中图分类号:R994.4文献标识码：A文章编号：1002-3127（2020）05-0389-07・实验研究•人参组培不定根遗传毒性及亚慢性毒性研究
黄宗锈，黄佳宁，钟礼云，赵康涛，陈润
（福建省人兽共患病研究重点实验室，福建省疾病预防控制中心，福建福州350001）
【摘要】目的探讨人参组培不定根的遗传毒性及对大鼠生长、生理生化的亚慢性毒性效应。方法采用急性经口毒性试验、细菌冋复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和亚慢性毒性试验进行毒理学研究。
结果人参组培不定根LD5O>IO g/kg-hw；细菌回复突变、哺乳动物红细胞微核和精子畸形3项遗传毒性试验结果阴性，未观察到致突变性；亚慢性毒性试验结果表明，在人参组培不定根1.25,2.50和5.00g/kg-bw剂量组中，个别剂量组大鼠的周进食量、血液生化、血常规指标与超纯水对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05），其余各剂量组大鼠的体重、总进食量、总食物利用率、各脏器的生长发育及组织病理学等指标均未观察到有统计学意义的不良改变（P>0.05）。结论
经3项遗传毒性及对大鼠生长、生理生化的毒性效应研究，未观察到人参组培不定根有明显的毒性。
【关键词】人参组培不定根；遗传毒性；亚慢性毒性
Genetic toxicity and subchronic toxicity of tissue culture of ginng HUANG Zong-xiu,HUANG Jia-ning,ZHONG Li-yun,ZHAO Kang-tao,CHEN Run (Fujian Provincial Key Laboratory Zoonosis Rearch,Fujian Center for Dia Control and Prevention,
Fuzhou Fujian350001,China)
[Abstract]Objective To study the genetic toxicity of ginng tissue culture and its subchronic toxic effects on rat growth, physiology and biochemistry.Methods Acute oral toxicity test,Ames test,mammalian red blood cell micronucleus test,mice sperm abnormality test and subchronic toxicity test were ud.Results Acute oral toxicity test of ginng tissue culture was LD50>10g/kg•bw, which was actually non・toxic according to the grading standard of acute toxicity do.The result of genotoxicity tests,Ames test,the mammalian red blood cell micronucleus test,mice sperm abnormality test were all negative and without mutations.In addition,the subchronic toxicity test showed that in the1.25, 2.50, 5.00g/kg•bw do groups,the weekly food intake,blood biochemical and blood routine indicators of the individual do groups were significantly different from tho in the ultrapure water control group(P<0.05),while no significant adver changes were obrved in the weight,total food intake,total food utilization,growth and development of various organs and histopathology of rats in the other do groups(P>0.05).Conclusion In this study,no genetic toxicity a
