ｗｅｒｅｆｅｄｗｉｔｈｈｉｇｈｆａｔｄｉｅｔｆｏｒ１２ｗｅｅｋｓ．ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｓｅｒｕｍＴＣ，ＴＧａｎｄｌｉｖｅｒＴＣ，ＴＧｃｏｎｔｅｎｔｓａｎｄｌｉｖｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎｓｕｃｈａｓＡＬＴａｎｄＡＳＴ．Ｏｉｌｒｅｄｓｔａｉｎｉｎｇ，ＨＥｓｔａｉｎｉｎｇ，ＭａｓｓｏｎｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄＳｉｒｉ ｕｓｒｅｄｓｔａｉｎｉｎｇｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｌｉｖｅｒｌｉｐｉｄａｃ ｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ，ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ．
ＡｍｐｌｅｘＴＭ
ｒｅｄｓｐｈｉｎｇｏｍｙｅｌｉｎａｓｅｋｉｔｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｄｅ
ｔｅｃｔＡＳＭａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ．ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＡＳＭａｓｅ，ＰＰＡＲα，ＰＧＣ １αａｎｄＣＰＴ１．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＷＴ＋ＨＦＤｇｒｏｕｐｄｉｓｐｌａｙｅｄｈｙ ｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａａｎｄｌｉｖｅｒｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｌｅｖｅｌｓｏｆｌｉｖ ｅｒｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ（ＴＧ）ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎＷＴ＋Ｃｈｏｗｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０ ０５ｏｒＰ＜０ ０１）．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，
ｔｈｅｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｓｈｏｗｅｄｍａｒｋｅｄｓｔｅａｔｏｓｉｓ，ｂａｌｌｏｏｎ ｌｉｋｅｃｈａｎｇｅｓ，ａｎｄｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ａｎｄａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡＳＭａｓｅｉｎｌｉｖｅｒｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０ ０１ｏｒＰ＜０ ００１），ｗｈｅｒｅａｓＣＰＴ１，ＰＰＡＲαａｎｄＰＧＣ １αｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｗｅｒｅｎｏｔｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｍａｔｃｈｅｄｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．ＨｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓｌｙＡＳＭａｓｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅｒｅｄｕｃｅｄｔｈｅｅｌｅｖａｔｅｄｌｉｖｅｒＴＧｉｎｄｕｃｅｄｂｙＨＦＤ，ａｓｗｅｌｌａｓｉｍｐｒｏｖｉｎｇｂａｌｌｏｏｎ ｌｉｋｅｃｈａｎｇｅｓａｎｄｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓ ｓｉｏｎｓｏｆＰＰＡＲα，ＰＧＣ １αａ
