复方丹参滴丸对糖尿病大鼠肾脏
转化生长因子β1/Smads 信号通路表达的影响
罗琼1，李琴1，石秀祯1，郭爱莉1，李静2
困难的成语作者单位：1
长江航运总医院内分泌科，湖北
武汉430010；2
华中科技大学同济医学院
附属协和医院中医科，湖北
武汉430022
摘要：目的观察复方丹参滴丸（DSP ）对糖尿病大鼠肾脏组织转化生长因子β1（TGF -β1）/Smads 信号通路表达的影响。方
法
链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型，大鼠采用随机数字表法分为正常组（NC 组）、糖尿病模型组（DM 组）、复方丹参滴丸
低剂量组（DSP 低剂量组）、复方丹参滴丸高剂量组（DSP 低剂量组）。DSP 低、高剂量组大鼠每天分别给予200、400mg/kg 的DSP 与生理盐水混悬液灌胃治疗，每日1次。8周末，检测各组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮表达水平；荧光定量PCR 法检测各组大鼠肾脏组织TGF -β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA 表达水平；蛋白质印迹法（Western Blot ）检测各组大鼠肾脏组织TGF -β1的蛋白表达；酶联免疫吸附（ELISA ）法检测各组大鼠尿中肾损伤分子-1（KIM -1）、骨桥蛋白（OPN ）以及肾脏组织p -Smad2、p -Smad3、Smad7的浓度水平。结果
与NC 组相比，DM 组大鼠空腹血糖［（27.19±1.55）mmol/L 比（5.94±1.15）mmol/L ］、
血肌酐［（39.25±2.18）μmol/L 比（26.20±1.18）μmol/L ］、尿素氮［（12.81±0.65）mmol/L 比（6.25±0.41）mmol/L ］、尿KIM -1［（67.90±1.69）ng/L 比（17.85±1.14）ng/L ］、OPN 浓度［（58.74±1.34）ng/L 比（15.40±1.01）ng/L ］明显升高（P <0.05）；肾脏TGF -β1的mRNA
［（1.72±0.15）比（1.00±0.00）］和蛋白表达［（0.81±0.05）比（0.27±0.06）］明显升高（P <0.05）；肾脏Smad2［（1.80±0.09）比（1.00±0.00）］、Smad3的mRNA 表达［（1.90±0.07）比（1.00±0.00）］以及p -Smad2［（69.45±1.43）ng/L 比（10.71±1.09）ng/L ］、p -Smad3的浓度［
（65.73±1.79）ng/L 比（9.84±0.33）ng/L ］均明显升高（P <0.05），而肾脏Smad7的mRNA 表达［（0.52±0.05）比（1.00±0.00）］和浓度［（10.61±0.65）ng/L 比（21.02±1.32）ng/L ］均明显降低（P <0.05）。与DM 组相比，DSP 低、高剂量组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮、尿KIM -1、尿OPN 浓度明显降低（P <0.05），并抑制了肾脏TGF -β1/Smads 信号通路的活性。结论DSP 可能通过抑制
DM 大鼠肾脏TGF -β1/Smads 信号通路，从而延缓DM 大鼠肾脏损伤。
关键词：丹参；糖尿病肾病；复方丹参滴丸；肾脏；转化生长因子β1/Smads ；大鼠，Wistar
Effect of compound Danshen dropping pills on the expression of TGF -beta 1/Smads signaling
pathway in kidney of diabetic rats
LUO Qiong 1,LI Qin 1,SHI Xiuzhen 1,GUO Aili 1,LI Jing 2
Author Affiliations:1Department of Endocrinology,Changjiang Shipping General Hospital,Wuhan,Hubei 430010,
China;2Department of Traditional Chine Medicine,Union Medical College Affiliated to Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan,Hubei 430022,China
Abstract:
Objective
To obrve the effect of compound Danshen dropping pills (DSP)on the expression of transforming growth fac‑
tor β1(TGF -β11)/Smads signaling pathway in kidney tissue of diabetic rats.Methods
Diabetic rats were induced by streptozotocin.
