神经递质多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)对三种主要养殖对虾争胜行为的影响
赵玉超;秦浩;李娜;沈敏;王仁杰;李玉全
【摘 要】Effects of injecting biogenic amines (dopamine,5-hydroxytry ptamine) on agonistic behavior of Penaeusjaponicus,Litopenaeus vannamei,Fenneropenaeus chinensis were studied.Injectable concentration of dopamine (DA) and 5-hydroxytry ptamine (5-HT) were 2× 10-3mol/L,2× 10-4mol/L and 2× 10-5mol/L,2× 10-6mol/L,respectively.Saline was ud as control,three replicates.The content of DA and 5-HT in shrimp were detected an hour after injection,the differences of agonistic behavior of shrimp were analyzed and compared before and after injection of DA and 5-HT.The results show that,after injecting dopamine,the fight of three kinds of shrimp significantly incread,HDA is more likely to stimulate the struggle than LDA in shrimp,the difference was significant in the same group (P＜0.05).Compared with the control group,Litopenaeus vannamei,Penaeus japonicus and Fenneropenaeus chinensis,the average number of shrimp were incread by 13.8％,11.1％ and 21.8％ after injecting of low concentration dopamine,the high concentrations of dopami
ne group were incread by 91％,64％ and 68.5％;the average number of fighting between shrimps incread with increasing DA concentration,significantly higher than the saline group,the average superiority index descended generally.5-HT can effectively reduce the fight between the same species of shrimp,the number of fights between each treatment group was significant (P＜0.05).With the increa of 5-HT concentration,the average number of fighting in shrimp was gradually reduced.Compared with the control group,the low concentration of 5-HT group is down more than 50％,thehigh concentration of 5-HT group is down more than 270％.The number of fighting shows that P.japonicus ＞ F.chin ensis ＞ L.vannamei,the average superiority index incread with the increa of 5-HT concentration.%本文采用肌肉注射和行为分析的方法,进行了注射多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)对对虾争胜行为的研究,比较分析了注射多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)对日本囊对虾(Penaeus japonicus)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)和中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)争胜行为的影响.多巴胺注射浓度为2×10-3mol/L、2×10-4mol/L,5-羟色胺注射浓度为2×10-5mol/L、2× 10-6mol/L,以生理盐水为对照,各设3个平行组.检测注射lh后对虾体内的DA、5-HT含量,分析比较注射DA、5-HT前后及不同对虾种类争
胜行为的差异.结果表明,注射多巴胺后三种对虾间的争斗显著增加,HDA比LDA更易激发对虾间的争斗,同种对虾在注射不同浓度多巴胺后与对照组差异均显著(P＜0.05);相较于对照组,南美白对虾、日本囊对虾、中国明对虾在注射低浓度多巴胺后,对虾平均争斗次数分别增加13.8％、11.1％、21.8％,高浓度多巴胺组分别增加91.0％、64.0％、68.5％;对虾平均争斗次数随着DA浓度的升高而增加;平均优势指数总体呈下降趋势.随着5-HT浓度的增加,对虾的平均争斗次数随之减少,相较于对照组,低浓度5-羟色胺组降幅超过50％,高浓度5-羟色胺组降幅超过270％以上.争斗次数表现为中国明对虾＞凡纳滨对虾＞日本囊对虾.平均优势指数随注射5-HT浓度的增加而小幅度上升.