ｎｄＣＰＴ１ｗｅｒｅｕｐ ｒｅｇｕｌａｔｅｄｉｎＡＳＭａｓｅ＋／－＋ＨＦＤｍｉｃｅｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＷＴ＋Ｃｈｏｗ
ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ ＡＳＭａｓｅｐｒｏｍｏｔｅｓｈｅｐａｔｉｃｓｔｅａｔｏ ｓｉｓａｎｄｆｉｂｒｏｓｉｓ，ｗｈｉｃｈｍａｙｂｅｒｅｌａｔｅｄｔｏｉｔｓｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＰＰＡＲα ＰＧＣ １αｐ
ａｔｈｗａｙ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒ；ａｃｉｄｓｐｈｉｎｇｏｍｙ ｅｌｉｎａｓｅ；ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ；ｈｅｐａｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓ；ｓｔｅａｔｏｓｉｓ；ｓｉｇｎａ ｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ
网络出版时间：２０２２－１２－１２１５：３４：５８ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／／３４．１０８６．ｒ．２０２２１２０９．１４２７．０１４．ｈｔｍｌ
◇神经药理学◇
高原低氧条件下红景天苷对小鼠记忆损伤的保护作用
秦宁宁１，２，申亦可１，２，程俊飞１，２，张晓静２，李文斌２，王 荣１
，２
（１．兰州大学药学院，甘肃兰州 ７３００００；２．中国人民解放军联勤保障部队第九四 医院药剂科，甘肃兰州 ７３００５０）ｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２０２０２０
文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０１－００６５－０６中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ２８２ ７１；Ｒ３２２ ８１；Ｒ３３８ ６４；Ｒ３３９ ５；Ｒ８４５ ２２
摘要：目的 探究红景天苷在高原低氧条件下改善小鼠学习记忆能力的作用。方法 ４８只Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ♂小鼠按体重随机分成平原对照组、高原模型组和红景天苷组，每组１６只，各组动物按剂量预防给药３ｄ后急进海拔４０１０ｍ的高原，缺氧暴露１ｄ后进行Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫实验测试小鼠学习记忆能力；测定丙二醛（ＭＤＡ）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、谷氨酸含量及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）活力；通过ＨＥ染色及尼氏染色观察海马组织病理学变化；通过Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测谷氨酸受体１（Ｇｒｉｎ１）和Ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ ３的表达。研究高原低氧条件下红景天苷对小王国维治学三境界
托马斯简笔画