nd subchronic toxicity in tissue culture of ginng were obrved.
[Key words]Tissue culture of ginng；Genetic toxicity；Subchronic toxicity
药用植物是生物医学领域临床应用与研究的重要组成部分，随着市场需求量的不断增长，许多传统栽培的珍贵药用植物因资源有限而日益短缺，无法满足临床用药的需求。近年来国内外研究人员采用细胞、组织培养等生物技术手段，探寻将某些植物组织培养物开发成为新的药物原料，以克服传统栽培方式的生长周期漫长，易受气候、自然环境等因素的影响，并先后取得了成功"引。
人参组培不定根是由人参离体组织在增殖培养基中诱导出愈伤组织，经筛选、培养等步骤形成的不定
基金项目：福建省、科技创新平台建设项目（2O19Y2OO1）
作者简介：黄宗锈，副主任技師.研究方向：卫生毒理学根，药理及分析化学研究表明.人参组培不定根的药理活性及生物活性物质含量高于天然人参"⑷。国内目前研究较多的是在人参组培不定根培养技术及成分分析等领域f但药用植物经组织培养后是否会对机体产生不良作用则涉及不多。本研究拟观察人参组培不定根的致突变性，以及连续90d暴露下对动物的生长发育、血液生理、生化和病理性指标的影响，探讨其对机体可能的潜在毒性，以期为更好地开发利用人参组培不定根提供实验依据。
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1材料与方法
1.1材料
1.1.1受试物：选取人参组培不定根清洗干净后，采
用负压远红外烘干法，在温度为60弋条件下烘干，将水分含量降低到5%以下，用粉碎机粉碎3遍.得到120H数黄色粉末，辐照灭菌在配制时为保证混悬液的均一性，受试物先与适量竣甲基纤维素、超纯水研磨成匀浆，再用超纯水定容至各试验所需浓度，搅拌均匀备用。受试物成人每日预期摄入量为1go
1.1.2实验动物：清洁级健康1CR小鼠、清洁级健康SI）大鼠，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，生产许可证号为SCXK（沪）2012-0002；饲养于福建省疾病预防控制中心屏障级动物实验室，使用许可证号：SYXK（闽）2012-0008；饲养环境温度20-23T、相对湿度50%-65%.动物照度18lx、工作照度280lx，人工控制12h光照/12h黑暗循环。动物实验经福建省疾控中心动物伦理委员会审批。
1.1.3菌株、阳性物与试剂：菌株:TA97、TA98、TA100和TA102等组氨酸缺陷型菌株，由上海复旦大学公共卫生学院提供；试剂：生化试剂盒等（北京利德曼生化股份有限公司，批号LOT401082L.LOT311271K等）；阳性物：叠氮钠（M ERCK KGaA，货号K24467188747）、1,8-二轻基蔥醞（国药集团化学试剂有限公司，批号F20090324），丝裂霉素C（Biosharp，货号10107409（X）1）、2,4,7-TNFone（Accustandard，批号214061373）、2-乙酰氨基笏（东京化成工业株式会社，批号FIN01）和环磷酰胺（CP，江苏恒瑞医药股份有限公司，批号130421）o 1.1.4主要仪器：全
自动五分类血液分析仪（美国雅培制药有限公司）、全自动染色机（德国Leica公司）、全自动生化分析仪（美国贝克曼库尔特有限公司）、生物安全柜（北京东联哈尔仪器制造有限公司）、自动菌落计数仪（杭州迅数科技有限公司）、显微镜（日本Olympus公司）等。
1.2方法⑼
1.2.1急性经口毒性试验：人参组培不定根粉先与适量竣甲基纤维素、超纯水研磨成匀浆，再用超纯水定容至最大可灌胃浓度166.7g/L，临用时搅拌均匀。将20只4周龄,18-22g雌雄各半的ICR小鼠禁食16h 后，以20ml/kg-bw灌胃容量经口给样，24h内给予3次.每次间隔4h，给样间隔期间动物给予一定量的饲料，禁食期间自由饮水，试验剂量为10g/kg・bw。每天记录各小鼠的中毒症状和死亡只数，连续14d o
1.2.2细菌回复突变试验：先鉴定4种营养缺陷菌株合格。将人参组培不定根粉先与适量竣甲基纤维素、超纯水研磨成匀浆，再用超纯水配制成5、1、0.2、0.04和0.008mg/皿5个剂量.另设各类阳性对照组、超纯水对照组和未处理对照组先后往顶层琼脂内加入灭菌后的0.1ml菌株增菌液、各剂量受试物和（）.5ml的SJ需要代谢活化时），混合均匀后覆盖在底层平板上，经37七培养48h，记录每皿回变菌落数，同时进行1次平行试验。如果受试物的回变菌落数是对照组的2倍以上，并且具有剂量反应关系，就可以判定为阳性结果。
