两种常用过敏原筛查方案结果对比分析
王文强1,陈柳青2,闫 琦1,穆小萍1
(1.广东省妇幼保健院,广东广州510010;2.广州市红十字会医院,广东广州510010)
DOI:10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2020.11.021收稿日期:2020 08 03;修回日期:2020 09 27
摘要:目的 对比分析AllergyScreen(敏筛)过敏原特异性IgE抗体和总IgE抗体检测方案与EUROLINEAtopy(欧蒙)过敏原特异性IgE抗体联合ImmunoCAP总IgE抗体检测方案结果的一致性,为临床过敏性疾病筛查提供更可靠的试验依据。方法 选取1
36例过敏性疾病患儿血清标本,年龄在3~15岁。应用德国AllergyScreen(敏筛)过敏原sIgE和tIgE抗体检测系统,德国EUROLINEAtopy(欧蒙)过敏原sIgE抗体联合美国ImmunoCAP(赛默飞Phadia250)tIgE抗体检测系统,同时检测患儿血清过敏原sIgE和tIgE,采用SPSS22.0对结果进行统计分析。结果 两
种检测方案过敏原豚草、尘螨的sIgE两项结果一致性强,Kappa值分别为1.000、0.813。艾蒿、屋尘、蟑螂、霉菌组合、牛奶、鸡蛋、海鱼组合、虾、蟹九项结果一致性较强,Kappa值分别为0.663、0.796、0.663、0.663、0.681、0.603、0.663、0.657、0.758。猫毛和牛肉两项结果一致性中等,
两元店赚钱吗Kappa值分别为0.421、0.553。而狗毛一致性较差,Kappa值为0.142。两种检测方案过敏原tIgE一致性一般,Kappa值为0.362。两种检测方案过敏原sIgE的等级资料Spearman相关性分析显示,艾蒿、豚草、尘螨、屋尘、牛奶、鸡蛋、海鱼组合、虾、蟹的等级相关性非常紧密,Spearman值分别为0.743、0.945、0.864、0.746、0.745、0.703、0.703、0.757、0.858。蟑螂、霉菌组合、牛肉的等级相关性比较紧密,Spearman值分别为0.683、0.649、0.653。猫毛和狗毛的等级相关性一般,
Spearman值为0.321、0.242。结论 两种检测方案对大部分过敏原sIgE不仅具有较强一致性,还具有非常紧密的等级相关性,但是两种检测方案过敏原总IgE一致性一般,因此,我们更推荐欧蒙过敏原sIgE检测联合ImmunoCAP过敏原tIgE检测作为常规过敏性疾病筛查的首选方案。关键词:过敏原; 过敏性疾病; 特异性IgE; 总IgE中图分类号:R593.1 文献标识码:A
AComparativeAnalysisoftheResultsofTwoMethodsfor
ScreeningAllergen
WANGWenqiang1,CHENLiuqing2,YANQi1,MUXiaoping
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(1.GuangdongWomenAndChildrenHospital,Guangzhou510010,China;2.GuangzhouRedCrossHospital,Guangzhou510010China)
Abstract:ObjectiveTocomparetheAllergyScreenspecificimmunoglobulinE(sIgE)andtotalimmunoglobulinE(tIgE)detectionmethodwiththeEUROLINEAtopysIgEcombinedwiththeImmunoCAPtIgEdetectionmethod,sotoprovideanexperimentalbasisforclinicaldiagnosisandtreatment.MethodsAtotalof13
