血氨检测影响因素的研究进展
张松鹤
张松鹤，，苗素亚
北京大学第一医院检验科，北京100034
摘要血氨检测作为临床中常见类蛋白质代谢物检测的项目，因为现阶段临床中血氨检测标本量相对比较少，而且影响血氨检测的因素较多。若是对检测人员培训不得当，将会造成检测的结果准确性和差异性比较大，会对临床的诊疗工作造成严重影响。基于此，本文将分析血氨检测的影响因素，进而提升检测质量。
关键词血氨检测；影响因素；研究进展
中图分类号R446文献标志码A doi10.11966/j.issn.2095-994X.2022.08.09.49
Rearch Progress on Influencing Factors of Blood Ammonia Detection
ZHANG Songhe,MIAO Suya
Department of Laboratory Medicine,Peking University First Hospital,Beijing,100034China
Abstract Blood ammonia detection is a common clinical item of protein metabolite detection.Becau the amount of blood ammonia detection samples in clinical practice is relatively small at this stage,and there are many factors that affect blood ammonia detection.If the testing per‐sonnel are not properly trained,the accuracy and variability of the testing results will be relatively large,which will riously affect the clini‐cal diagnosis and treatment work.Bad on this,this paper will analyze the influencing factors of blood ammonia detection,and then improve the detection quality.
Key words Blood ammonia detection;Influencing factors;Rearch progress
机体中血氨的含量非常少，氨作为蛋白质代谢环节中由氨基酸脱氨基合成，而后进入门静脉内，再次进入血液循环中[1]。因为肝脏可高效地清除肠道中的氨，在肝脏器官内转变成为尿素抑或是其他类别的氮化合物，最后从肾脏器官排泄出体外[2]。所以，氨于四周动脉血液内浓度较低。肝脏功能的损伤抑或是爆发性质的肝炎，便秘、胃肠出血、过量氨、遗传性质的尿素循环异常以及Reyes综合征等都会造成血氨的浓度增高[3]。对此，检测血氨指标，可对重度肝硬化、肝炎和肝性脑病进行诊断，更是反映肝昏迷、Reyes综合征等诊断的关键标志[4]。因为现阶段临床中影响血氨检测的因素众多，若是对检测技术人员培训不到位，将会造成检测的结果存在较大的差异性，精准性不足，使得临床的诊断和治疗受到较大的影响[5]。1检测方式影响因素
1.1离子交换法
该种方式的精密度、特异度和准确度相对比较高，但是操作较为繁琐和复杂，导致临床中检测质量受到较大的影响[6]。
1.2离子选择电极法
该种方式的精密度和精准度比较高，但是其会受到电极稳定性等多种因素的制约与影响，在临床中难以普及与运用，需不断地深入研究[7]。
1.3谷氨酸脱氢酶法
伴随着生化分析仪设备的使用、普及，该种方式已然成为临床中检测血氨的首要方式，该种方式所用标本的用量比较少、特异性比较高以及操作较为迅速[8]。
*综述*
收稿日期：2022-07-08；修回日期：2022-07-29
作者简介：张松鹤（1983-），男，本科，主管技师，研究方向为医学检验。
目前，一般会运用液体双试剂，于R1内填入少许、适量
