高效液相法测定黄连中盐酸小檗碱的含量
第6卷第8期
2010年8月
亚太传统医药爬墙头
Asia—PacificTmditionalMedicine
V o1.6No.8
Aug.2010
高效液相法测定黄连中盐酸小檗碱的含量
袁常青，邢亮
(1.京东中美医院，北京101601;2.中关华医(河北)制药有限公司，河北三河065201) 摘要：目的：研究黄连所合成分盐酸小檗碱的HPLC4定方法.方法：采用BDSHype~ilCl8色谱柱(4.6minx
250mm,51xm)；流动相：乙腈一0.033mot/L磷酸二氢钾(含0.5%三乙胺，用磷酸调节pH至3.0)(30:70)；检测波长:
254nm；流速:1.0ml?rain一；柱温：室温；样品采用甲醇加热回流提取.结果：盐酸小檗碱在0.2336～1.752Og范围
内呈良好的线性关系,R2=0.9997(n=6)，平均回收率99.17%,RSD=1.8%(n=5).结论：该方法简便，准确，重现性
好.可用于黄连药材中盐酸小檗碱含量的控制方法.
关键词：黄连；盐酸小檗碱;HPLC
中图分类号:R284文献标识码:A文章编号:1673—2197(2010)08—0032—02 DeterminationontheContentofBerberineBydrOchlOrideinRhizomaCoptidisbyHPLC YuanChanqing,XingLiang望春阁导航
(1.ZhongmeiHospitalofJingdong,Beijing101601,China;2.PharmacenticalCo]tdofZhon gmeiHuayi,Sanhe065201,China)
Abstract:OMectiue:ToEstablishmethodforHPLCdeterminationofBerberinehydrochlori deinRhizomaCoptidis.Methods:BDS
HypersilCI8column(4.6mmx250mm,51xm);mobilepha:Acetonitrile-0.033mol/Lpot assiumdihydrogenphosphate(containingO.5%
triethylamine,pHadjustedto3.0withphosphoricacid)(30:70);detectionwavelength:254n m;flow:1.Oml0min-l;columntemperature:
loomtemperature;sampleheatingrefluxextractionusingMethano1.Result:0.2336～1.7520~gBerberinehydroehloridewaswellwithin
晚餐游戏thelinearrelationship,R=0.9997(n=6),averagerecoveryof99.17%,RSD=1.8%(n=5).Con clusion:Thismethodissimple,accurate,
reproducible.andcanbeudformedicinalherbsintheBerberinehydrochloridecontentinR hizomaCoptidiscontrolmethods.
KeyWords:BerberineHydrochloride:RhiZOmaCoptidis:HPLC
黄连…为毛莨科植物黄连，三角叶黄连，云连的干燥
根茎，主要成分为盐酸小檗碱,2005版中国药典采用控制
其所含盐酸小檗碱含量的方法来控制质量.在2005版中
国药典一部中，黄连中所含盐酸小檗碱的含量测定采用薄
层扫描(荧光扫描)法进行检测，由于薄层板质量，点样质
量，薄层板展开情况对薄层扫描方法影响很大，而我国目
前还没对薄层板，点样质量进行统一要求，致使该方法的
重现性较差；加之目前我国还没有成熟的薄层扫描仪生产
厂家，而国外设备又价格昂贵，致使该仪器普及率不高，影
响该方法的应用.根据规定，企业必须对所用原料采用药
典方法或其它经验证的方法对其进行检验，为解决上述问
题，我们研究采用HLPC法对黄连中盐酸小檗碱的含量进
行检测，实验结果证明HPLC法重现性良好.结果准确.操
作简便，可满足该药材的质量检验要求，报道如下.
1仪器与材料
1.1仪器
SSI二元高压液相色谱仪:Thermo可变波长紫外检测
器和EZChromElite色谱工作站(美国科学技术公司);
BDSHypemilCl8色谱柱(4.6mrn~250mm,5lxm);TU一1800S
紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);
KQ一50B型超声波提取器(昆山市超声仪器有限公司);
AB265一S十万分之一电子分析天平(梅特勒一托利多仪器常用函数
(上海)有限公司).
