LB平板制备:南宁白沙大桥Amp终浓度为100μg/ml
(1地锅排骨)配制LB液体培养基(无Amp)
按25g/l 称取 6.25 g LB powder ,加入250 ml 锥形瓶中,再加入250 ml dd H2接吻技巧O,用双层铝箔封口
121℃,20 min,灭菌。
(2)配制LB固体培养基(含有Amp)
1)按15 g/l称取3.75 g Agar加入已有6.25 g LB powder 的250 ml锥形瓶中,加入250 ml ddH2O,双层铝箔封口。
121℃,20 min,高温高压灭菌。
2)带培养基冷却至55 ℃左右时,按1:1000 加入250μl Amp stock(100mg/ml)使终浓度为100μg/ml,即工作浓度。摇匀,同时避免产生气泡。
3)趁热倒平板,每个表面皿约排行前十名奶粉25 ml左右,冷却成形后,倒置,用保鲜膜,5个一组封装,防止变干,于4℃保存。
鹅英语怎么说(3)分装
1)将LB液体培养基1ml/EP管分装,于-20℃保存
2)将灭菌水1 ml/EP管分装,于-20℃保存
3)将A mp stock 按1 ml/EP管分装,用封口膜封口,-20℃保存
(4)80%甘油灭菌分装
1)按1戴成语:4将灭菌水与甘油充分混合,得80%甘油
2)每EP管分装250μl,121℃,20 min高温高压灭菌,-20℃保存
50*TAE buffer:242 gTris,57.1 ml 冰醋酸
100 ml,0.5 mol/l EDTA (PH8.0n绅士),定容至1 L
TBE buffer:Tris ,Boric acid ,EDTA.
16.87g TBE Powder溶于 1L ddH2O
10*PBS: NaCl 80g,KCl 2g,Na2HPO4 6.1g,KH2PO4 1.9g 加ddH2O定容至1L,调PH为7.3
50*TE Buffer: 500μl 1M Tris-HCl 和100μl 0.5M EDTA于50ml ddH2O中
DEPC水:按0.1%南海局势最新消息比例将1 mlDEPC加入1L ddH2O中,摇匀,37℃温育至少 12 h。121℃,20 min,灭菌以除去DEPC.
Amp stock: 100mg/ml
Amp work concentration: 100ug/ml
Kana stock: ?mg/ml
Kana work concentration: 10ug/ml