收稿日期：２０２２－０８－１１修回日期：２０２２－１０－１０
基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２１７３７３８）；军队后勤科
研项目（
ＮｏＣＬＢ１９Ｊ０４９）作者简介：秦宁宁（１９９６－），女，硕士生，研究方向：高原药物抗缺
氧，
Ｅ ｍａｉｌ：ｑｉｎｎｎ２０１９＠１６３．ｃｏｍ；王 荣（
１９６９－），男，博士，教授，博士生导师，研究方向：高原药代动力学等，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｗａｎｇｒｏｎｇ ６９＠１６３．ｃｏｍ
鼠记忆损伤的保护作用，并初步探讨其保护机制。结果 与高原模型组比较，给予红景天苷后能明显缩短小鼠潜伏期、增加穿越平台次数，不同程度的降低小鼠脑组织ＭＤＡ、Ｈ２Ｏ２、谷氨酸含量及ＡＣｈＥ活力，增加ＧＳＨ含量及ＳＯＤ活力，改善海马体中的神经元损伤，降低海马组织中Ｇｒｉｎ１和凋亡蛋白Ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ ３的表达。结论 红景天苷可以减轻氧化应激损伤、调节神经递质水平、缓解海马组织损伤并减少神经元凋亡，最终改善由高原低氧造成的小鼠记忆损伤。关键词：红景天苷；高原低氧；学习记忆；氧化应激；神经递质；凋亡
开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：
高海拔地区低压低氧的环境会造成记忆障碍、
睡眠障碍、情绪障碍等与脑功能相关的影响［１－３］
。
低压低氧引起的记忆损伤通常与活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）的产生、神经递质及调节剂水平的变化、海马神经变性等有关。目前，虽然已经充分证明不同海拔高
度和持续时间对记忆功能有不同·
５６·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２３Ｊａｎ；３９（１）：６５～７０
程度的损害，但却尚未开发出广泛有效的药物来改善这种损伤。目前常用的治疗高原低氧损伤的药物主要有乙酰唑胺、地塞米松等，但由于其存在副作
用，不建议用于预防［４］。因此，在高原低氧条件下
评估以寻找对记忆损伤有效的预防药物具有重要意义。
红景天苷是红景天属药用植物的主要活性成分，已被证实具有抗癌、抗氧化及神经保护作
用［５－７］。但是对于红景天苷神经保护作用过程中所
涉及的作用机制还有太多的不明确关系，其研究尚停留在实验基础阶段。在本研究中，我们旨在评估红景天苷是否能够改善高原低氧造成的小鼠记忆障碍，并进一步探讨了红景天苷是否通过减轻氧化应激损伤、调节神经递质水平及减少神经元凋亡来改善高原低氧造成的记忆损伤。１ 仪器与材料
ＳＰＦ级Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠，♂，体质量（２０±２）ｇ，由斯贝福（北京）生物技术有限公司提供［实验动物许可证号：ＳＣＸＫ（京）２０１９－００１０］。
红景天苷（宝鸡晨光生物，批号：ＨＳ１８１２１１Ｓ１，纯度≥９８％）；ＳＯＤ试剂盒（批号：２０２１０８１９）、ＭＤＡ测定试剂盒（批号：２０２１０６２８）、ＧＳＨ测试盒（批号：２０２１０８１９）、Ｈ２Ｏ２测试盒（批号：２０２１０６２５）、谷氨酸测试盒（批号：２０２１０９２６）、Ａ ＣＨＥ测试盒（批号：２０２１０７１２）均购自南京建成生物工程研究所。Ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ ３、Ｇｒｉｎ１抗体，辣根过氧化物酶（ｈｏｒｓｅｒｅｄｄｉｓｈｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＨＲＰ）标记二抗均购自ｐｒｏｔｅｉｎｔｅｃｈ公司。 Ｐａｎｌａｂ水迷宫（深圳市瑞沃德生命科技有限公司）；ＭＤＦ Ｕ２０８６Ｓ超低温冰箱（ＳＡＮＹＯ）；３Ｋ１５型４℃高速台式冷冻离心机（ｓｉｇｍａ）；Ｔｉｓｓｕｅｌｙｓｅｒ ２４多样品组织研磨机（上海净信实业发展有限公司）；ＳｐｅｃｔｒａＭａｘｉ３型全自动荧光酶标仪（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ）等。２ 方法
