可惜我不是水瓶座陕西中医学院硕士学位论文太白蓼质量标准研究姓名：邸云龙申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：郭耀武20100401 摘要目的 1.通过对陕西秦岭太白山所产的太白蓼的实验研究，初步确定太白蓼的质量标准，为太白蓼药材的合理开发与应用提供科学依据。2利用高效液相色谱法建立太白蓼中绿原酸含量测定方法。
曲奇做法3.以绿原酸为参照物运用高效液相色谱法建立太白廖醇提物的指纹图谱，旨为建立完整质量标准提供可靠依据。方法1.运用生药学鉴定方法、采用《中国药典》2005 版所载水分测定法、灰分测定法、浸出物测定法、薄层色谱法、和高效液相色谱法，对太白蓼的生药来源、性状、显微特征、理化特性进行描述，并对太白蓼药材的水分、灰分、浸出物的含量进行测定；运用薄层色谱法和高效液相色谱法对太白蓼药材进行进一步的定性和定量研究。2. 采用高效液相色谱法建立不同产地太白廖药材指纹图谱。结果 1.水分含量均值为9.66％，总灰分含量均值为10.16％，水醇溶性浸出物均值为19.46％绿原酸平均含量为0.1402％，鞣质平均含量为11.9％。2.不同产地的太白蓼药材指纹图谱的共有峰基本一致，但指纹图谱相似度大小与其产地有关，主要为特征峰的相对含量分布存在差异。结论1.制定了能够有效控制太白蓼质量的质量标准。2.指纹图谱方法重现性高所测组分均达到基线分离可作为太白廖的指纹图谱评价提供依据。关键词：太白蓼；质量标准；指纹图谱Study of Quality Standards on the Polygonum taipaishanen Kung AbstractObjectives:1.Through the study of the Polygonum taipaishanenKung.PTKwhich mostly growth in the Taibai Mountain of Shaanxiwe haveEstablished th
e preliminary quality standards for it.And the resultprovides the scientific foundation for rational utilization of the PTK.2. Objective to determine the content of chlorogenic acid in Polygonumtaipaishanen Kung. from different places in shaanxi by HPLC.3. Withchlorogenic acid as the reference substance we ud HPLC to establishfingerprint chromatograp for ethanol extraction of Polygonumtaipaishanen Kung.Methods:1.By the methods of Pharmacognosy identification determinationof extractives ash content test determination of moisture as well asthe methods of ultraviolet spectrophtom eter TLC HPLC we obrved theoriginthe character of pharmacognostic the microscopical charactersand physico-chemical characters the water content the ash content ofthe Polygonum taipaishanen Kung.. Finally we established a method forqualitative and quantitative analysis of the major activecomponent-isoiperatorin in the PTK.2.Establish fingerprint chromatograpfor ethanol extraction of Polygonum taipaishanen Kung. by HPLC.Result:1. The average content of water total ash chlorogenic acid totaltannins were 9.66 ％10.16 ％，