6childrenserumsampleswithallergicdiseasewereenrolledforthecurrentstudy,agedfrom3to15yearsold.AllergyScreenallergensIgEandtIgEantibodydetectionsystem,andEUROLINEAtopyallergensIgEantibodycombinedwithImmunoCAPtIgEantibodydetectionsystemwereappliedtodetectserumallergenssIgEandtIgEatthesametime.SPSS22.0softwarewasusedasthestatisticalpackage.ResultsThetwoschemesforthedetectionofallergenssIgEragweedanddustmiteswerehighlyconsistent,andtheKappavaluewere1.000and0.813,respectively.TheconsistencyofArtemisia,housedust,cockroach,mold,milk,egg,marinefish,shrimpandcrabwerestrong,andtheKappavalueswere0.663,0.796,0.663,0.663,0.681,0.603,0.663,0.657and0.758,respectively.Theconsistencyofcathairandbeefweremoderate,andtheKappavalueswere0.421and0.553,respect
ively.However,theconsistencyofdoghairwaspoor,andtheKappavaluewas0.142.TheconsistencyofallergentIgEbetweenthetwodetectionschemeswassuboptimal,andtheKappavaluewas0.362.TheSpearmancorrelationanalysisofallergensIgEgradedataofthetwodetectionschemesshowedthattherewasaverystrongcorrelationsamongArtemisiaargyi
,ragweed,dustmite,housedust,0
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milk,egg,marinefishcombination,shrimpandcrab,withSpearmanvaluesof0.743,0.945,0.864,0.746,0.745,0.703,0.703,0.757and0.858,respectively.Cockroach,moldcombinationandbeefwerecloselyrelated,andtheSpearmanvalueswere0.683,0.64
9and0.653,respectively.ThecorrelationbetweencathairanddoghairweresuboptimalandtheSpearmanvalueswere0.321and0.242,respectively.ConclusionMostoftheallergensIgEofthetwodetectionschemesnotonlyhaveastrongconsistency,butalsohaveaverycloserankcorrelation,whilethetIgEofallergensdetectedbyAllergyScreenisgenerallyconsistentwiththeImmunoCAP.Therefore,werecommendEUROLINEAtopyallergensIgEcombinedwithImmunoCAPallergentIgEasthefirstchoiceforallergenscreeningamongroutinepatients.
Keywords:Allergen; Allergicdisease; sIgE; tIgE
日本剑道流派 过敏性疾病又称变态反应性疾病,主要见于支气管哮喘、湿疹、荨麻疹、过敏性鼻炎等,是一种病理性免疫反应。近年来,过敏性疾病的发病率越来越高,可累及不同组织器官,如皮肤、呼吸道、消化道等,该病临床表现多样,严重者可危及生命,现已成为世界性的健康问题。近年来,过敏原的特
异性诊断也越来越受到重视,ImmunoCAP定量检测人血清或血浆过敏原sIgE及tIgE已被认为是行业的金标准,其他方法学均与之进行比较[1]。本研究通过对136例过敏性疾病儿童4352项过敏原进行检测,对比分析了目前临床较为常用的两种过敏原sIgE及tIgE筛查方案,旨在为过敏性疾病筛查与诊断提供更加可靠的试验依据。