２．１ 动物模型的建立及分组 将实验小鼠随机分成平原对照组（Ｃｏｎ组）、高原模型组（Ｈｙｐ组）、红景天苷组（Ｓａｌ组），每组１６只。Ｃｏｎ组和Ｈｙｐ组的小鼠给予等量的灭菌注射用水，Ｓａｌ组给予１０ｍｇ·
ｋｇ－１的红景天苷。
适应性喂养３ｄ后，各组小鼠按剂量预防灌胃给药３ｄ后急进青海玉树巴塘全军高原环境损伤防治重点实验室（海拔４０１０ｍ），运送途中果冻补水。抵达高原后，缺氧暴露１ｄ，期间继续每日按剂量给药，自由获取食水，于末次给药１ｈ后开始实验。平原组的小鼠与高原组同时开始实验。
２．２ Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫行为实验 Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫由一
个直径１
２０ｃｍ的灰色圆形水池组成，水池壁标有４个明显标记，并以此将水池分为４个象限，即第１、２、３和４象限。平台位于第１象限中间位置，水深为高出平台１ｃ
ｍ，水温控制在（１９～２１）℃，如Ｆｉｇ１所示。实验历时６ｄ，前５ｄ学习记忆训练，每天将小鼠面向池壁分别从不同象限的入水点放入水中，记录其找到平台所需的时间，即为潜伏期。如果在６０ｓ内找不到平台，则将其引导至平台并停留１０ｓ，潜伏期记为６
０ｓ，每日进行两次测试，计算每个训练日的平均值。ｄ６为正式实验，
记录小鼠在没有平台的情况下游泳６０ｓ
内的潜伏期及穿越平台次数。
Ｆｉｇ１ ＳｃｈｅｍａｔｉｃｄｉａｇｒａｍｏｆＭｏｒｒｉｓｗａｔｅｒｍａｚｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
２．３ 小鼠脑组织氧化应激指标的测定 按照试剂盒说明书检测小鼠脑组织ＭＤＡ含量、Ｈ２Ｏ２含量、ＧＳＨ含量和ＳＯＤ活力。
独活寄生丸２．４ 小鼠脑组织及血清神经递质的测定 通过摘眼球采血留取小鼠血液标本０
５ｍＬ，室温下静置２ｈ后４５００ｒ·ｍｉｎ－１
离心１０ｍｉｎ获取血清。小鼠颈椎脱臼处死，获取脑组织。按照试剂盒说明书检测
小鼠脑组织及血清中的谷氨酸含量及Ａ
ＣｈＥ活力。２．５ 小鼠脑组织ＨＥ染色及尼氏染色 用多聚甲醛固定液固定小鼠脑组织，组织固定好后切片，脱蜡至水，进行苏木精－伊红染色或尼氏染色、脱水封片。
２．６ 蛋白印迹法 取小鼠海马体组织加入预冷的ＲＩＰＡ裂解液（含１％ＰＭＳＦ），置于冰上进行匀浆，充分研磨后继续置于冰上裂解３０ｍｉｎ，４℃１２０００ｒ·
ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，取上清液。用１０％ＳＤＳ ＰＡＧＥ
凝胶在恒压条件下电泳后转至ＰＶＤＦ膜上，在室温下与５
％脱脂牛奶孵育２ｈ。在４℃下条带与一抗孵育过夜（Ｂａｘ１∶１０００；ｃａｓｐａｓｅ ３１∶５００；Ｇｒｉｎ１１∶１０００；β ａｃｔｉｎ１∶３０００）。１×ＴＢＳＴ洗涤３次，每次１０ｍｉｎ，并在室温下孵育二抗１ｈ。１×ＴＢＳＴ洗３
·
６６·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２３Ｊａｎ；３９（１）
次，每次１０ｍｉｎ，显影。
２．７ 统计学处理 使用ＳＰＳＳ２５ ０软件进行统计学分析。结果以均数±标准差表示。组间比较采用单因素方差分析（ＡＮＯＶＡ）。３ 结果
３．１ 红景天苷对小鼠学习记忆的影响 Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫实验是一项广泛用于研究学习记忆的方法，本文首先通过测试小鼠潜伏期及穿越平台次数研究小鼠学习记忆情况。结果如Ｆｉｇ２所示，与Ｃｏｎ组相比，
无锡博物馆Ｈｙｐ组小鼠潜伏期从ｄ３开始明显增加，穿越平台次数明显下降；与Ｈｙｐ组相比，Ｓａｌ苷组小鼠潜伏期在ｄ３开始明显降低，穿越平台次数明显增加（均Ｐ＜０ ０５），说明红景天苷可以改善高原低氧条件下小鼠的学习记忆能力。