The rats were randomly assigned into normal group (NC group),diabetic model group (DM group),low -do group of compound Danshen
dripping pills (DSP low -do group)and high -do group of compound Danshen dripping pills (DSP high -do group).Rats in the low -and high -do groups of DSP were given intragastric administration of the suspension of DSP and saline at 200mg/kg and 400mg/kg,
respectively,once a day.At the end of 8weeks,the expression levels of fasting blood gluco,creatinine and urea nitrogen in rats of each group were detected.The mRNA expression levels of TGF -β11,Smad2,Smad3and Smad7in kidney tissues of rats in each group
were detected by fluorescence quantitative PCR.The protein expression of TGF -β11in kidney tissues of rats in each group were de‑tected by Western Blot.The concentrations of kidney injury molecule -1(KIM -1),osteopontin (OPN)in urine and p -Smad2,p -Smad3and Smad7in kidney tissues were measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).Results
Compared with NC group,fast‑
ing blood gluco [(27.19±1.55)mmol/L vs.(5.94±1.15)mmol/L],rum creatinine [(39.25±2.18)μmol/L vs.(26.20±1.18)μmol/L],urea nitrogen [(12.81±0.65)mmol/L vs.(6.25±0.41)mmol/L],urinary KIM -1[(67.90±1.69)ng/L vs.(17.85±1.14)ng/L]and OPN levels [(58.74±1.34)ng/L vs.(15.40±1.01)ng/L]in DM group were significantly higher (P <0.05).The mRNA [(1.72±0.15)vs.(1.00±0.00)]and protein
expressions [(0.81±0.05)vs.(0.27±0.06)]of TGF -β11in kidney incread significantly (P <0.05).The mRNA expressions of Smad2
◇药学研究
◇
引用本文：罗琼，李琴，石秀祯，等.复方丹参滴丸对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1/Smads 信号通路表达的影响［J ］.安徽医药，2021，25（2）：222-227.DOI ：10.3969/j.issn.1009-6469.2021.02.003.
[(1.80±0.09)vs.(1.00±0.00)]and Smad3[(1.90±0.07)vs.(1.00±0.00)]and the concentrations of p-Smad2[(69.45±1.43)ng/L vs.(10.71±1.09)ng/L]and p-Smad3[(65.73±1.79)ng/L vs.(9.84±0.33)ng/L]in kidney incread significantly(P<0.05),while the mRNA expres‑sions[(0.52±0.05)vs.(1.00±0.00)]and concentrations[(10.61±0.65)ng/L vs.