GB/T 18204 4-2000
前言
为贯彻执行《公共场所卫生管理条例》和GB 9663～9673-1996、GB 16153-1996《公共场所卫生标
准》，加强对公共场所卫生监督管理，特制定本标准。
本标准中的方法是与GB 9663—9673-1996，GB 16153-1996相配套的监测检验方法。
本标准第一法为仲裁法。
本标准为首次发布。
本标准由中华人民共和国卫生部提出。
本标准起草单位：江苏省卫生防疫站、广东省卫生防疫站、天津市卫生防疫站、辽宁省卫生防疫站。
本标准主要起草人：涂抹法：符晓梅、封幼玲、杭万双、蔡玟、张淑兰；
戳印法：姜淑荣、张利伯、褚广鑫、付亚书。
中华人民共和国国家标准
公共场所毛巾、床上卧具微生物检验方法
细菌总数测定
Methods of microbiological examination
for towel and bedclothes in public places
-Determination of aerobic bacterial count
GB/T 18204.4-2000
自由女神像介绍
1 范围
本标准规定了公共场所毛巾、床上卧具细菌总数的测定方法。
本标准适用于公共场所内公用毛巾、床上卧具细菌总数的测定．
写信给监狱的亲人怎么写2 引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均
为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB/T 18204. 2-2000公共场所茶具微生物检验方法 细菌总数测定
3 定义
本标准采用下列定义。
细菌总数 aerobic bacterial count
指被检物品经过采样处理，在一定条件下培养后（培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性
质等）．25 cm^2表面上所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上
生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。
细菌总数主要作为判定公用毛巾，床上卧具被污染程度的标志，检测细菌总数，为公用毛巾、床上卧具清洗消毒效果的判定和评价提供依据。
第一法 涂 抹 法
4 仪器
见GB/T 18204. 2-2000中第4章。
5培养基和试剂
见GB/T 18204, 2-2000中第5章。
6检验程序
见GB/T 18204. 2-2000中第6章。
国家质量技术监督局2000- 09- 30批准
2001-01-01实施
GB/T 18204, 4-2000
7操作步骤
7-1 采样方法
7.1.1 随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、床上卧具。
7.1.2 用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在毛巾、枕巾对折后两面的中央各25 cm2(5 cm×5 cm)面积范围；床单、被单在上下两部各25 cm^2面积范围内有顺序地来回涂抹，用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放人10 mL生理盐水内，4h内送检。方小伟
7.2检验方法
7. 2-1 将放有棉拭子的试管充分振播。此液为1:10稀释液。
7.2.2 以无菌操作，吸取2 mL检样，分别注入到两块灭菌平皿内，每皿1 mL。如污染严重，可十倍递增稀释，即吸取1 mL加到9 mL灭菌生理盐水中，混匀，此液为1：1OO稀释液。每个稀释度做两块平皿。
7.2.3将已融化冷至45℃左右的营养琼脂培养基倾人平皿，每皿约15 mL，并立即旋摇平皿。冷凝后
放36℃土1℃培养箱培养48h。
8菌落计数方法
作平皿菌落计数时，可用肉眼直接观察，必要时用放大镜检查以防遗漏，在记下各平皿的菌落数后，
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落，该平皿不宜计数；若片状菌不
到平皿中的一半，而其余一半中菌落分布均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，所得结果代表全皿菌落数。
公用毛巾、床上卧具细菌总数按公式(1)计算：
m=k*n/2
m---细菌总数，cfu/25 cm^2
k—稀释倍数
n—平均菌落数
9菌落数报告方式
见GB/T 18204. 2-2000中第9章。
第二法 戳 印 法
10原理
用特制的内径为3. 57 cm的培养皿，注入营养琼脂培养基，使其表面比皿边高2～3 mm。采样时将
管理学罗宾斯形容希望的词语培养基表面和被检物品表面吻合，轻轻按压3--4 s，使其被检查物体表面能够均匀地与培养基表面接
触。然后盖上皿盖，置恒温箱37℃培养24 h后，计数培养基表面(10 cm2)生长的细菌菌落数。
” 培养基和试剂
11.1 营养琼脂培养基
11.1.1 成分：蛋白胨 10g
牛肉膏 3 g
氯化钠 5 g
琼脂 15～20 g
蒸馏水 1000 ml
11.1.2制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH为7.4--7.6，过滤、分装于玻璃容器中，经121℃灭菌20 min，储存于冷暗处备用。
开学季黑板报1 2仪器
12-1高压蒸汽灭菌器．
12.2 干热灭菌器。
12.3恒温箱。
12.4冰箱。
12.5特制戳印平皿（内径3.57 cm）．
12.6制备培养基用的一般器材。
13检验步骤
哈德逊河迫降事件13.1 将溶化并冷至50～55℃的营养琼脂培养基，倾注于已灭菌的特制戳印平皿内（使皿内部培养基
平面比皿边缘高2～3 mm），每皿约10 mL，待凝固后，盖上皿盖（皿盖与培养基隔一定空间），翻转平皿，
在4℃下保存备用。
刑偶伤子13.2将被检物品放平，再将皿盏打开，放在被检物品表面上，用手轻轻按压3～4 s，取下，盖上皿盖，置
37℃恒温箱内，培养24 h后观察结果，计数细菌菌落数。
14结果计算
用肉眼观察，点数培养基表面菌落数，其细菌总数为IO cm^2(每皿)表面积的菌落数。
本法简便易行、可靠，可直接采样做细菌培养。