材料和方法
1 临床资料
选取2018年至2019年来我院就诊的过敏性疾病患儿136例,其中男62例、女74例,年龄在3~15岁,平均5.3±2.1岁。纳入标准:①年龄≤15周岁;
②临床诊断为过敏性疾病,包括过敏性鼻炎、支气管哮喘、荨麻疹、湿疹、皮炎及过敏性紫癜等;③明确所有入选病例一周内没有使用抗组胺类药物、糖皮质激素或免疫抑制剂。抽取全血5mL,3500r/min离心8min分离血清。
2 检测方法
方案1 AllergyScreen(敏筛过敏原特异性IgE和总IgE抗体检测试剂盒,德国Mediwiss公司),运用敏筛过敏原定量检测系统检测,经MEDIWISSAnalyt
ic免疫印迹数字成像系统,通过CCD照相,软件评估条带颜色深浅,通过计算分级,分级与IgE的IU/mL浓度相对应。结果评定标准:0级(<0.35IU/mL)、1级(0.35~0.70IU/mL)、2级(0.70~3.5IU/mL),3级(3.5~17.5IU/mL)、4级(17.5~50IU/mL)、5级(50~100IU/mL)、6级(>100IU/mL)。总IgE结果以>100IU/mL为阳性。 方案2 EUROLINEAtopy(欧蒙吸入性和食入性过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒,德国欧蒙医学诊断有限公司),运用欧蒙全自动免疫印迹仪(EUROBlotOne),应用ERUOLineScan软件进行结果判读。结果评定标准:0级(<0.35kU/L)、1级(>0.35kU/L)、2级(≥0.7kU/L)、3级(≥3.5kU/L)、4级(≥17.5kU/L)、5级(≥50kU/L)、6级(≥100kU/L)。
ImmunoCAP检测系统(赛默飞Phadia250全自动荧光免疫分析仪,美国热电公司)及配套的CAP诊断试剂测定总IgE,采用荧光酶免分析法,根据吸光度的大小来计算,以>60kU/L为阳性。
3 统计学处理
成长格言
由于两种检测方案检测的过敏原sIgE不尽相同,本研究只选择相同项目进行统计分析,其中树
组合结果均为阴性,不作分析。剩余组合采用SPSS22.0进行统计分析。采用Kappa检验(K)进行一致性分析。其中K<0.2,表示两者一致性较差;0.2≤K<0.4,表示两者一致性一般;0.4≤K<0.6,表示两者一致性中等;0.6≤K<0.8,表示两者一致性较强;0.8≤K≤1,表示两者一致性强。两种检测方案过敏原sIgE的等级资料采用Spearman相关性分析。0.2≤Spearman<0.4,说明关系一般,0.4≤Spearman<0.7,说明关系紧密,Spearman>0.7,说明关系非常紧密。总IgE结果评价以ImmunoCAP作为金标准,分析两种方案的符合率、灵敏度、特异性和一致性,以P<0.05为差异具有统计学意义。
结 果
1 两种检测方案过敏原sIgE抗体一致性和相关性分析
水仙花的养殖方法水培 敏筛过敏原sIgE抗体和欧蒙过敏原sIgE抗体的Kappa一致性分析显示,豚草、尘螨一致性强,Kappa值分别为1.000、0.813。艾蒿、屋尘、蟑螂、霉菌组合、牛奶、鸡蛋、海鱼组合、虾、蟹一致性较强,
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标记免疫分析与临床 2020年11月第27卷第11期
Kappa值分别为0.663、0.796、0.663、0.663、0.681、0.603、0.663、0.657、0.758。猫毛和牛肉一致性中等,Kappa值分别为0.421、0.553。而狗毛一致性较差,Kappa值为0.142。敏筛过敏原sIgE抗体和欧蒙过敏原sIgE抗体的等级资料Spearman相关性分析显示艾蒿、豚草、尘螨、屋尘、牛奶、鸡蛋、海鱼组合、虾、蟹的相关性非常紧密,Spearman值分别为0.743、0.945、0.864、0.746、0.745、0.703、0.703、0.757、0.858。蟑螂、霉菌组合、牛肉的相关性紧密,Spearman值分别为0.683、0.649、0.653。猫毛和狗毛的相关性一般,Spearman值为0.321、0.242。结果见表1和表2。
表1 两种检测方案过敏原sIgE抗体的Kappa一致性分析