(21.02±1.32)ng/L]of Smad7in kidney decread signifi‑cantly(P<0.05).Compared with DM group,the concentrations of fasting blood gluco,rum creatinine,urea nitrogen,urinary KIM-1 and urinary OPN in DSP low-and high-do groups were significantly decread(P<0.05),and the activity of TGF-β11/Smads signal‑ing pathway in kidney was inhibited.Conclusion DSP may delay renal injury in DM rats by inhibiting TGF-β11/Smads signaling pathway. Key words:Salvia miltiorrhiza;Diabetic nephropathies;Compound Danshen dropping pills;Kidney;TGF-beta1/Smads; Rats,Wistar
糖尿病（diabetes mellitus，DM）是最常见的代谢性疾病，近年来，随着人们生活方式的改变和人口老龄化等因素的影响，糖尿病的发病率正在逐渐增加，已成为继心脑血管疾病、肿瘤之后的第三大危害人类健康的重大疾病［1-2］。糖尿病肾病（diabetic
nephropathy，DN）是糖尿病最常见微血管并发症，也是导致终末期肾病的主要原因之一［3］。DN的主要病理改变表现为肾脏纤维化［4］，而转化生长因子β1（transforming growth factorβ1，TGF-β1）作为促进肾脏纤维化的细胞因子之一，在慢性肾病中起着至关重要的作用，作为主要的治疗靶点正在逐渐被临床所认可［5-6］。已有研究发现：TGF-β1可通过激活Smads信号转导促进肾上皮向间质转换，从而导致肾纤维化，最终进展为肾功能不全［7］。大量研究发现，TGF-β1/Smads信号通路与糖尿病肾病发生、发展及肾脏纤维化密切相关［8-9］。
目前临床上公认的糖尿病肾病的治疗方案常常在严格控制控制饮食、血糖、血脂、血压的基础上，应用血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（AngiotensinⅡreceptor antagonist，AngⅡ）、血管紧张素转换酶抑制剂（Angiotensin Converting Enzyme Inhibitors，ACEI）等药物加以防治，但这些措施很难完全有效延缓糖尿病肾病向终末期肾病发展［10］。中医药在糖尿病的防治上取得了显著的成效，复方丹参滴丸（com‑pound Danshen dripping pills，DSP）是一种新型中药制剂，是目前临床上用于缓解和治疗糖尿病肾脏病变、冠心病等的常见药物之一。已有研究发现［11-14］，复方丹参滴丸对糖尿病患者早期肾病损害具有明显的保护作用，但其作用机制并不完全清楚。因此，本研究通过观察DSP对DM大鼠肾脏TGF-β1/ Smads信号通路的影响，从而探讨DSP对糖尿病肾脏保护的作用机制。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1动物选取50只6~8周龄的健康清洁级、雄性Wistar大鼠，体质量（200±20）g，购于昆明医科大学动物实验中心，室温（24±2）℃，湿度（45±5）%，自然光照，室内保持安静。本研究中对于大鼠的处理符合动物伦理学相关标准。
1.1.2主要试剂复方丹参滴丸（天士力制药集团股份有限公司）；链脲佐菌素（美国Sigma公司）；
TGF-β1兔抗大鼠一抗、重组人β肌动蛋白（β-actin）兔抗大鼠一抗、羊抗兔IgG（北京博奥森生物技术有限公司）；p-Smad2、p-Smad3的酶联免疫吸附（ELI‑SA）试剂盒（Cell Signaling公司）；Smad7、肾损伤分子-1（KIM-1）、骨桥蛋白（OPN）的ELISA试剂盒（武汉华美公司）；RIPA裂解液（凯基生物）；SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒（凯基生物）；PCR引物（博士德生物）；逆转录试剂盒、荧光定量PCR试剂盒（Taka‑Ra）。
1.1.3主要仪器全自动生化分析仪（北京普朗新技术有限公司）；血糖仪及配套试纸（三诺生物传感股份有限公司）；ABI7500型实时荧光定量PCR仪（美国ABI公司）；酶标仪（美国Molecular Devices公司）、电泳仪（北京百晶生物技术有限公司）；数码凝胶图像处理系统（上海天能科技有限公司）。
1.2方法
1.2.1分组及造模大鼠适应性饲养7d后，按随机数字表法将50只大鼠随机分为空白对照组（NC 组，n=10）、造模组（n=40）。然后造模组大鼠使用腹腔注射1%链脲佐菌素（60mg/kg）进行造模，对照组大鼠腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液（0.1mol/ L），在72h后尾静脉采血，从而测定血糖浓度≥16.7 mmol/L时为造模成功［15］。