19.46 ％0.1402 ％and 11.9 ％.2.Thesimilarity was correlated with the habitat of the herb.the content of eachpeak showed great difference among the sampleswhich resulted in thedifferences on their chromatograms.Conclusion: 1.The establishes methods can be ud for the quality controlof the PT
K.2. This method shows high precisiongood repeatability and allof the contents are parated wellso it can be ud as the means to asssthe quality of PTK .Keywords: Polygonum taipaishanen Kung.Quality standard Fingerprint Author: Tutor: 陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全
doberman意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名＿＿＿＿＿日期：2010 年 4 月20 日关于学位论文使用授权的声明陕西中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿日期：年月日论文导师签名＿＿＿＿＿日期：年月日太白蓼质量标准研究引言1 选题的立题依据中药是我国历史文化传承的重要组成部分，是我国传统医学经过长期医疗实践的科学总结，历经数千年，对中华民族的繁衍和强大做出了不朽的贡献。随着欧美日等国对天然药物的研究深入，中药这一世界上保存最完好的传统天然药物体系正日益受到世界各国医药学家的关注与重
视。随着中药的临床治疗作用在国际上逐步得到广泛的认可，我国的一些中药制成品也成功的打入了国际市场，但我国在世界上天然药物的市场份额占有率却很低，还不及日本，韩国等国家，而且很多中药是以保健品的形式进入欧美等国际市场的。归其原因，是中药药源品种质量、有效成分的稳定性、农残和有害元素残留量等问题制约了我国中药制品在国际上的竞争力。加之随着自然环境改变，用药量的增加等原因，野生中药材资源日益匮乏，无法满足当今市场的需要，因此中药材人工栽培的规模化、规范化以成为制约中药现代化的关键点，而中药材产品的质量的稳定则成为中药饮片、中成药质量的稳定的前提条件。因此只有规范中药材生产的全过程，建立完善的质量标准体系，才能保证中药材产品质量的安全、稳定、可靠、可控。2 选题的目的与意义太白蓼蓼科植物太白蓼Polygonum taipaishanen Kung.为秦岭特有物种以根茎入药在民间较为广泛应用的
基础，药材商品名有“盘龙七”一说具有收敛、止血的功效，主治痢疾、血崩、白带、吐血、外伤出血等有较好的疗效，在工业化生产中如盘龙七片（酒）、止泻颗粒等制剂中也有较大的使用量。由于近年来采挖量较大，野生资源急剧减少，为了缓解资源枯竭，现已进行人工种植实验。迄今为止，太白蓼尚未有法定的药材质量标准，人工种植范围和规模都处于探索阶段，生产、流通及监管部门无法控制其质量。本课题为太白蓼药用资源的基础性研究，通过太白蓼植物标本的采集及资源调查，鉴定基源，掌握太白蓼的生产应用情况，研究其生态、生药、化学特征，建立其鉴别项目和含量测定指标，制订出科学、规范、可控的质量标准，对于太白蓼的正本清源、野生资源的保护、合理采集、品种繁愿为市鞍马