做ppt用什么软件1.2材料
盐酸小檗碱对照品，购自中国药品生物制品检定所,
批号:110713—200208，供含量测定用；黄连取自中美华医
(河北)制药原料库，产地四川，按2005版中国药典一部方
法进行了鉴别检验，符合规定；乙腈为色谱纯；纯化水；磷办理流程
酸，三乙胺，磷酸二氢钾均为分析纯.
r'1
2方法…与结果
2.1色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈一
0.033mol/L磷酸二氢钾(含O.5%Z乙胺，用磷酸调节pH
收稿日期:2010—06—06
作者简介：袁常青(1970一)，男，京东中关医院主管药师，研究方向为医院制剂. 一
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至3.0)E31(30:70)为流动相；检测波长为254nm.理论板数
邻桌女同学
以盐酸小檗碱峰计算应不低于4000.
在上述色谱条件下，盐酸小檗碱保留时间约
13.5min，且阴性对照在相应的位置无干扰.如图1，图2
所示.
图1盐酸小檗碱对照品色谱
图2样品色谱
2.2对照品溶液的制备
精密称取在100℃干燥5h的盐酸小檗碱适量，加甲醇
制成每lmL含0.1mg的溶液，即得.
2-3供试品溶液的制备
取黄连药材适量，研细，称取0.1g，精密称定，置锥形
瓶中，精密加入甲醇100mL(每100mL加入盐酸lmL)，加热回流提取lh，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤
过，取续滤液，即得.
2.4线性关系考察
精密称取盐酸小檗碱对照品1.1680mg，置10mL容
量瓶中.加甲醇稀释至刻度，制成对照品溶液.精密吸取
对照品溶液2,5,8,lO,12,15L注入液相色谱仪，按拟
定的色谱条件测定峰面积分别为317985,768251, 1235748,1554219,1856922,2286145.以峰面积积分值为
纵坐标，盐酸小檗碱进样量为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程:Y:1305801.7697X+14725.3952,R0=0.9997，盐
酸小檗碱在O.23361.75201~g范围内呈良好的线性关系. 见图3
图3盐酸小檗碱线性关系
2.5精密度试验
精密吸取对照品溶液10txL，按上述色谱条件，连续进
样5次，分别测定其峰面积,RSD=1.1%(n=5)，表明仪器
精密度良好.实验数据见表1.
表1精密度试验数据
2.6重现性试验
取同一批黄连药材5份，按供试品溶液制备方法制备
供试品溶液，依法测定盐酸小檗碱含量,RSD=I.6%(n=
5)，结果表明方法重现性良好.实验数据见表2.
表2重现性试验数据
2.7稳定性试验
取同一份供试品溶液，按上述色谱条件，分别在不同
时问(O,2,4,6,12h)进样101xL，测定盐酸小檗碱的峰面
积,RSD=I.5%(n=5)，结果表明样品溶液在12h内稳定.实
验数据见表3.
表3稳定性试验数据
2.8加样回收率试验
取已知含量(含盐酸小檗碱11.09%)的供试品5份,
每份取样约50mg，精密称定，分别加人已配制好的盐酸小
檗碱对照品溶液(0.1200mg/mL)lmL，挥干，按"供试品溶
液制备"项下的方法制成供试品溶液并依法测定，计算回
下学期的计划
收率，平均回收率为99.17%,RSD=I.78%(n=5)，结果见表
4.
表4加样回收率试验数据
取样量(mg)样品中含量(g)加人量(rng)测得值(mg)回收率(%)RSD 2.9黄连药材含量的确定
以同一批药材，随机抽样5份，按"供试品溶液制备"
项下的方法制成供试品溶液并依法测定.同一批药材经河
北省药检所按药典方法测定结果为9.1%；经比较,HPLC
法测定结果高出薄层扫描测定结果约23%.药典规定黄连
含盐酸小檗碱不得小于3.6%I4]，为此我们规定以HPLC测
定黄连含盐酸小檗碱不得少于4.5%.实验结果见表5.
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