1.2.2造模后处置其中大鼠成模37只，死亡3只，成模率为92.50%。最后从中选取造模成功的30只老鼠采用随机数字表法分为糖尿病模型组（DM 组，n=10）、复方丹参滴丸低剂量组（DSP低剂量组，n=10）、复方丹参滴丸高剂量组（DSP高剂量组，n= 10）。DSP低、高剂量组大鼠每天分别给予200、400 mg/kg的DSP与生理盐水混悬液灌胃治疗，NC组及DM组大鼠给予等量的生理盐水灌胃，均每日1次，持续8周。
1.2.3血糖、血肌酐、尿素氮检测实验结束，血糖仪检测各组大鼠空腹血糖（fasting blood-gluco，FBG）水平。腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠后静脉取血，分离血清，使用全自动生化分析仪进行各组大鼠的血肌酐（rum creatinine，Scr）、尿素氮（blood
urea nitrogen ，BUN ）的检测。
1.2.4荧光定量PCR 法检测各组大鼠肾脏组织
TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA 表达水
平
误工证明怎么开取各组肾脏组织50mg ，先提取总RNA ，然后进行反转录，最后对反转录产物进行扩增。其中反应体系是20μL ，反应条件是stage1：95℃，30s 。stage2：95℃，5s ；60℃，34s ；40个循环。PCR 扩增的特异性引物序列见表1。
1.2.5蛋白质印迹法（Western Blot ）检测各组大鼠
肾脏组织TGF-β1的蛋白表达
取各组肾脏组织
80mg ，提取总蛋白，测定其浓度，上样等质量的蛋白。然后电泳、进行转膜、封闭、孵育TGF -β1一抗（1∶1000）4℃过夜，用TBST 清洗，37℃孵育二抗（1∶10000）1h ，再次用TBST 清洗，最后用ELC 发光试
剂盒显影。蛋白相对表达量=目的蛋白条带灰度值/β-actin 条带灰度值。1.2.6
ELISA 法检测各组大鼠尿中KIM-1、尿中
OPN 以及肾脏组织p-Smad2、p-Smad3、Smad7的浓度表达水平
代谢笼收集各组大鼠尿液，然后采用
ELISA 试剂盒检测各组大鼠尿中KIM -1、OPN 的浓度。取部分新鲜的肾脏组织，使用ELISA 试剂盒检
测各组大鼠肾脏组织中p -Smad2、p -Smad3、Smad7的
昆虫记介绍浓度表达水平。1.3
统计学方法
应用SPSS 19.0软件进行统计学
分析。观测资料均为计量数据，采用x ±s 表示，组间比较采用单因素方差分析，组间方差齐用LSD 法，方差不齐用Tamhane ’s T2（M ）检验。P <0.05为差异有统计学意义。2结果
2.1
各组大鼠血糖比较
与NC 组相比，DM 组大鼠
血糖明显升高（P <0.05）；与DM 组相比，DSP 低、高剂量组大鼠血糖明显降低（P <0.05），且高剂量组较低剂量组有进一步下降的趋势。见表2。2.2
各组大鼠肾损伤标志物水平的比较
与NC 组
相比，DM 组大鼠血Scr 、血BUN 、尿KIM -1、尿OPN 浓度明显升高（P <0.05），提示糖尿病引起了大鼠肾脏损伤；与DM 组比较，DSP 低、高剂量组大鼠血Scr 、血BUN 、尿KIM -1、尿OPN 浓度明显降低（P <0.05），且高剂量组尿KIM -1、尿OPN 浓度明显低于低剂量组（P <0.05），说明DSP 剂量依赖性地改善了糖尿病大鼠的肾脏损伤，对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。见表2。2.3各组大鼠肾脏组织TGF -β1的mRNA 和蛋白表达
与NC 组相比，DM 组大鼠肾脏组织TGF -β1的
mRNA 与蛋白表达均明显升高（P <0.05）；与DM 组相
比，DSP 低、高剂量组大鼠肾脏组织TGF -β1的mRNA 与蛋白均明显减低（P <0.05），且高剂量组明显低于低剂量组（P <0.05），说明DSP 剂量依赖性地抑制了糖尿病大鼠的肾脏TGF -β1表达。见表3，图1。2.4各组大鼠肾脏组织Smads 的mRNA 和蛋白表
达2.4.1各组大鼠肾脏组织Smad2、Smad3、Smad7的
mRNA 表达
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与NC 组比较，DM 组大鼠肾脏组织
Smad2、Smad3的mRNA 表达水平明显升高（P <0.05），而Smad7的mRNA 表达水平明显降低（P <
0.05）；与DM 组比较，DSP 低、高剂量组大鼠肾脏组织Smad2、Smad3的mRNA 表达水平均明显减低（P <0.05），而Smad7的mRNA 表达水平明显升高
表2
各组大鼠血糖及肾损伤标志物水平的比较/x ±s
组别NC 组
DM 组
DSP 低剂量组DSP 高剂量组F 值P 值鼠数10101010
FBG/
