转移级联中起关键作用。最近研究表明，β
ＡＲｓ拮抗剂与癌症复发和转移之间存在有益关系。例如，在早期乳腺癌患者中，使用非选择性
β受体阻滞剂普萘洛尔与减少肿瘤扩散有关［２０］
。临床数据表明，针对心脏适应症患者选择的β２
受体拮抗剂摄入与ＴＮＢＣ患者较高的无复发率和总体生存率有关［２１］
。这些结果表明，β ＡＲｓ，尤其是β２ ＡＲ可能是预测ＴＮＢＣ患者预后的潜在生物标志物，对于抗癌治疗至关重要。 众所周知，ＥＭＴ可通过丢失细胞极性和黏附力，增强细胞运动性和获得间充质表型，在癌症的侵袭
和转移中起关键作用。Ｅ
ｃａｄｈｅｒｉｎ是上皮细胞与细胞间黏附的关键因素，并在上皮癌中起转移抑制作
用，然而，
Ｖｉｍｅｎｔｉｎ是间充质细胞中发现的主要中间丝蛋白，在高度增殖和侵袭性状态下代表完全去分
化状态肿瘤细胞［２２ ２３］
。已经证实，Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ减少和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ表达增加是ＥＭＴ过程的关键特征。研究发现，Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的损失和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的增加与舌鳞
状细胞癌（
ＴＳＣＣ）和胃癌的细胞侵袭和转移增强有关［６，１３］。本研究结果表明，ＴＮＢＣ组织中Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达水平较正常组织下降，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ表达在ＴＮＢＣ组织中显著增加。不仅如此，进一步的分析发现在高表达β１ ＡＲ和β２ ＡＲ的ＴＮＢＣ组织中，Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表达分别降低和升高。我们还发现在ＴＮＢＣ组织中β２ ＡＲ和Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ的过度表达之间存在负相关，而β１ ＡＲ和β２
ＡＲ与Ｖｉｍｅｎｔｉｎ之间存在显著的正相关。有报道［２４］称ＮＥ诱导的胃腺癌细胞株，可通过β２
ＡＲ／ＨＩＦ １α／Ｓｎａｉｌ信号通路进行体外ＥＭＴ。体外研究证实，β２ ＡＲ的激活可以通过启动白介素６／Ｓｔａｔ３／Ｓｎａｉｌ１途径来促进舌磷癌中ＥＭＴ过程［６］
。我们的结果表明，β ＡＲｓ信号可能参与ＴＮＢＣ的发展，其主要作用可能是通过促进ＥＭＴ增强ＴＮＢＣ中癌细胞迁移和侵袭完成，然而ＴＮＢＣ中β ＡＲｓ调控ＥＭＴ的具体机制需要进一步研究。 综上，β１ ＡＲ和β２高老头的作者
ＡＲ的过表达在ＴＮＢＣ的发生和发展中起着关键作用，可能与调控Ｅ
ＭＴ过程有关。
参考文献
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ｒｅｍｏｄｅｌｓｌｙｍｐｈｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅｔｏｐｒｏｍｏｔｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ
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（下转第２１２１页）
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０１２ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｄｅｃ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１２
