前列腺素E2受体EP3
前列腺素是一类广泛存在于体内的自体活性物质，介导体内多种生理功能。前列腺素类化合物具有非常高的成药性，目前，在全球范围内有超过20种前列腺素类上市药物。由于前列腺素类化合物独特的结构和广泛的生物活性，发展前列腺素的高效合成方法具有非常重要的意义。在过去的50多年间，前列腺素一直是合成化学家的重要目标分子。
前列腺素是一类由20个碳原子的不饱和脂肪酸组成的活性物质。1934年，前列腺素被von Euler等学者首次发现，当时认为此物质可能是由前列腺所分泌，因此命名为前列腺素。1957年Bergstrom及其瑞典同事Samuelsson分离出了PGF1和PGF2α的纯品，并在后续研究中阐明了前列腺素的结构和代谢过程，有关前列腺素药物的研究在随后的20世纪60年代达到高潮。1982年，Bergstrom与Samuelsson和John Vane三位科学家因在前列腺素及有关生物活性物质的研究方面的卓越贡献共同获得了诺贝尔生理学和医学奖。PGE2是具有活性的前列腺素的一种，广泛的分布于人体，几乎参与了所有细胞的代谢活动，并且与炎症、免疫、肿瘤等的病理过程有关。近期研究表明，PGE2在体内对 AngIl诱发的高血压有重要的调节作用林氏大宗祠面试邀请[1]。PCE2的生物学效应主要是通过激活4类EP受体而发挥的，其中EP3受体在机体广泛分
布于肾脏，血管系统和肾上腺等处。EP3受体C末氨基酸有多种不同的剪接形式，从而产生多种不同的剪接异构体，故其信号转导路径仍不清楚。
在多种末端前列腺素中，PGE2是生物活性最多样化和分布最广泛的。前列腺素E2骈体文是花生四烯酸的代谢产物，在机体多种组织和细胞中发挥重要的生理和病理学作用。研究表明，PGE2合成后通过自分泌和旁分泌与特定靶细胞质膜上的相应受体（Eprostanoid，EP）结合发挥效应，EP受体属于 G 蛋白偶联受体超家族，具有7次跨膜的疏水α-螺旋、胞外的C﹣末端以及胞内的N﹣末端了个结构域。分子克隆已经鉴定出4种不同的EP亚型受体，分别是EP1、EP2、EP3和EP4。EP2和EP4受体激活后介导cAMP的升高引起平滑肌的松弛，因此又称松弛型受体。EP1活化后介导钙离子内流引起平滑肌的收缩称之为收缩型受体。EP3受体激活后主要介导 cAMP 的下降从而抑制平滑肌的收缩，所以又称抑制型受体。编码EP3受体的基因在转录过程中产生多种 mRNA 剪接变体（splice variants)。剪接变体的差异导致胞外C﹣末端氨基酸序列改变，C﹣末端氨基酸序列直接决定其与配体的亲和力，根据EP3受体胞外C﹣末端序列的差异，在不同种属中可分成不同的同工型数目，其中人的EP3受体有9种 mRNA 的剪接变体编码8种异构体，如EP3-I、EP3-、EP3﹣、EP3-IV、EP3-V、EP3-等，其他物种如小鼠、大鼠、兔，牛也分别有4种、5种、5种和4种异构体[2,3]。不同的EP3异构体可以和不同的 G 蛋白偶联引起细胞内第二信使浓度变化，激活相应的靶酶，最终产生有差异的生理和病理学效应。绿能组什么词
EP3受体的亚型不同，其配体结合特性也是不同的。不同亚型的EP受体均表现出不同的配体结合特性，又称之为亲和力，通常用Ki常数来表示。 Ki 值越小意味着亲和力越高。动物实验表明，小鼠EP3受体能和大多数 EP 受体结合，按亲和力从大到小顺序排列依次为：sulprostone，M&B-28767，PGE2，PGE1，11-deoxy~PGE1，GR63799X，16，16-dimethyl-PGE2，17-phenyl-PGE2，misoprostol，AH13205，1-0H-PGE1。EP3受体与如此多的PGE2及其类似物的高亲和力表明其作用的多样性和复杂性。此外，与EP3受体有高度亲和力的配体也表现出与其他 EP 受体的不同程度的亲和力。 Sulprostone 和 M & B -28767与EP1受体结合的Ki值分别为21和120nM，11-deoxy-PGE1和16,16-dimethyl-PGE2也表现出与EP2和EP4受体的较高亲和力，GR63799X只表现出与EP3受体有高度亲和力表明其为EP3受体高选择性激动剂[4]。目前，许多医药公司正在研制合成药用EP3受体激动剂，它与EP3受体的亲和力和特异性将更高。