育、正确使用，以及规范监管，有积极意义。 1 陕西中医学院2010 届硕士学位论文3 秦岭地区药用资源概况秦岭横贯中国中部的东西走向山脉。西起甘肃南部，经陕西西部到河南西部，为黄河支流渭河与长江支流嘉陵江、汉水的分水岭。陕西境内的东秦岭山脉走向为正东西向，褶皱紧密，山体硕大，谷地窄小，山地平均高度2000 3000ｍ左右。主峰太白山海拔3767ｍ，为中国东部超过3000ｍ的少数山峰之一，此环境适合多种药用植物的生长，素有“亚洲植物园”之称。本课题所选定研究材料为太白蓼Polygonum taipaishanen Kung．的根茎，别名为大红粉，为陕西特有的中草药资源之一1～2，具收敛、止血、抗菌等功效，民间主要用于治疗痢疾、腹泻、肠风下血、崩漏、白带、吐血、外伤出血3，也是盘龙七片的主要原料之一。太白蓼为陕西独有品种，植物资源主要分布于秦岭太白山上，如眉县、佛坪、太白县、秦岭牛背梁、太平国家森林公园等。
安全学习培训生长在海拔2500～3200m的林中草地或高山草坡上4。4蓼科蓼属植物研究进展蓼科Polygonaceae蓼属Polygonum为一年生或多年生草本植物，在我国有120种，28个变种5，分布与全国各地。本属以何首乌、虎杖、扁蓄等为代表，大约有80种左右为民间和临床上常用的中草药，具有清热利尿、解毒、杀虫等作用，多做祛风湿药、利尿药和杀虫药。其中虎杖、何首乌、拳参、红蓼、扁蓄和蓼蓝等6种中草药入选中国药典。蓼属植物的化学成分蓼属植物的成分复杂，主要为黄酮和黄酮苷类化合物、蒽醌类化合物、萜类、木脂素类、二苯乙烯类化合物和其他类型化合物。黄酮和黄酮苷类化合物。如：王嗣雷6等从圆穗蓼全草的70丙酮提取物中分离出（-）-表儿茶素-5-0-β-D-吡喃葡萄糖苷、-儿茶素-7-0-
β-D-吡喃葡萄糖苷和（-）-表儿茶素。李勇军7等对头花蓼P.capitatum Ham exD.Don.采用硅胶和聚酰胺柱层析，分离出槲皮苷、陆地棉苷、槲皮素-3-O-2″-没食子酰基-鼠李糖苷。Gao Liming8等从头花蓼中分离鉴定出一种新的黄酮类化合物：3′，4′-亚甲二氧基-356785′-六甲氧基黄酮。确生等9从甘肃天祝县采集的蝎子七全草中分离鉴定出了紫丁香甙、582-三羟基-5-甲氧基双氢黄酮、异鼠李素、槲皮素-3-O-鼠李素、山奈素-3-O-β-D-葡萄糖甙、洋芥素-7-O-β-D-葡萄糖甙、5-羟基-4-甲氧基黄酮-7-β-D-芸香甙；两个新物质为2 太白蓼质量标准研究viviparum A和viviparum B10。郑旭东11等从甘肃庆阳产中草药乌蓼P.avicular L.中首次分离得到了5个黄酮类化合物：57-二羟基-67-二甲氧基黄酮、57-二羟基黄酮、57-二甲氧基-4′-羟基黄酮、桑色素-7-7-O-β-D-葡萄糖甙、5-羟基-3′-甲氧基双氢黄酮-7-O-芸香糖甙。Kim等12～13从扁蓄中分离出Avicularin、Astragalin、Betmidin、Juglanin 、和5，6，7，4′-四甲氧基黄酮。8个花色素类化合物从P.coriarium的根茎中提取分离出来，分别为:--表焙儿茶素、--表焙儿茶素没食子酸盐和--表儿茶酸的二聚体、三聚体、四聚物、低聚物等14～15和两个花青甙16。Datta等17从箭叶蓼中分离出Hyperoside、Rhamnocitrin、Onysilin。Hiroyuki等18报道水蓼水溶性组分离出7，4-二甲基槲皮素、3′-甲氧基槲皮素、槲皮素、异槲皮苷；Yagi等19从水蓼中分离出3种亲水性黄酮类化合物，分别为：3-磺酸基槲皮素、37-二磺酸基异鼠李素和7-磺酸基怪柳素-3-葡萄糖苷。蒽醌类化合物。许纪福20从藏药木茎蓼P.oubrtii L.Henrry中分离出大黄素、大黄素葡萄糖甙。戚欢阳等21从毛脉蓼P.cillinene中分离出大黄素-6-甲醚，6-羟基芦荟大黄素，大黄素-8-β-D一葡萄糖苷，大黄素-6-甲醚-8-β-D-葡萄糖昔。人们从何首乌和虎杖中还分离得到了大黄素-1-O-葡萄糖甙、大黄素-1，6-
二甲醚、1，4-二轻基蕙醒、15-二羟基蒽醌、1，5-二羟基蒽醌、26-二羟基蒽醌、大黄酸、蒽醌、茜素、茜素二甲醚、Sennoside A、Sennoside B、大黄素三甲醚、大黄素-8-O-葡萄糖甙、芦荟大黄素-1-O-葡萄糖甙等22～24。甾类化合物。陈耀祖等25从藏药木茎蓼P.oubrtii L.Henrry中分出β-谷甾醇、4-豆甾醇-3-酮、3-羟基-5-豆甾醇-7-酮。戚欢阳等21从毛脉蓼P.illinene分离出了β-谷甾醇和胡罗卜苷。Tsai等26从火炭母的叶子中分离到25R-螺甾烷-4-烯-23，12-二酮、豆甾-4-烯-3，6-二酮和豆甾烷-3，6-二酮街类化合物。萜类化合物。Datta等17～19从香蓼的地上部分分离出五个倍半菇类化合物，分别为: Viscosumie acid、Viozulenic acid、Viscoazueine、Viscoazulone、Viscoaz usone。Jacobsson等27从P.glabrum中分离出4个具有典型drimane骨架的倍半萜化合物，这4个化合物都是2，3位两个轻基的梭羧酸酯化物。Yoshiyasu等28从辣蓼中分离出一系列具有倍半萜类化合物的醛，如：以蓼二醛、异水蓼二醛、沃伯格醛、缩蓼二醛、异水蓼醛内酷、倍半萜单醛等化合物。芪类和芪苷类合物。戚欢阳新古典增长理论