1.2.3哺乳动物红细胞微核试验：人参组培不定根粉先与适量竣甲基纤维素、超纯水研磨成匀浆.再用超纯水定容至41.7.83.3和166.7g/I.，临用时搅拌均匀。选取9周龄，体重在25~30g雌雄ICR小鼠各25只，各性别小鼠随机分成0.83、1.66和3.33g/kg-bw受试物组（相当于人每日预期摄入量的50J00和200倍）、超纯水对照组和40mg/kg-bw的CP对照组，以20ml/kg-bw灌胃容量经口给样，1次/d，连续2d，于第2次给样6h后安乐法处死，取胸骨骨髓制片、染色，每只动物观察、计数1000个嗜多染红细胞的微核、200个PCE，分析PCE/NCE值和微核发生率。
1.2.4小鼠精子畸形试验：人参组培不定根粉先与适量竣甲基纤维素、超纯水研磨成匀浆，再用超纯水定容至41.7,83.3和166.7g/L，临用时搅拌均匀。将25只9周龄，体重在25-30g雄性ICR小鼠随机分成0.83J.66和3.33g/kg-bw受试物组（相当于人每日预期摄入量的50J00和200倍）、超纯水对照组和40mg/kg-bw的CP对照组，以20ml/kg-bw灌胃容量经口给样，连续5d。于末次给样30d后安乐法处死，取双侧附睾尾制片、染色，每只动物观察、计数1000个精子中的各类畸形精子数，分析精子畸形发生率。1.2.5亚慢性毒性试验：选取4周龄,74-87g雌雄SD大鼠各40只，各性别大鼠按体重随机分为4组。试验按受试物人日预期摄入量的75J50和300倍，设1.25.2.50和5.00g/kg-bw3个剂量组和基础饲料空白对照组。以8%的大鼠体重折算饲料摄入量，分别将390.6,781.2和1562.5g人参组培不定根粉均匀地掺入基础饲料至25kg，制备成15.625、31.25和62.5g/kg饲料3个受试物饲料浓度，充分混匀后辐照灭菌供试，每月配制1次。5.00g/kg-bw剂量组受试物的添加量为6.25%（质量分数），配制时根据
受试物主要营养成分和热量调整本组营养素水平，保持与对照组饲料一致，其中因测得人参组培不定根的蛋白质含量为22.24%、基础饲料蛋白质含量测定为22.37%，两者接近，且制备后5.00g/kg-bw剂量组蛋白质含量测定为22.33%，蛋白质水平无需调整。大鼠
单笼饲养、自由进食饮水，每天观察大鼠表现形态，每 周记录体重，记录每次饲料添加量、剩余量，估算每次
饲料洒漏量.计算出摄食量和食物利用率，试验中期 采血测生化、血常规指标；第90天再次检测血生化、血
常规指标，称取肝、肾、脾和睾丸重量，并对肝、肾、脾、 胃肠、睾丸和卵巢作病理学检查。
1.3 统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件，微核发 生率以含微核PCE 千分率计、精子畸形率是以各类畸
形精子数百分率计，均按泊松分布进行统计分析；计量 资料以均数士标准差（丘士s ）呈现，采用单因素方差分析进
行多个试验组与对照组之间均数比较；其余计数资料采 用卡方检验。以P<0. 05表示差异有统计学意义。2结果
2. 1 急性经口毒性试验试验期间小鼠生理、活动均 正常，未见中毒体征，结束时大体解剖也未见异常，
LD 50>10 g/kg ・bw 。
2.2 细菌回复突变试验人参组培不定根各剂量组
回变菌落数未观察到有明显的剂量-反应关系，与对 照组相比也没有2倍数的增加，见表1。
表1人参组培不定根细菌回复突变试验的结果（a 土s，个/皿）
剂量组
(mg/ Hl )
TA97TA98
TA100TA102
-S9
+S9
-S9
+S9-S9+S9-S9+S90. 008125±22141±1137±236±2135±13
147±18274±12280±180. 04126±20139±12
36±2
32±3133±12
148±16
266±12282±17
0. 2
128±13
135±1434±337±1
133±14145±14268±10
280±141134±11133±13
35±2
35±2135±12
142±13
264±15285±135121±15
127±1434±335±3130±11145±11
267±12277±12自发回变122±11131±12
33±234±3136±14142±12268±17272±16超纯水对照
124±11
135±1233±2
36±3136±12
149±13
266±19
282±14
2,4,7-TNFone 1154±120
-1196±57
-----NaN]
-
---1083±100
---MMC --
--
-
-