EP3受体在全身广泛分布，几乎所有组织细胞中均有EP3mRNA的存在。通过Northern bloting，反转录﹣聚合酶链反应（RT-PCR）和原位杂交技术分析表明，人的EP3mRNA在肾脏，胰腺和子宫大量表达，除此之外在心脏，肝脏，骨骼肌，小肠，结肠，卵巢和睾丸等部位也有EP3mRNA的稳定表达
[4]；在小鼠体内EP3mRNA大量表达在中枢神经系统如大脑皮层、海马回、丘脑、中脑和低位脑干等神经元细胞中，在接近视前区／下丘脑前部，器官性的血管终板周围的神经元细胞中也有EP3mRNA的表达，其他部位EP3mRNA的表达情况与人相似。进一步发现在胃肠道的纵行平滑肌有EP3受体的表达，而环行肌中则没有[4]。同样，Kotani等也证实在子宫肌层在EP3受体表达，而子宫内膜中未见其表达[5]，这表明即使在同一器官组织中EP3受体的表达也是有差异的。另外，在免疫系统的T细胞，B细胞，单核巨噬细胞及中性粒细胞中亦证实有EP3受体的表达[4,7]。EP3受体的这种分布的特殊性和复杂性，一方面有助于我们更好的理解和认识EP3受体的生理学和药理学意义，但另一方面又为我们对它的深人研究带来了困难。
EP3受体结构的易变异性及具有与多种前列腺素及其类似物结合的能力，决定了其功能的复杂性。EP3受体的多种变构体使其能与多种 G 蛋白偶联，进行复杂的信号传导。 G 蛋白是一类能与鸟苷酸可逆性结合的膜蛋白，在EP3受体的跨膜信息传递中发挥关键性的作用，根据G蛋白特异性α活性亚基的不同，可将其分为Gi，Gs，Gq，G12，G13共五类，它们分别与不同的EP3异构体偶连，引起胞内第二信使如cAMP，Ca2+浓度的变化及PI反应，从而发挥效应作用。占优势分布的EP3异构体与Gi偶连后抑制环磷酸腺苷酶的活化，使细胞内第二信使cAMP浓度下降，发挥EP3受体的主要信号传导作用。但是由于EP3受体的异构体较多，分布情况复杂，其与不同G蛋白偶连表现也多样，在机体内它们之间的信号传递相互交织，错综复杂，到目前为止还没完全弄清楚，Kotani等[5,6]用EP3受体激动剂M&B28767研究发现：表达EP3-II，EP3-IV和EP3-的细胞引起 cAMP 的升高，而表达EP3-V的细胞cAMP浓度不升高，但是所有的EP3异构体均能抑制由福斯高林（forskolin）引起的细胞内cAMP的升高，而EP3-V和EP3-M的这种作用可被白喉外毒素（pertussis toxin）逆转；胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）外翻发生在表达EP3-I和EP3-I的细胞，然而M&B28767激动表达EP3-V细胞时PS。并不见外翻；M&B28767激动表达EP3-V和EP3﹣的中国仓鼠细胞后引起丝裂原活化蛋白激酶（MAPK)的活化，另外，Asboth等[9]
研究显示EP3受体在培养的子宫肌层细胞中可活化磷酸酶C(PLC)促使Ca2+向胞浆流动。
此外，最近研究还发现，EP3受体还能通过小 G 蛋白进行信号的传递，Matsumura 等在研究 NO 与感染性神经性疼痛关系时发现EP3受体选择性激动剂作用于脊柱浅层神经细胞能促使NO的合成，初探其机制发现与Rho活化相关[10]茶杯蛋糕。人的肺腺瘤细胞（A549）既表达EP3受体也表达EP4受体，Yano等研究发现A549细胞内PGE2依赖的Ras信号的激活是由EP3受体所致[11]。在信号传递过程中EP3受体还能协同其它EP亚型受体发挥作用。日本学者Hatae等研究发现肥大细胞瘤P815细胞中EP3受体选择性激动剂能够与选择性EP4受体激动剂协同放大对腺苷酸环化酶的活化作用，RT-PCR表明EP4和EP3的mRNA均表达。该研究组在之前还在COS7细胞中证实了EP3受体对EP2受体的协同作用。对其具体的机制还有待于进一步的研究[12]。