３．２ 红景天苷对小鼠脑组织氧化应激指标的影响 高原低氧环境造成的氧化应激会对小鼠脑组织神经元造成损伤，研究结果显示，与Ｃｏｎ组比较，Ｈｙｐ组小鼠脑组织ＭＤＡ和Ｈ２Ｏ２含量明显升高，ＧＳＨ含量明显降低。与Ｈｙｐ组比较，红景天苷能降低小鼠
脑组织中ＭＤＡ和Ｈ２Ｏ２含量，提高ＧＳＨ含量及ＳＯＤ活力，表明红景天苷可以减轻氧化应激损伤（Ｐ＜０ ０１），见Ｔａｂ１。
３．３ 红景天苷对小鼠脑组织及血清神经递质的影响 乙酰胆碱（
ＡＣｈ）及谷氨酸在学习记忆过程中起重要的作用，而ＡＣｈＥ活力会直接影响乙酰胆碱的含量。本部分主要通过测定组织及血清中ＡＣｈＥ活力及谷氨酸含量等方面来进一步评价红景天苷对低氧记忆损伤的改善作用。如Ｔａｂ２所示，与Ｃｏｎ组比较，
Ｈｙｐ组小鼠脑组织和血清中乙酰胆碱酯酶活力明显升高，给予红景天苷后明显下降（Ｐ＜０ ０５或Ｐ＜０ ０１）。在Ｈｙｐ组中谷氨酸含量及谷氨酸受体（Ｇｒｉｎ１）表达明显增高，红景天苷预防给药可明显降低其含量及受体的表达（
Ｐ＜０ ０５或Ｐ＜０ ０１），如Ｆｉｇ３所示，表明红景天苷可以通过调节神经递质水平改善小鼠的记忆能力。
３．４ 红景天苷对小鼠脑组织病理变化的影响 海马体是大脑中学习记忆的重要区域，尼氏小体分布于神经细胞内，
当尼氏小体染色变淡甚至溶解消失
Ｆｉｇ２ Ｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅｏｎｍｅｍｏｒｙｄｅｆｉｃｉｔｓｉｎｍｉｃｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｉｇｈａｌｔｉｔｕｄｅｈｙｐｏｘｉａ（ｎ＝１６）
Ａ：ＲｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅｔｒａｊｅｃｔｏｒｉｅｓｄｕｒｉｎｇＭｏｒｒｉｓｗａｔｅｒｍａｚｅｔｒａｉｎｉｎｇ（ｗｉｔｈｐｌａｔｆｏｒｍ）ａｎｄｐｒｏｂｅｔｒｉａｌｓ（ｗｉｔｈｏｕｔｐｌａｔｆｏｒｍ）；Ｂ：Ｌａｔｅｎｃｙｉｎｇ；Ｃ：Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｐｌａｔｆｏｒｍｃｒｏｓｓｉｎｇ． Ｐ＜０ ０５， Ｐ＜０ ０１ｖｓＣｏｎ；＃Ｐ＜０ ０５，＃＃Ｐ＜０ ０１ｖｓＨｙｐ
Ｔａｂ１ Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅｏｎｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｄｉｃａｔｏｒｓｉｎｍｉｃｅ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
ＧｒｏｕｐＭＤＡ（ｎｍｏｌ·ｍｇｐｒｏｔ－１
）
Ｈ２Ｏ２
（ｎｍｏｌ·ｇｐｒｏｔ－１
）ＧＳＨ（ｍｇ·ｇｐｒｏｔ－１
）
ＳＯＤ（Ｕ·ｍｇｐｒｏｔ－１
）Ｃｏｎ９．５８±０．６１
２８．００±１．５７
７．２８±１．３１
１５１．２２±１０．８９
Ｈｙｐ１５．２９±１．６６
３２．３９±２．０４
５．４５±１．０３
１４８．５２±１１．５１
Ｓａｌ
１０．３９±１．３３
＃＃
２９．５６±２．１１
＃＃
７．１０±０．４２
＃＃
１６９．７６±１２．０４
＃＃ Ｐ＜０ ０１ｖｓＣｏｎ；＃＃
Ｐ＜０ ０１ｖｓＨｙｐ．
Ｔａｂ２ Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅｏｎｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓｉｎｍｉｃｅ（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
ＧｒｏｕｐＢｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ
Ｇｌｕｔａｍａｔｅ（μ
ｍｏｌ·ｇｐｒｏｔ－１
