一、OTU分类和统计
OTU(operationaltaxonomicunits)是在系统发生学研究或群体遗传学研究中,为了便于进行分析,人为给某一个分类单元(品系,种,属,分组等)设置的同一标志。通常按照97%的相似性阈值将序列划分为不同的OTU,每一个OTU通常被视为一个微生物物种。相似性小于97%就可以认为属于不同的种,相似性小于93%-95%,可以认为属于不同的属。样品中的微生物多样性和不同微生物的丰度都是基于对OTU的分析。
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Coverage是指各样品文库的覆盖率,其数值越高,则样本中序列没有被测出的概率越低。该指数实际反映了本次测序结果是否代表样本的真实情况。
计算公式为:C=1-n1/N其中n1=只含有一条序列的OTU的数目;N=抽样中出现的总的序列数目。
征婚电话联系分类水平统计表主要是对每个样本在分类学水平上的数量进行统计,并且在表格中列出了在每个分类学水平上的物种数目(只显示前10个样本,如果样本超过10个,请查看结果中文件)
其中SampleName表示样本名称;Phylum表示分类到门的OTU数量;Class表示分类到纲的OTU数量;Order表示分类到目的OTU数量;Family表示分类到科的OTU数量;Genus表示分类到属的OTU数量;Species表示分类到种的OTU数量。
齐楚嫣二、生物信息分析
1.数据统计分析
1)有效测序数据统计
2)可供精准分析的数据统计
2.数据回归样品国家线公布时间
1)根据tag信息将测序数据回归各自样品
3.单样品微生物种类及丰度分析
治疗干咳的有效方法1)序列聚类OTU(OperationalTaxonomicUnits)
2)取样深度判定(RarefactionCurve)
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3)计算菌群多样性和丰度指数
4)单样品群落结构分析
4.多样品间比较分析
1)全样品相似度比对
快速识字2)多样品OTU比较
3)多样品群落结构分析
4)PCA(Principalcomponentanalysis)分析
5)WeightedunifracPCA分析
6)组间显著性差异分析
三、16SrRNA
为核糖体的RNA的一个亚基,16SrDNA就是编码该亚基的基因。细菌rRNA(核糖体RNA)按沉降系数分为3种,分别为5S、16S和23SrRNA。16SrDNA是细菌染色体上编码16SrRNA相对应的DNA序列,存在于所有细菌染色体基因中。
16SrDNA是细菌的系统分类研究中最有用的和最常用的分子钟,其种类少,含量大(约占细菌DNA含量的80%),分子大小适中,存在于所有的生物中,其进化具有良好的时钟性质,在结构与功能上具有高度的保守性[2],素有“细菌化石”之称。在大多数原核生物中rDNA都具有多个拷贝,5S、16S、23SrDNA的拷贝数相同。16SrDNA由于大小适中,约1.5Kb左右,既能体现不同菌属之间的差异,又能利用测序技术较容易地得到其序列,故被细菌学家和分类学家接受。
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