TAE是Tris-乙酸,缓冲容量小,但是溶解度大,易于储存
TBE是Tris-硼酸,缓冲容量大,但是溶解度小,不易长期储存,易产生沉淀
TAE与TBE的区别
首先要知道 TAE 與 TBE 緩衝溶液的成份如下:
50x TAE Buffer (Tris-Acetate-EDTA)
242 gm Tris ba
有关莲的诗句
57.1 ml Acetic acid 100ml
0.5M EDTA
Add ddH2O to 1 liter and adjust pH to 8.5.
胃康胶囊10x TBE Buffer (Tris-Borate-EDTA)
108 gm Tris ba
55 gm Boric acid
青花瓷器9.3 gm Na4EDTA
Add ddH2O to 1 liter.
The pH is 8.3 and requires no adjustment.
它們的分別有下列幾點:
1. TBE 不能太濃 (它只可有 10 times),因為 borate 會很容易沉澱,但一般有少許沉澱是不會有太大問題。
2. TBE 的 buffering capacity 比 TAE 高,用 TBE 來跑出來的 gel,分辨率 (resolution) 會比較高。国动委
3. 因為 TBE 有 borate 離子 (ion),它會影嚮酵素 (enzyme) 的工作。因此,若要為分離出的 DNA 進行下一步酵素處理,如 cloning 或 restriction cut 的話,就要切記不要讓 DNA 碰上 borate ion。
工作表态发言
4. TAE的 buffer capacity 比較差,gel 一般比較模糊,但它不會對影嚮酵素
三种缓冲液的配制方法
Tris-乙酸(TAE):50×浓贮存液(每升):
242g Tris 碱
57.1ml 冰乙酸
100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)
使用时再稀释50倍。
香辣茄子Tris-磷酸(TPE):10×浓贮存液(每升):
108g Tris 碱
15.5ml 85%磷酸(1.679g /ml)
40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)
慧心使用时再稀释10倍。
Tris-硼酸(TBE):5×浓贮存液(每升):
54g Tris 碱
27.5g 硼酸高速数据采集
20ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)