等21从毛脉蓼P. illinene中分离出白黎芦醇，白黎芦醇苷，白黎芦醇-3-O-β-D-2′-O-
肉桂酰葡萄糖苷，白藜芦醇-3-O-β-D- 2′-O-没食子3 陕西中医学院2010 届硕士学位论文酸葡萄糖苷。从何首乌中分离出3个二苯乙烯类似物，分别为：2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-23-β-O-二糖甙何首乌丙素、2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-葡萄糖甙、E-2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-葡萄糖甙。Xiao Kai等从虎杖中分离出10个二苯乙烯苷的硫酸钾、钠盐的化合物。另外还从虎杖中分离出Piceid
、R-白藜芦醇、R-白藜芦醇-3-O-葡萄糖甙、R-白藜芦醇-4′-O-葡萄糖甙、1-3′5′-二羟基苯基-2-4″-羟基苯基乙烷-1，21二醇、Pieeatannol glucoside。其他化合物。陈耀祖等25从藏药木茎蓼P.aubrtii L、Henrry中分出正丁基山梨糖甙、2，4-二苯基吡咯、二十四碳酸。Ihsan等29从柳叶蓼的变种P.salicifolium Sib.中分离出3R-O-β-D-吡喃葡糖氧基-5-苯
戊酸，3R-O-β-D-吡喃葡糖氧基-5-苯戊酸正丁酷。王嗣雷等6从圆穗蓼全草的70丙酮提取物中分出：1-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-45-二轻基苯基乙酮，绿原酸，没食子酸。张彩霞等30从青海大通县采集的珠芽蓼全草中分离得到了6-O-没食子酞熊果苷。Duwiejua等31从拳参中分离得到的无羁萜醇和5-粘霉烯-3-酮。从P.glabrum中分到了四个新的23-二羟基异补身醇二酯类化合物。周立新等32从何首乌乙酸乙醋不溶的部分分离出一个新物质，命名为何首乌乙素。Takasaki等33～34从酸模叶蓼中分到了5个化合物，分别为:Lapathoside A、LapathosideB、Lapathoside C、Lapathoside D、Hydropiperoside Vanicoside C。Brown等35和Sneden等36从P.pensylvanicum中分离出6个糖酯类化合物，分别为: Vanicoside A、VanicosideB、Vanicoside C、Vanicoside D、Vanieoside E、和Vanieoside F。蓼属植物的生物活性。蓼属植物药理活性主要表现在抗菌、抑菌活性，消炎止痛，抗肿瘤，抗癌等。Kazmi37等发现P.equitiforme的粗提取和纯物质均有抑菌活性，二者对20个细菌和17个真菌具有生物活性。水蓼茎叶中含有的鞣质对痢疾杆菌有一定的抑制作用，它的水提物对部分革兰氏阴性菌有一定的抑菌活性。P.glabrum和P.bistorta等其他同属植物的抗菌、抗真菌、抗炎也有报道38。谭苹39等
通过将40种民间秦岭药制成100的生药原液，以不同的稀释度与11种标准菌株共同培养，以传统抗菌中药黄连作为对照组，观察其抑菌作用，发现蓼属部分植物表现出良好的抗菌活性，马振亚40等对由蝎子七、鲜红草及甘草组成的止痢丸进行研究，发现对痢疾杆菌对61株各型痢疾杆菌均有不同程度的抗菌活性。冯桂华41用珠芽蓼和马齿苋等中药，配制成10的糖浆，对110例小儿泻泄进行了临床治疗，60例痊愈，34例好转，总有效率为85.8，其药方具有清热止泻功能，对湿热型、食伤型、脾虚型效果更好，而且未出现不良的反应。香蓼中含有的四个倍半萜类化和物viscosumic acid，viscoxulenic 4 太白蓼质量标准研究acid和viscoazucine均有一定的抗炎活性，和良好的止痛作用42。