【期刊名称】《海洋与湖沼》
【年(卷),期】2017(048)003
【总页数】6页(P628-633)
【关键词】对虾;多巴胺;5-羟色胺;争胜行为
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【作 者】赵玉超;秦浩;李娜;沈敏;王仁杰;李玉全
【作者单位】青岛农业大学海洋科学与工程学院 青岛 266109;青岛农业大学海洋科学与工程学院 青岛 266109;青岛农业大学海洋科学与工程学院 青岛 266109;青岛农业大学海洋科学与工程学院 青岛 266109;青岛农业大学海洋科学与工程学院 青岛 266109;青岛农业大学海洋科学与工程学院 青岛 266109
【正文语种】中 文
远古的传说教案
【中图分类】S967;Q958.12
争胜行为是同种动物个体相遇争斗的行为, 是一种典型的社会行为, 普遍存在于鱼类、甲壳类等水生动物中(李玉全等, 2013b)。对虾争胜行为的研究对丰富甲壳类行为学研究、合理调控对虾工厂化养殖密度具有十分重要的作用。目前, 有关对虾争胜行为的研究甚少, 仅限于生存因子、饵料、养殖密度等方面(张沛东等, 2008; 秦浩等, 2014; 李玉全, 2014; 赵玉超等, 2016), 但探究其调控机理的研究尚未见报道。生物胺(BA)广泛分布于甲壳动物的中枢神经系统和外周器官内, 可作为神经递质或激素传递各种信息,主要参与甲壳动物体色变化, 运动、渗透调节、行为、神经内分泌调节, 是调节动物行为的一种重要物质,目前有关于生物胺对对虾争胜行为影响的研究甚少。
多巴胺(DA)是生物胺的一种, 具有促性腺激素释放抑制因子的作用(孙迪等, 2011), 也能影响个体的运动、行为。有研究发现, 通过注射一定剂量的多巴胺, 可以改变对虾的一些生理特性(Cheng et al,2005, 2006)。Chen等(2005)推测DA可能参与病理性的攻击行为及其他异常行为; DA的合成、降解、受体以及转运等有关过程都可能影响个体的行为(Comings et al, 2000)。5-羟色胺(5-HT)又名血清素,属生物胺中的抑制性神经递质, 常作为神经递质或神经调质或激素物质调控许多重要的生理功能, 广泛分布在甲壳动物中枢和外周神经组织中(Sloley et
al, 1995), 参与多种行为, 如睡眠、饮食、记忆和攻击性等。在无脊椎动物中, 5-HT在认知、摄食、定位、生理节律和防御行为的反应方面起重要作用(Fingerman, 1997a, b)。Fingerman 等(1977)研究发现,5-HT和多巴胺在多种机制中证明具有相反的效应。5-HT是影响攻击行为的最主要的神经递质(Lesch et al, 2000; Miczek et al, 2005; Bortolato et al, 2013), 其他的神经递质可能是先通过影响5-HT进而影响攻击行为(孔雀等, 2006)。本研究以日本囊对虾(Penaeus japonicus)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)和中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)为实验对象, 采用活体注射的方式, 分别注射不同浓度多巴胺和 5-羟色胺, 分析争斗的总次数、优胜方的平均优势指数、对虾体内DA、5-HT含量等, 探
半山半水打一字讨注射不同浓度外源物质对对虾争胜行为的影响, 旨在初步阐明多巴胺和 5-羟对对虾争胜行为的响应机制, 为对虾行为学研究提供科学依据。
1 材料与方法
学生会工作心得
1.1 实验材料
实验所用中国明对虾、凡纳滨对虾购自昌邑海丰水产养殖有限责任公司, 生物学体长分别为9.0±0.5cm、8.0±0.3cm。日本囊对虾购自即墨市对虾养殖场, 生物学体长为 8.5±0.3cm。挑选健康活泼、体格健壮、体色正常, 规格一致的个体放置于50cm×40cm×35cm的塑料水槽中暂养7d, 水位30cm。所用海水为经沉淀、消毒、沙滤后的自然海水, 盐度33, 中国明对虾、日本囊对虾的养殖水温为 23.0±1.0℃, 凡纳滨对虾的养殖水温为24±1.0℃, pH 8.0±0.3;自然光照, 连续充气, 日换水1/3。饵料为人工配合饲料, 饲料成分: 粗蛋白43%, 粗灰分15%, 粗纤维5%,总磷0.9%, 粗脂肪5%, 赖氨酸2.2%, 水分12%。日投喂3次(6:00, 12:00, 18:00), 投喂后2h后清理残饵及粪便。