的乳酸脱氢酶，把血浆内干扰氨测定的丙酮酸在预反应过程中除掉，而后在氨充足，谷氨酸脱氢酶作用之下，和大量的NAD(P)H 、ax-酮戊二酸反应[9]。在一定的状态之下，340nm 吸光度下降和标本内血氨浓度明显呈正比例。经过和相同样本处理标准液进行对比，可精准地计算出标本内氨含量。试剂盒内填入适量的非离子表面活性剂，可减少脂类对检测造成的干扰，填入较少剂量的乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)可防止金属性离子干扰进而提升试剂所具有的稳定性[10]。加入适量的蛋白质保护剂，提升酶所具有的稳定性。但于实际工作中了解到，酶法检测的结构所具有的重复性相对比较差，可能和标本内血氨的含量较低等因素有关。很容易被仪器携带污染和环境等各种因素干扰。对此，在做好质控、定标和标本检测之前，需对试剂加样针、反应杯等实施特殊性清洗，不宜和其他的检测项目一同检测[11]。
1.4干化学法
干化学法检测血氨时，标本的加样之后都会在同一张干片内进行反应，还可经过分布层将大分子的物质干扰去除，血浆内氨经过半透膜可到达氨指示剂、指示层出现反应，而后呈现出明显的深蓝色，颜
色的深浅度和标本内氨含量将会呈现出正比例，而后经过反射光度计对检测的反射光精准地计算[12]。
该种方式并不需要将试剂加样系统、管道系统和特定的反应杯，亦不需实施离子水冲洗，进而有效规避出现交叉污染问题，加之，该种检测方式反应速度相对比较快、操作较为便捷，作为临床中血氨的检验的重要方式之一[13]。但是，试剂的干片很容易受潮，光源不稳定、样本的加氧位置不够准确等各种因素都会造成检测结果不够准确，能够运用下面几点操作降低误差：血氨的检测标本数量比较少，可把试剂干片做成小包装，在上机之后运用时间不可超出5d ；定期地对干片的储藏盒中放入干燥剂，规避干片受潮[14]
；定期地对设备实施保养和维护，检查和调整标本的加样枪头，继而保障设备检测结果具有重复性；还需定期地更换光源，适宜地矫正光路，在矫正光路之后，需重新地定标仪器中全部的检测项目[15]。
1.5微量扩散法
充电口接触不良怎么办该种方式检测原来和干化学法一致，根据单波长的反射法检测纸内氨指示剂以及暗反应之后颜色深浅，对血氨含量进行计算[16]。
放烟花的英语孙俊艳等[17]学者认为，在检测的过程中，标本使用剂量少，而且不需要预先地分离血浆，可运用末梢血，该种方式的操作较为便捷、迅速[18]。试纸条独立包装，
很容易管理。加之，该种方法设备经常采用普通的电池驱动，其较为小巧比较容易携带，还可消除放置时间影响因素、标本运输影响因素和存储温度影响因素对检测结果造成的影响[19]。
所以，此种方式受到临床广泛认可，比较适用于即时检验(point-of-care testing,POCT)床旁检测，已然变成急诊患者血氨检测中的关键性手段之一[20]。
2标本质量影响因素2.1抗凝剂的影响
血液凝固时，会使得氨检测的数据结果明显升高，对此需规避直接运用血清当做标本[21]。临床中一般运用抗凝剂包含：EDTA 、枸橼酸钠和氟化钠。宋霞[22]学者认为，EDTA 与枸橼酸钠经过和血液内钙离子形成比较稳定的螯合物，进而又阻断血液的凝固，但由于运用枸橼酸钠实施抗凝的过程中，抗凝剂会不断地释放氢离子(H +)，引发红细胞出现形态上的改变，从而引发细胞膜所具有的通透性明显变化，造成红细胞中氨进入到血浆内，引发检测的结果明显增多。所以，血氨的检测
中标本不适宜运用枸橼酸钠抗凝；肝素需通过对凝固酶、抗凝血活酶的形成、活动进行改变，从而抑制腺苷酸脱氨酶，降低血氨的形成。运用氟化钠抗凝剂进行抗凝处理时，可抑制检测的结果明显增加，不宜正常使用。
对此，在对血氨进行检测的过程中，国外一般运用EDTA 进行抗凝，而国内一般运用肝素进行抗凝。在运用肝素进行抗凝的过程中，由于其为一类酸性黏多糖，隶属一类阴离子多聚电解质，与阳离子相比较，亲和力有所不同，和氨存在聚合作用，导致血氨的检测数据指标偏低[23]。
2.2标本状态的影响
2.2.1高胆红素运用谷氨酸脱氢酶法亦或是干化学法对
血氨进行检测的过程中，标本内浓度比较高的胆红素将吸收光波，而检验中反射光、吸收度出现变化将会对检测的结果造成较大的影响[24]。加之，胆红素通过加氧酶作用之后，会生成胆绿素，而后经过还原酶的作用，在生成间接胆红素时，会提供至少两个H +，继而发挥出抗氧化功效。其若是大量地存在，将会对氧化反应造成一定的影响，干扰血氨检测。