戚欢阳等21采用最低抑菌浓度Mxe对毛脉蓼不同提取部位和单体化合物进行了抑菌活性筛选，结果表明，乙酸乙酯提取物的抑菌活性最强，该部位分离得到的化合物大黄素、大黄素-8-β-D-葡萄糖苷、大黄素-6-甲醚-8-β-D-葡萄糖苷、白藜芦醇和白黎藜芦醇苷对各种类型的菌株均有较好的抑菌活性。任光友等43以动物实验对头花蓼进行了抑菌实验，结果发现其水提物能明显减少大肠杆菌造成的大鼠肾孟肾炎模型尿中白细胞数量WBC和隐血的作用BLD；显著降低大肠杆菌感染小鼠的死亡率；给药后的动物尿液在体外仍能明显地抑制大肠杆菌的生长；同时发现头花蓼对伤寒副伤寒菌引起的体温上升有缓解作用。徐英春等44采用琼脂稀释法研究了头花蓼对10株淋病奈瑟球菌的体外抑菌活性，结
珍惜图片果表明头花蓼对淋病球菌有抑菌活性。物虎杖、拳参、荭草、杠板归中分离出来的牡荆素和东方蓼黄素对某些动物有抗癌活性45～46。巩忠福扬国林47综述了蓼属植物普遍具有杀虫，抗微生物，抗氧化，
蚕宝宝的一生
一些品种也具有抗肿瘤作用。张杰等48采用头花蓼单方制剂――热淋清颗粒对89 例泌尿系结石患者进行疗效观察，结果总有效率为82，特别是对直径小于0.5cm 的结石，总有效率达78。这表明热淋清颗粒头花蓼对泌尿系统结石的疗效确切，具有较好的排石作用。俞建军等49和徐文欣50报道了热淋清颗粒对尿路感染有显著的辅助治疗效果，它能与诺氟沙星产生协同作用，明显缩短尿路感染症状、体症的消失时间，并能提高细菌清除率，治愈率达83.3，有效率达93.3。蓼属植物大多具有杀虫、昆虫拒食、驱避以及抗菌等活性，如：花蓼、水萝、辣蓼、桃叶蓼、杠板归等。水蓼的提取物有较好的昆虫拒食活性51。5 太白蓼本草考证太白蓼为蓼科（Polygonaceae ）蓼属（Polygonum ）植物太白蓼Polygonumtaipaishanens Kung．的根茎。太白蓼原植物由我国近代著名植物学家孔宪武首次发现并命名。和珠牙蓼、圆穗蓼一起作为蝎子七品种之一收录在《中华本草》中，并注明为陕西独有52。根据记载甘肃、四川等临近省也未发现53～54。杨永建等55其品种确定问题还有待进一步研究。本品在古代文献本草中未见记载，作为蝎子七始见于《植物明实图考》中石草类，名为“石风丹”，书中描述如下：“生大理府。似石韦有茎，稍开青花，作穗如狗尾草……盖亦草血竭一类。”其中描述与太白蓼较相似56。5 陕西中医学院2010 届硕士学位论文6 太白蓼植物形态研究太白蓼多年生草本，高10～40cm。根茎粗，肥厚，下部上卷，状如蝎子；茎直立，不分枝，细弱，常有2～3 个由根茎生出，根生叶与茎下部叶具长柄，叶柄上部有狭翅；叶片长圆形，长8～20cm，宽2～3.3cm先端渐尖或钝头，基部截形或近圆形，边缘叶脉增厚，略反卷，革质，两面无毛，稀有白柔毛；茎生叶较小，披针形，无柄；托叶鞘长圆筒状，膜质，棕褐色，先端斜形；总状花序成穗状，花穗圆柱形，顶生，长达4cm
花密生；苞膜质，淡褐色，广卵形，锐尖，不生珠芽；花被 5 裂，裂片广椭圆形或近倒卵形，白色或粉红色；雄蕊8，花药暗紫色；花柱3，瘦果三棱状卵形，长2.5～3mm，深棕色，有光泽。花期5～6 月，果期7～8 月。药材形状：太白蓼药材根茎呈扁圆柱形，稍弯曲，状似蝎子。长3～15cm，直径0.5～3cm。外表粗糙成紫褐色。环节较明显，有横皱纹，常残留紫黑色细小须根。质地坚硬，脆而易折断。断面呈棕红色，颗粒状，维管束类白色22～32 个，呈环状排列。气微，味苦、涩53。7 太白蓼化学成分研究梁波，李宝林57采用水蒸气蒸馏的方法提取太白蓼挥发油，运用气相色谱-质谱联用技术GC-MS对其化学成分进行鉴定，通过NIST 质谱库检索，鉴定了其中的13个化合物，运用峰面积归一法确定各个组分的含量。张为民，赵宝玉58采用经典试管反应法结合滤纸法，对太白蓼化学成分进行系统预试验。得出太白蓼中含有糖、多糖及其甙类皂甙，强心甙，酚类和鞣质，黄酮类，香豆素与萜类内酯化合物及蒽醌类。不含有蛋白质、氨基酸或多肽，生物碱，挥发油和油脂，甾体及萜类和氰甙。鞣质类型为可水解鞣质。太白蓼石油醚漫提物经GC-MS 分析，共鉴定出9 种化合物，主要含有酸和酯，其中912-十八碳二烯酸乙酯含量最高，相对含量为37.648；油酸乙酯，相对含量为24.943。李映丽等59采用《中国药典》1990 年版鞣质含量测定法即皮粉法对太白蓼进行了鞣质含量测定，其中含鞣质11.3％。8 太白蓼药理方面研究张为民等60采用细胞病变法和MTT 法测定太白蓼提取物对NDV 在鸡胚成纤维细胞（CEF）上增殖的影
