ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗
ACYW135 Qun Naomoyanqiujun Duotang Yimiao
Group ACYW135 Meningococcal Polysaccharide Vaccine 本品系分别用A群、C群、Y群、W135群脑膜炎球菌培养液，分别提取和纯化A群、C群、Y群、W135群脑膜炎球菌多糖抗原，混合后加入适宜稳定剂后冻干制成。用于预防A群、C群、Y群、W135群脑膜炎球菌引起的流行性脑脊髓膜炎。
1 基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
2 制造
生产用菌种为A群脑膜炎球菌CMCC 29201（A4）菌株、C群脑膜炎球菌CMCC 29205（C11）菌株、Y群脑膜炎球菌CMCC 29028、W135群脑膜炎球菌CMCC 29037或其他经批准的菌种。
2.1混合前单价原液
无机非金属材料2.1.1A群、C群、Y群、W135群脑膜炎球菌多糖原液应分别符合“A群脑膜炎球菌多糖疫苗”中2.1～2.2项的规定。原液制备过程中可采用经批准的方法去除内毒素。
2.1.2 原液检定
按3.1项进行。
2.1.3 保存及有效期
粗制多糖、精制多糖原液或原粉于－20℃以下保存。自收获杀菌之日起至成品疫苗，总有效期应不超过60个月。
2.2 半成品
2.2.1 配制
用无菌、无热原乳糖溶液和灭菌注射用水稀释原液即为半成品。每1次人用剂量含A群多糖50μg，C群多糖50μg，Y群多糖50μg，W135群多糖50μg，乳糖2.5～10mg。
2.2.2 半成品检定
按3.2项进行。
2.3 成品财会基础知识
2.3.1 分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.3.2 分装及冻干
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。冻干过程中制品温度不高于30℃，真空或充氮封口。
2.3.3 规格
按标示量复溶后每瓶0.5ml。每1次人用剂量0.5ml，含A群、C群、Y群、W135群多糖各50μg。
2.3.4 包装
一点红萝卜符合“生物制品包装规程”规定。
3 检定
3.1原液检定
3.1.1鉴别试验
房地产营销方案采用免疫双扩散法（附录ⅧC），本品与A群、C群、Y群及W135群脑膜炎球菌抗体应形成明显沉淀线。
3.1.2 化学检定
3.1.2.1固体总量
杨高路依法测定（附录ⅦM）。（A群多糖于50℃干燥至恒重，C群、Y群、W135群多糖于50℃或105℃干燥至恒重。）
3.1.2.2 蛋白质含量
A群多糖和C群多糖均应小于8mg/g ，Y群多糖和W135群多糖均应小于10mg/g（附录ⅥB第二法）。
3.1.2.3核酸含量
A群多糖和C群多糖均应小于8mg/g，Y群多糖和W135群多糖均小于10mg/g。核酸在260nm波长处的吸收系数（E1%1cm）为200（附录ⅡA）。
3.1.2.4 O-乙酰基含量
A群多糖应不低于2.0mmol/g，C群多糖应不低于1.5mmol/g，Y群、W135群多糖均应不低于0.3mmol/g（附录ⅥF）。
3.1.2.5磷含量
A群多糖应不低于80mg/g（附录ⅦA）。
3.1.2.6唾液酸含量
以N-乙酰神经氨酸为对照，C群多糖应不低于800mg/g，Y群、W135群多糖均应不低于560mg/g（附录ⅥC）。
3.1.2.7多糖分子大小测定
含A群、C群、Y群、W135群多糖分子的K D值均应不高于0.40，K D值小于0.5的洗脱液多糖回收率：A群多糖应大于76％，C群、Y群、W135群多糖应分别大于80％（附录ⅧG）。
3.1.2.8苯酚残留量
A群、C群、Y群、W135群多糖均应不高于6.0mg/g（附录ⅥM）。
广西著名景点3.1.3 无菌检查
依法检查（附录ⅫA），应符合规定。
3.1.4 细菌内毒素检查
A群、C群、Y群、W135群多糖均应不高于12.5EU/μg（附录ⅫE）。
3.2 半成品检定
无菌检查
依法检查（附录ⅫA），应符合规定。
3.3成品检定
3.3.1鉴别试验
按3.1.1项方法进行。
3.3.2 物理检查
3.3.2.1外观
应为白色疏松体，按标示量加入所附稀释液后应迅速复溶为澄明液体，无异物。
3.3.2.2 装量差异
依法检查（附录ⅠA），应符合规定。
3.3.3 化学检定
3.3.3.1水分
应不高于3.0%（附录ⅦD）。
3.3.3.2 pH
依法检定，应符合标准（附录ⅤA）。
3.3.3.3渗透压摩尔浓度
依法测定（附录V H），应符合批准的要求。
3.3.3.4 多糖含量
年货买啥称取1.0g琼脂糖，加0.05mol/L巴比妥缓冲液（pH8.6）100 ml中，加热溶解完全，待冷却至约56℃时分别加入适量的A群、C群、Y群和W135群脑膜
炎球菌抗血清，混匀后迅速倾倒于水平放置的约5.5×12.5cm玻板上。待琼脂凝固后打孔，孔径3mm，孔间距离4~5mm。各孔中分别加入稀释好的脑膜炎球菌多糖参考品溶液（浓度分别为1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、6μg/ml、8μg/ml、10μg/ml、12μg/ml）和样品稀释液10 μl/孔。在60V恒压条件下电泳适宜时间。取出琼脂糖凝胶放入生理氯化钠溶液内浸泡适宜时间后，用考马斯亮蓝染色液染色至火箭峰出现，用甲醇-醋酸溶液脱色至背景清晰。准确测量火箭峰高，将各群脑膜炎球菌多糖参考品含量及对应的峰高作直线回归分析，分别将待检样品电泳峰高度代入直线回归方程中，求出样品中各群脑膜炎球菌多糖的含量。
每1次人用剂量含A群、C群、Y群、W135群多糖应分别为35~65μg。
3.3.3.5分子大小测定
K D值均应不高于0.40。K D值小于0.5的洗脱液多糖回收率：A群多糖应大于76％，C群、Y群、W135群多糖应分别大于80％（附录ⅧG）。亚龙湾
3.3.4无菌检查
依法检查（附录ⅫA），应符合规定。
3.3.5 异常毒性检查
依法检查（附录ⅫF），应符合规定。注射剂量为每只小鼠0.5ml，含1个人用剂量的制品；每只豚鼠5ml，含10个人用剂量的制品。
3.3.6 热原检查
依法检查（附录ⅫD）。注射剂量按家兔体重每1kg注射0.2μg多糖，应符合规定。
3.3.7细菌内毒素检查
每1次人用剂量应不超过1500EU。
3.4 稀释剂检定
疫苗稀释剂为灭菌注射用水或无菌、无热原PBS，稀释剂的生产应符合批准的要求。