（mmol/L ）5.94±1.1527.19±1.55①②23.46±2.04①②22.97±1.96①②
307.770.00血Scr/（μmol/L ）26.20±1.1849.47±2.13①
39.25±2.18①②37.84±2.81①②
195.000.00
血BUN/（mmol/L ）6.25±0.41
12.81±0.65①9.93±1.25①②8.96±1.66①②
59.670.00
罪与罚经典语录尿KIM-1/（ng/L ）17.85±1.1467.90±1.69①
48.48±0.93①②
35.47±1.04①②③
2926.310.00
尿OPN/（ng/L ）15.40±1.01
58.74±1.34①44.17±2.61①②
37.32±3.10①②③
676.010.00
点测联动注：FBG 为空腹血糖，Scr 为肌酐，BUN 为尿素氮，KIM-1为肾损伤分子-1，OPN 为骨桥蛋，NC 为空白对照，DM 为糖尿病，DSP 为复方丹参滴丸。
①与NC 组相比，P <0.05。②与DM 组相比，P<0.05。③与DSP 低剂量组相比，P <0.05。
表1
PCR 扩增的特异性引物序列
基因名称TGF-β1Smad2Smad3Smad7β-actin
引物序列
正向：5'-TGCTTCAGCTCCACAGAGAA-3'反向：5'-TGGTTGTAGAGGGCAAGGAC-3'正向：5-'ATGTCGTCCATCTTGCCATTC-3'反向：5'-AACCGTCCTGTTTTCTTTAGCTT-3'正向：5-'GGCAGGATGTTTCCAGCTA-3'反向：5'-GCAGTCCACAGA CCATGTCA-3'正向：5-'GACAGCTCAATTCGGACAACA-3'反向：5'-CAGTGTGGCGGACTTGATGA-3'正向：5-'AGGGAAATCGTGCGTGACAT-3'反向：5'-GAACCGCTCATTGCCGATAG-3'
扩增片段长度182bp 173bp 180bp 146bp 150bp
（P <0.05）；且DSP 高剂量组Smad2、Smad3的mRNA 表达水平低于DSP 低剂量组（P <0.05），Smad7的mRNA 表达水平高于DSP 低剂量组（P <0.05）。见表4。
2.4.2各组大鼠肾脏组织p-Smad2、p-Smad3、
Smad7的蛋白表达
与NC 组比较，DM 组大鼠肾脏
组织p -Smad2、p -Smad3的蛋白水平明显升高（P <0.05），而Smad7的蛋白水平明显降低（P <0.05）；与DM 组比较，DSP 低、高剂量组大鼠肾脏组织p -Smad2、p -Smad3的蛋白表达水平均明显减低（P <0.05），而Smad7的蛋白表达水平明显升高（P <0.05）；且DSP 高剂量组p -Smad2、p -
Smad3的蛋白表达水平低于DSP 低剂量组（P <0.05），Smad7的蛋白
表达水平高于DSP 低剂量组（P <0.05）。见表5。3
讨论
糖尿病在中医学中被称为“消渴”，而“糖尿病肾
病”是消渴病并发症，发于肾脏，因此吕仁和教授称其为消渴病肾病［16］。消渴病肾病的基本病机为“肾虚血瘀”，而活血益气法是治疗此病的主要措施，并特别强调活血法贯穿整个治疗过程［17-19］。DSP 是一种新型中药制剂，以丹参、冰片、三七等中药为主要成分，具有活血化瘀、行气止痛等功效，且具有起效迅速、生物利用度高的特点［20］。其中丹参味苦、性微寒，是主要的活血化瘀中药，古代医书上有“一味丹参，功同四物（当归、川芍、白芍、熟地）”之说。冰片辛香而寒凉，善于开窍醒神、清热止痛。三七味苦而甘、性温，具有良好的活血化瘀、止血止痛的功效。现代研究发现：DSP 可改善DM 动物模型的胰岛功能、降低血糖水平、缓解炎症反应［21］、改善DM 所引起的心脏［22］、肾脏［23］等脏器的损伤，在DM 及其多种并发症的防治上显示了较好的疗效［24-26］。
DN 是糖尿病的主要微血管并发症，也是导致
终末期肾病的主要原因之一［27］。当血清Scr 、BUN 及尿KIM -1、OPN 等指标出现异常的时候，可以提示糖尿病可能出现了肾病的并发症［28-29］。在评价肾功能损伤时，尿KIM -1、尿OPN 比血肌酐、尿素氮等指标更为敏感，因为血肌酐、尿素氮常常在肾功能严重下降时才会发生明显的变化，而尿KIM -1、尿OPN 水平常常在肾脏存在轻微病变时就会发生比较明显的变化，所以可以被用来评价肾脏的早期损伤［30-31］。本研究发现：与NC 组比较，DM 组大鼠尿KIM -1、尿OPN 、血肌酐、血尿素氮浓度明显升高，提示糖尿病大鼠模型出现肾脏的损伤；与DM 组比较，DSP 低、高剂量组大鼠尿KIM -1、尿OPN 、血肌酐、血尿素氮浓度明显降低，且高剂量组大鼠尿KIM -1、
表3
各组大鼠肾脏组织TGF -β1的mRNA 和蛋白表达/x ±s
组别NC 组DM 组
DSP 低剂量组DSP 高剂量组F 值P 值
鼠数10101010