）Ａ ＣＨＥ（Ｕ·ｍｇｐｒｏｔ－１
）
Ｓｅｒｕｍ
Ｇｌｕｔａｍａｔｅ（μ
关于毕业的歌曲ｍｏｌ·Ｌ－１
）Ａ ＣＨＥ（Ｕ·ｍＬ－１
）
证券从业
Ｃｏｎ５９．２６±８．１８
０．８８±０．０６
５３．０９±５．９７
４２．８８±３．０５
Ｈｙｐ１２１．１７±５．７９ ０．９９±０．０５ １１０．９７±７．７７ ５０．２１±４．４９ Ｓａｌ
７６．４４±９．８５
＃＃０．８７±０．１７
＃５１．４５±７．８４
＃＃４５．７６±３．３０
＃ Ｐ＜０ ０５，
Ｐ＜０ ０１ｖｓＣｏｎ；＃Ｐ＜０ ０５，＃＃Ｐ＜０ ０１ｖｓＨｙｐ
·
７６·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２３Ｊａｎ；３９（１）
Ｆｉｇ３ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆＧｒｉｎ１ｉｎｍｏｕｓｅｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ
Ｐ＜０ ０５ｖｓＣｏｎ；＃Ｐ＜０ ０５ｖｓＨｙｐ
时，表明神经细胞受到损伤情况。在高原低氧条件下，小鼠脑组织神经元的结构完整性会受到影响，通过ＨＥ染色观察海马神经元结构完整性，尼氏染色进一步反映神经元功能活性。由Ｆｉｇ４可以看出，Ｃｏｎ组小鼠的海马体神经元排列整齐，结构完整，核结构清晰，未出现明显病理变化（Ｆｉｇ４Ａ ａ），海马体尼氏小体含量丰富（Ｆｉｇ４Ｂ ａ）；Ｈｙｐ组小鼠的海马体神经元结构受到损害，核固缩明显（Ｆｉｇ４Ａ ｂ），尼氏小体数量减少（Ｆｉｇ４Ｂ ｂ）；预防给予红景天苷可以缓解这些损伤（Ｆｉｇ４Ａ ｃ），增加尼氏小体数量（Ｆｉｇ４Ｂ ｃ），表明红景天苷可以缓解高原低氧对小鼠脑组织神经元的损伤。３．５ 红景天苷对小鼠海马神经元Ｂａｘ和ｃａｓｐａｓｅ ３
表达的影响 学习记忆功能障碍是由神经元受损或凋亡引起，而凋亡过程主要与Ｂｃｌ ２和ｃａｓｐａｓｅ家族相关。如Ｆｉｇ５所示，与Ｃｏｎ组比较，Ｈｙｐ组小鼠海马中Ｂａｘ和ｃａｓｐａｓｅ ３含量明显升高，给予红景天苷后明显下降（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０ ０１），结果表明中，在高原低氧条件下红景天苷可以抑制小鼠脑组织神经元的凋亡。
４ 讨论
高原低氧会导致组织氧气供应失衡，缺氧会严重损害人类的认知和学习［８］。Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫实验是一项公认通过动物行为学来研究学习记忆的方法，可以减少气味痕迹的干扰，被广泛用于空间学习和记忆的神经生物学和神经药理学研究。Ｘｕ等［９］用小鼠在Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫中潜伏期及穿越平台次数等指标研究药物对认知功能的改善作用。本研究在高原低氧下进行Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫测试，结果显示，与Ｈｙｐ组相比，Ｓａｌ组潜伏期明显减少，穿越平台次数明显增加，这些数据表明小鼠花费了更少的时间来寻找平台，并且在平台处多次探索，说明在高原低氧下红景天苷提高了小鼠的记忆能力。
低氧诱导的氧化应激是许多神经退行性疾病的病因。低氧环境下相关ＲＯＳ生成和抗氧化保护之间的不平衡会导致生物分子的氧化损伤，其中包括Ｈ
２内审员培训
Ｏ
２
等自由基。ＲＯＳ会诱导脂质氧化产生ＭＤＡ，造成脑组织神经细胞的损伤和凋亡，导致学习与记忆功能障碍［１０］。ＳＯＤ和ＧＳＨ作为抗氧化剂系统可以消除体内ＲＯＳ，对机体起到保护作用［１１］。研究结果显示，红景天苷可以减少高原低氧条件下小鼠脑
组织中ＭＤＡ、Ｈ
２
Ｏ
热冬果２
含量，提高ＧＳＨ含量及ＳＯＤ
活
Ｆｉｇ４ Ｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｉｎｍｏｕｓｅｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｓ
（Ａ）ＨＥｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｍｏｕｓｅｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ（２０×），（Ｂ）Ｎｉｓｓｌｓｔａｉｎｉｎｇｏｆｍｏｕｓｅｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅ（２０×）．ａ：Ｃｏｎｇｒｏｕｐ；ｂ：Ｈｙｐｇｒｏｕｐ；ｃ：Ｓａｌｇｒｏｕｐ·
８
６
·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２３Ｊａｎ；３９（１）
Ｆｉｇ５ ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＢａｘ
ａｎｄｃａｓｐａｓｅ３ｉｎｍｏｕｓｅｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ
Ｐ＜０ ０１ｖｓＣｏｎ；＃Ｐ＜０ ０５，＃＃
Ｐ＜０ ０１ｖｓＨｙｐ．
力，表明红景天苷可以通过减轻氧化应激损伤改善小鼠记忆能力。
乙酰胆碱和谷氨酸与神经元信息传递、营养发育和学习记忆等过程有着紧密的联系。神经递质的水平会影响神经元的功能，包括神经递质的含量及参与神经递质释放过程的分子和靶标。乙酰胆碱是与学习、记忆密切相关的重要中枢胆碱能神经递质，海马中ＡＣｈ水平的降低能够引起学习记忆障
碍［１２］，含量水平与ＡＣｈＥ活性相关。正常生理状态
下，ＡＣｈＥ能够维持ＡＣｈ含量的稳定，避免其对于突触后膜受体的过度刺激；病理条件下，ＡＣｈＥ活性的异常升高，使ＡＣｈ降解速度加快，从而造成含量显著降低，生物信号不能得到正常传导。另外，谷氨酸是人体内重要的神经递质，参与维系脑部的血液循环，调控人脑的功能；其在人体内属低水平游离氨基
酸，含量过高（细胞毒性）引起认知功能障碍［１３］。在
本研究中，红景天苷可以降低小鼠脑组织和血清中的乙酰胆碱酯酶活力及谷氨酸含量，同时降低Ｇｒｉｎ１的表达，表明红景天苷可能通过调节神经递质水平改善小鼠记忆能力。
海马体是大脑中学习和记忆的重要区域，因此
海马神经元的结构和功能备受关注［１４］。有研究表
明，急性高原缺氧下大鼠海马体严重受损，锥体细胞
数量减少，色酸性凝结和神经变性［１５－１６］
。病理实验
结果表明，高原低氧条件下小鼠海马体的神经元紊乱变性甚至凋亡，给予红景天苷可以缓解神经元的损伤。缺氧环境会增加海马体中ｃａｓｐａｓｅ ３表达的
增加并诱导海马神经元的凋亡［１７－１８］。本研究结果
显示，红景天苷可以减少促凋亡因子Ｂａｘ及ｃａｓｐａｓｅ ３的表达，
表明红景天苷可以抑制神经元凋亡，保护海马神经元免受急性高原缺氧损伤。
综上所述，高原低氧条件下红景天苷可以通过减少氧化应激损伤／调节神经递质水平以及抑制神经元凋亡来减轻急性缺氧诱导的记忆障碍。因此，本研究为将红景天苷作为改善急性高原低氧下认知障碍的潜在治疗药物提供了理论基础。参考文献：
［１］ ＺｈａｎｇＸＹ，ＺｈａｎｇＸＪ，ＸｖＪ，ｅｔａｌ．Ｃｒｏｃｉｎａｔｔｅｎｕａｔｅｓａｃｕｔｅｈｙｐｏ
ｂａｒｉｃｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｅｄｃｏｇｎｉｔｉｖｅｄｅｆｉｃｉｔｓｏｆｒａｔｓ
［Ｊ］．ＥｕｒＪＰｈａｒｍａ ｃｏｌ，２０１８，８１８：３００－５．
［２］高 蕾，李方明，马海林，等．长期高海拔暴露对高原移居大
学生睡眠质量的影响［Ｊ］．高原科学研究，２０２１，５（１）：４９－５５．
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９６·中国药理学通报 ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ ２０２
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