2.2.2溶血一般状况下，机体血液内氨于肝脏代谢作用
之下，血浆内氨含量会处于低水平，红细胞中存在大量γ-谷氨酰氨基转移酶与谷氨酸氨基转移酶，所有酶将会在红细胞中促使氨基酸脱氨产出比较多的血氨，致使红细胞中血氨的浓度为血浆内血氨浓度的23倍左右。若标本出现溶血，会导致检测的结果明显升高，而
后伴随着溶血程度不断严重，检测结果将会明显地增加。对此，对采集标本时，需保障操作规范合理，
在实施混匀时，需确保动作轻柔，规避检测结果发现假性增高问题[25]。
2.2.3脂血脂血的标本血浆内水分将会被不可溶类脂浊微粒取代，对大部分成分产出负干扰，使得血浆内被检测的物质不均匀分布，明显增加检测时随机误差，进而明显干扰血氨检测。而且脂浊对于光线有明显的散射作用，将会对吸光度造成正干扰，从而对谷氨酸脱氢酶法检测造成一定的影响[26]。为了能够降低脂血会对检测结果产生的一定影响，可加盖密封脂浊血浆，而后开展离心操作，取出下层血浆，实施检测。
2.3标本运输
标本运输、、保存的影响
2.3.1标本运输在采集标本之后，血浆内谷氨酰酶、多肽等就会在谷氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰氨基转移酶作用之下，水解后释放氨，就算是存储于1℃的地方，放置时间超出15min，也会导致血氨浓度的增加[27]。在25min时，血氨浓度增加的速度将会为0.017µg/(min·mL)血液。而且一旦标本放置时间过长，红细胞中氨也会逐步地释放进血液内，造成血氨浓度明显增加。对此，在采集标本之后需要标明相关的采集时间，而后垂直地放置于冰水内送入检验科。在检验的过程中需避免剧烈震荡标本。大多数医院在开展实际检验时，标本依旧运用人工运输的模式开展送检，有许多的标本并没有置于冰水内，这就需要医生充分地考虑到放置温度以及时间等各种因素，会对血氨检查结果造成的影响[28]。
伴随着气动物流传输技术的不断发展与成熟，大部分医院检验科室中标本运输已然从人工运输方式转变成了气动物流传输系统运送方式。在采样之后几分钟之内就可将样本送入到实验室中，可有效地降低标本放置温度与时间，对检测结果造成的负面影响，还需在传输通中放置适量的海绵和泡沫对标本实施抗震和固定处理，适量地降低成熟的速度，保障检验的精准性[29]。
2.3.2标本保存检验科在收到样本之后需要立刻开展低温离心分离操作，分离出缺乏血小板的血浆，于采样结束后30min内完成相的检验操作。若是不能够及时地检验，需要把血浆中所吸出的物质密封于4℃左右的冰箱内存储，更需在2h之内完成相关的检验操作。或存储在-20℃的温箱中保存24h内完成相关的操作。
3质控品
租房合同范本免费下载质控品、、校验品存储影响因素
因为不同实验室检测的数据结果差异性比较大，可能和校准品的确切性和稳定性有所关联。主要是因为校验品将会在存储时自动溢出氨，速度和所含氨浓度将呈现出正比例的关系。对此，需要将适宜的、低浓度的氨标准液放置于4℃的冰箱内密封存储。在校准的过程中，需要从冰箱中轻轻地混匀取出适量的样本，而后立刻地将其密封于冰箱内保存。质控品的存储也存有上述问题，需要相关检测人员不断地加强对质控品和校准品的管理和控制，将稳定性因素考虑其中。
对美的认识和感悟
4环境因素
4.1环境实验室
空气内氨作为造成标本污染的主要因素，为了可以降低器皿和标本，受到空气内氨污染，需要保障实验室较优的中空气质量，严格禁止和限制人员出入，在运用试剂之前需要经过严格特殊的清洗。
开发方案4.2药物
常见的药物对血氨的检测并没有影响，但是患者在接受治疗时运用的英脱利匹特注射液以及头孢西丁注射液会导致血压浓度出现变化。这就需要医生在分析结果时重点了解，然后给予确切的诊断结果[30]。4.3吸烟
吸烟将会对血氨检测造成一定的影响，在采血之前吸入一支烟或1h之前吸入血液都会导致机体的血氨浓度上升。所以，在采集血氨标本之前，需叮嘱患者前1d午夜之后做到严格禁烟，在分析结果时更需要关注患者是否有吸烟史。
综上所述，为了可以保障临床中血氨检测结果更可靠和真实，需从检测方式、标本质量、质控品、校验品存储以及环境因素等因素入手，切实地降低各种因素对检测造成的影响，更需积极探索其他的影响性因素，为临床提供更为重要的检测信息。
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