TGF-β1mRNA 1.00±0.001.72±0.15a
1.38±0.10①②0.99±0.08②③
58.680.00
TGF-β1蛋白0.27±0.060.81±0.05①
0.42±0.04①②0.16±0.08②③
91.480.00
注：TGF-β1为转化生长因子β1，NC 为空白对照，DM 为糖尿病，DSP 为复方丹参滴丸。
①与NC 组相比，P<0.05。②与DM 组相比，P<0.05。③与DSP
低剂量组相比，P<0.05。
2345
1
6
7
8
9
10
11
5注：1－β-actin ；2－转化生长因子β1（TGF-β1）；3－NC 组；4－DM 组；5－DSP 低剂量组；6－DSP 高剂量组。
图1
各组大鼠肾脏组织的蛋白表达（n =10）
表5各组大鼠肾脏组织p -Smad2、p -Smad3、Smad7的
蛋白表达/x ±s
组别NC 组
DM 组DSP 低剂量组
DSP 高剂量组
F 值
P 值
鼠数101010
10p-Smad2/（ng/L ）10.71±1.09
69.45±1.43①50.76±1.08①②
28.75±1.01①②③7.440.01
p-Smad3/（ng/L ）9.84±0.33
65.73±1.79①40.26±1.33①②
25.44±1.53①②③5.360.03
Smad7/
渭南滑雪场（ng/L ）21.02±1.3210.61±0.65①14.24±0.88①②
17.07±0.47①②③
6.310.02
注：NC 为空白对照，DM 为糖尿病，DSP 为复方丹参滴丸。①与NC 组相比，P <0.05。②与DM 组相比，P <0.05。③与
DSP 低剂量组相比，P <0.05。
表4
各组大鼠肾脏组织Smad2、Smad3、Smad7的
mRNA 表达/x ±s
组别NC 组
DM 组
DSP 低剂量组DSP 高剂量组
F 值P 值
鼠数10101010
Smad21.00±0.001.80±0.09
①
1.52±0.06①②1.09±0.08
①②③
156.99
0.00
Smad31.00±0.00
1.90±0.07①
1.69±0.05①②1.32±0.05
①②③
320.07
0.00
Smad71.00±0.000.52±0.05
①
0.66±0.07①②0.85±0.05
①②③
95.890.00
注：NC 为空白对照，DM 为糖尿病，DSP 为复方丹参滴丸。①与NC 组相比，P <0.05。②与DM 组相比，P <0.05。③与
DSP 低剂量组相比，P <0.05。
OPN浓度明显低于低剂量组，提示DSP剂量依赖性地改善了糖尿病大鼠的肾脏损伤，对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。
TGF-β1是TGF-β家族中的一个核心成员，具有广泛的生物学效应。已有研究发现：若肾脏中TGF-β1的表达水平过高，则可以促进成纤维细胞生长、增加细胞外基质含量，从而引起肾脏硬化［32］。TGF-β1/Smads信号通路作为TGF-β1介导的重要信号通路，在肾脏纤维化中发挥着不可替代的作用［33-34］。其中，TGF-β1可与TGF-β1Ⅱ型受体结合，从而激活TGF-β1Ⅰ型受体并将Smad2、Smad3蛋白磷酸化，而磷酸化的Smad2/Smad3与Smad4形成活性的转录复合物进入细胞核启动靶基因的转录，最终影响一些参与肾脏损伤分子的表达［35-36］。Smad7是TGF-β1信号通路的负反馈调节因子，主要通过与TGF-β1Ⅰ型受体结合抑制TGF-β1信号转导［37］。大量研究发现：糖尿病模型大鼠体内TGF-β1水平呈高表达，而Smads信号表达异常的状态［38］。本研究结果显示：与NC组相比，DM组大鼠肾脏TGF-β1的mRNA和蛋白表达明显升高；Smad2、Smad3的mRNA表达水平明显升高，而Smad7的mRNA表达水平明显降低；p-Smad2、p-Smad3的浓度明显升高，而Smad7的浓度明显降低。与DM组相比，DSP低、高剂量组大鼠肾脏TGF-β1的mRNA和蛋白表达明显降低；Smad2、Smad3的mRNA表达水平明显降低，p-Smad2、p-Smad3的浓度明显降低，且高剂量组明显低于低剂量组；而Smad7的mRNA表达水平明显升高，Smad7的浓度明显升高，且高剂组明显高于低剂量组。提示：DSP剂量依赖性的抑制了糖尿病大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的表达。
综上所述，DSP可能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路，从而延缓STZ诱发的DM大鼠肾损害。
参考文献
［1］中华医学会糖尿病学分会.中国2型糖尿病防治指南（2017年版）［J］.中国实用内科杂志，2018，38（4）：292-344.
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