吸入性过敏原KappaSE食入性过敏原KappaSE艾蒿0.6630.316牛奶0.68
10.063豚草1.0000.000鸡蛋0.6030.079尘螨0.8130.053牛肉0.5530.160猫毛0.4210.104海鱼组合0.6630.316狗毛0.1420.127虾0.6570.184屋尘0.7960.199蟹0.7580.134蟑螂0.6630.316
霉菌组合0.6630.316
表2 两种检测方案过敏原sIgE抗体的Spearman相关性分析
吸入性过敏原SpearmanSE食入性过敏原SpearmanSE艾蒿0.7430.102牛奶0.7450.075豚草0.9450.050鸡蛋0.7030.069尘螨0.8640.053牛肉0.6530.160猫毛0.3210.106海鱼组合0.7030.116狗毛0.2420.117虾0.7570.106屋尘0.7460.119蟹0.8580.034蟑螂0.6830.161
霉菌组合0.6490.174
2 两种检测方案过敏原tIgE一致性分析
两种检测方案阳性率分别为37.5%和85.2%,南瓜粥怎么做
以ImmunoCAP作为标准方法,经比对得出,敏筛过
敏原tIgE符合率为64.7%,灵敏度为51.5%,特异
性为97.4%,两种检测方案过敏原tIgE进行一致性
检验,Kappa值为0.362,一致性一般。结果见表3。
牛排英语怎么读表3 两种检测方案过敏原tIgE检测结果分析
敏筛过敏原tIgEImmunoCAP过敏原tIgE
阳性阴性
合计
阳性60151
阴性561985
合计11639136
讨 论
过敏是免疫系统发动的变态反应性疾病[2]。常见的过敏原包括花粉、宠物、尘螨、真菌、食物等[3]。目前,全球30%~40%的人口受到一种或多种过敏性疾病影响,如特异性皮炎、哮喘、过敏性鼻炎及食物性过敏等[4]。研究表明,反复接触某一过敏原才会引起对该过敏原的特异性反应[5]。吸入性过敏反应主要由季节性过敏原(树、草、种子的花粉等)引起,也可由常年性过敏原(屋尘螨、霉菌孢子、宠物的皮毛等)引起,食入性过敏反应主要由坚果类(花生、葵花籽等)引起,也可由海鱼、虾蟹类及牛羊肉类等引起[6]。
IgE是介导Ⅰ型超敏反应的主要抗体,血清总IgE(tIgE)的升高变化可大致反映机体是否为过敏体质。血清tIgE不仅与遗传、年龄等因素关系密切,还与寄生虫病、高IgE血症、系统性红斑狼疮等因素相关。特异性IgE(sIgE)是指机体接触某一特定变应
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原后产生的抗体,它能用于评价变应原反应的严重程度,同时具有较高的灵敏度和特异性[7]。因此,过敏性疾病的诊断应结合tIgE和sIgE以及患者临床症状综合判断。
目前,变态反应性疾病的检测分为体内检测和体外检测。体内检测主要包括皮肤点刺试验、过敏原皮内试验、皮肤斑贴试验和过敏原激发试验等。它的原理是过敏原直接刺激机体发生过敏反应,具有灵敏度高等优点,尤其食物激发试验和皮肤点刺试验可作为金标准。但同时具有使患者痛苦、危险、假阳性高、操作繁琐等缺点。体外检测血清tIgE抗体和血清sIgE抗体,具有方法简便快捷、准确度高、假阳性低、安全可靠,不受药物影响等优点[8]。
众所周知,不同过敏原检测系统方法学不一样,检测原理不同,由于抗原包被在不同的载体上,抗原抗体反应的微环境稍有差异,信号放大方式及灵敏度都会发生较大差异。另外,相同项目包被的抗原不相同,检测结果亦有差异。本研究对比分析了敏筛过敏原sIgE和tIgE抗体检测系统与欧蒙过敏原sIgE抗体联合ImmunoCAP过敏原tIgE检测系统。研究结果表明,两种过敏原筛查方案对过敏原在两种检测方案在大部分过敏原sIgE项上不仅具有较高的一致性,还具有紧密的等级相关性。但是两种检测方案过敏原tIgE测定结果一致性一般。在本研究中,欧蒙过敏sIgE抗体检测系统运用全自动加样和全自动成像系统,相较于敏筛半自动检测系统,节省了人力,
避免了人为加样、洗板以及时间把控等方面可能造成的误差。ImmunoCAP检测系统是一种全自动过敏原定量检测系统,它具有重复性好、准确度高,是目前行业公认的过敏性疾病体外检测的金标准。因此,本研究更推荐欧蒙过敏原sIgE抗体检测系统联合ImmunoCAP检测tIgE的组合作为临床诊断过敏性疾病的筛查方案。
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