PE3受体与疾病密切相关。在肿瘤的研究方面，我们已经知道非类固醇类抗炎药能够降低恶性肿瘤的发生率和生长，但具体机制还不清楚。 Amano 等用基因敲除小鼠探讨其发生机制，在EP3(-/-）缺陷的Sarcoma-180细胞植人小鼠体内观察发现：肿瘤相关的血管发生和肿瘤细胞的生长受到明显的抑制，用EP3受体阻滞剂在野生型肿瘤小鼠也观察到类似的
作用。由此表明，宿主体内的EP3受体信号在肿瘤的进展和生长中发挥重要作用，EP3受体阻滞剂能够抑制恶性肿瘤的发生。而非类固醇类抗炎药能够减少炎症介质PCE2的产生[14]。此外，EP3受体对肿瘤的影响也有复杂的表现。Shoji等对经过两阶段致癌物质作用的EP3(-/-）缺陷性小鼠和野生型小鼠皮肤癌变的观察也有重要的发现：在早期阶段通过组织学检查证实二者的癌变率没有差异，而在后期阶段发现只有野生型小鼠发生皮肤鳞状细胞癌，说明EP3受体信号有助于皮肤鳞状细胞癌的发生是在致癌物质作用的后期阶段[15]。同时该研究组在研究EP3受体在结肠癌中的作用也发现：PGE2的EP3亚型受体对早期结肠癌没有影响，而在结肠癌的晚期能明显的抑制癌细胞的生长[16]。消炎痛是一种运用相当广泛的解热镇痛药，在服用的过程中可能对胃肠黏膜产生损伤，Kunikata等用EP3(-/-）缺陷性小鼠和野生型小鼠对比研究发现，EP3受体只在肠道对消炎痛引起的黏膜损伤有保护作用。而对胃的保护是由PGE2的另一个亚型受体EP1来介导的[17]。
PGE2 通过不同的受体配合在众多疾病中起重要作用，因而PGE2相关受体的病理药理受到国际生物医药界的广泛关注。通过对EP3受体的构效，受体配体结合，分布情况，信号传导途径等一系列的深入研究，相信未来一定能找到能抑制癌细胞生长的新型受体阻滞剂及其其他有治疗药效的激动剂。
赵佶瘦金书千字文
参考文献：
[1] Qi Z,Hao CM . Opposite effects of cyclooxygena -1 and -2 activity on the pressor respon to angiotensin II [J]. Clin Invest ,2002,110:61-69.
[2] 1 Kotani M,Tanaka I , Ogawa Y , et al . Structural organizationof the human prostaglandin EP3 receptor subtype gene (PTGER3). Genom - ics ,1997,40(3):425-434.
[3] Walch L, Clavarino E, Moris PL. Prostaglandin (PG)FP and EP1 re -ceptors mediate PGF2 alpha and PGE2 regulation of interleukin -1 beta expression in leydig cell progenitors. Endocrinology ,2003,144:1284-1291.
[4] Narumiya S, Sugimoto Y, Ushikubi F. Prostanoid receptors:structures ,properties , and functions . Physiol Rev ,1999,79(4):1193-1226.
[5] Kotani M, Tanaka I, Ogawa Y, et al. Molecular cloning and expression of multiple isoforms of human prostaglandin E receptor EP3 sub- type generated by alternative mesnger RNA splicing: multiple c- ond mesnger systems and tissue-specific distributions. Mol Pharma- col,1995,48(5):869-879.
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