1.2 实验方法
1.2.1 实验设计 本研究以日本囊对虾、凡纳滨对虾、中国明对虾为观察研究对象, 每种对虾均分为 2个处理组: DA组、5-HT组和对照的生理盐水(0.85%)组。实验采用人工注射的方法进行, 注射量60µL, DA组与 5-HT组注射液均配制有高、低两种浓度: 高浓度多巴胺(HAD, 2×10–3mol/L)、低浓度多巴胺(LDA,2×10–4mol/L)、高浓度 5-羟色胺(H5-HT, 2×10–5mol/L)、低浓度 5-羟色胺(L5-HT, 2×10–6mol/L)注射液用生理盐水配制, 并作灭菌处理。每处理组设3个平行组。实验在塑料水箱中进行, 实验期间与暂养期间的养殖管理相同。容器底部铺上具有5cm×5cm方格线的塑料板, 以便量化对虾的游动速度和范围等。对虾养殖密度为80尾/m2, 每天上午9:00实验开始前需从暂养箱中选取1尾对虾, 用黑色标记笔在头胸甲部标记,注射外源物后放置到各养殖箱中观察, 连续观察20min, 实验进行10d。观察时停止充气, 减轻对对虾行为观察的影响, 记录争斗次数、争斗强度等争胜行为指标, 并计算平均优势指数。观察结束后抽取对虾血液进行血清样品的制备。实验借助行为观察法和视频图像解析技术进行行为的统计分析, 记录被观察对虾争斗中的争斗发起者、获胜方、失败方、争斗次数、争斗持续时间、游动速度及距离等。统计分析争斗发起者获胜的概率、攻击次数与攻击强度的关系。攻击强度参考李玉全(2014)关于日本囊对虾争胜行为的划分, 用摄像机记录争斗过程并加以归类。
1.2.2 对虾血淋巴的采集 从每个水箱中随机选取标记对虾1尾, 用1mL一次性无菌注射器于对虾心脏处抽取对虾的血淋巴, 注射器中预先吸入预冷抗凝剂(0.51mol/L氯化钠, 0.01mol/L EDTA-2Na,0.2mol/L柠檬酸, 0.04mol/L柠檬酸二钠, 0.1mol/L葡萄糖, pH=7.3), 使血淋巴与抗凝剂的最终比例为1 : 1,在离心管中混匀后, 置于4℃下中保存。
1.2.3 血清的制备 取上述抗凝血淋巴的样品,在4℃下3000r/min在高速冷冻离心机中离心10min,取上清液, 即为血清样品, 并保存于-80℃冰箱中备用。
1.2.4 指标检测 多巴胺含量测定分析参考王怀友等(2003)方法; 参照ELISA试剂盒的方法, 检测对虾体内5-羟色胺含量。
1.3 数据处理与统计分析
平均优势指数(MD): 实验过程中总获胜次数与争斗总次数(获胜次数+失败次数)的比值。
采用 SPSS17.0作数据统计分析, 利用单因子方差分析(One-way ANOVA)比较分析不同处理间的差异, P＜0.05为显著水平, P＜0.01为极显著水平, 使用Excel 2010软件作图。
简单好看的手抄报2 结果与分析
2.1 多巴胺浓度对平均争斗次数的影响世界人口第一大国
女生部由图1可知, 注射多巴胺对三种对虾争斗次数有显著性影响(P＜0.05)。在注射多巴胺后三种对虾间的争斗显著增加, 相较于对照组, 南美白对虾、日本囊对虾、中国明对虾在注射低浓度多巴胺(2×10–4mol/L)后, 对虾平均争斗次数分别增加了 13.8%、11.1%、21.8%, 高浓度多巴胺(2×10–3mol/L)组分别增加了91.0%、64.0%、68.5%。同种对虾在注射不同浓度多巴胺后与对照组差异均显著(P＜0.05), 且高浓度多巴胺(2×10–3mol/L)组比低浓度多巴胺(2×10–4mol/L)组更易激发对虾间的争斗欲, 随着多巴胺浓度的升高三种对虾的争斗性呈现上升的趋势。由对照组发现,日本囊对虾较凡纳滨对虾的平均争斗次数高 38.4%,比中国明对虾高 12.6%, 表现出较强的好斗性, 且在多巴胺的作用下争斗性的增强更为明显。低浓度多巴胺组(2×10–4mol/L)中日本囊对虾与中国明对虾争胜行为相比较差异不显著(P＞0.05), 与凡纳滨对虾相比较差异显著(P＜0.05); 对照组的各种对虾间均差异显著(P＜0.05)。
产伤