1161±108
-2-AF -1159±120
-
1126±43
-1140±111
--
1&二羟蔥醞
-
-
--
-
-
-
1207±126
2.3 哺乳动物红细胞微核试验CP 对照组的微核发 生率明显高于超纯水对照组，差异有统计学意义 （P<0.01），同时人参组培不定根各剂量组微核发生率
与超纯水对照组比较，差异均无统计学意义
（P>0.05）；各剂量组PCE/NCE 未少于溶剂对照组的
20%，对动物骨髓红细胞系统无明显损伤，对嗜多染红 细胞微核无明显影响，见表2。
表2哺乳动物红细胞微核试验结果（£士s ）
注：与超纯水对照组比较.• P<0. 05:
性别剂量：
(g/kg-bw)
动物数
（只）
PCE/NCE 含微核PCE 率
观察PCE 数（个）
观察NCE 数（个）
PCE/NCE 观察PCE 数（个）
含微核PCE 数（个）
含微核PCE 率
（%0）雄性
超纯水对照
51000
10370. 96±0. 04
50005 1. 0±0. 7
0. 83
5100010270. 97±0. 0550006
1. 2±1. 11. 665100010740. 93±0. 025000
5
1.0±1.43.33
51000
1025
0. 98±0. 05500030. 6±0. 9CP 对照5100010640. 94±0. 07
5000127*
25.4±3.4
雌性超纯水对照
510001002
1. 00±0. 0750006 1.2±1. 30. 83
5
10001060
0. 94±0. 05500040. 8±0. 81.6651000
10350. 97±0. 0650004
0. 8±0. 53. 335100010640. 94±0. 04
50005 1.0±1.0
CP 对照
5
穷查理
1000
1054
0. 95±0. 075000
115*
23. 0±2.4
2.4小鼠精子畸形试验CP 对照组畸形率明显高于 组畸形率与超纯水对照组比较，差异均无统计学意义超纯水对照组（P<0.01），同时人参组培不定根各剂量
（P>0.05），见表3。
表3小鼠精子畸形试验结果（x 土s ）
注：与超纯水对照组比较."P<0.05；n = 5
剂量
观察精子数
栀子花开花时间畸形数
畸形率
(g/kg-bw)
（个）
（个）
(%)
超纯水对照
500082 1.64±0. 11
0. 83
500081
1.62±0. 081.66500089
1. 78±0. 083. 33
500082
1.64±0. 11CP 对照5000
412*
8. 24±0. 43
2. 5 亚慢性毒性试验
2.5. 1人参组培不定根对大鼠体重和食物利用率的 影响：各组大鼠在试验期间生长活动状况良好，人参组 培不定根2. 5（） g/kg-bw 剂量组雄性大鼠的第12周进 食量、雌性大鼠的第11周进食量与超纯水对照组比
较，差异有统计学意义（P<0. 05），其余各剂量组大鼠 的各周体重、结果时的体重增重、总进食量、总食物利
用率及脏体比与超纯水对照组比较，差异均无统计学
意义（P>0. 05），见表4。
表4人参组培不定根对大鼠体重和食物利用率的影响（x±s,n= 10）
性别
剂量(g/kg-bw)
初始体重（g ）
终末体重（g ）
体重增重（g ）考研分区
总进食M: （g ）
总利用率（％）
雄性
083. 1±3. 7540. 5 ±36. 6457. 4±35.62287. 2±38. 320. 0±l. 71. 2582. 4±3. 7537. 1±29. 2454. 7±30. 12271. 4±34. 120. 0±1.4
2. 50
82. 8±3.4544. 2±21.5461.4±20. 6
2268. 4±44. 4
20. 4±1. 1
5.0082. 9±3. 553
6. 9±38. 6454. 0±36. 82301.4±50. 919. 7±1. 5雌性079. 7±3. 8346. 0±29. 5266. 3±26. 9
1943.4±34. 3
13.7±1.31. 2579. 7±4. 1341.7±31.8
262. 0±30. 31953. 5±66. 613.4±1.6
2. 5079. 5±
3. 7
343. 3±15. 1263. 8±14. 81945. 1±53. 613. 6±1.0
5. 00
79. 6±3. 8351. l±30. 1271.5±28. 7
1992. 0±47. 9
13.6±1.4
2.5.2 人参组培不定根对大鼠血常规和生化指标的 影响：在喂养第45天时雄性2. 50 g/kg-bw 剂量组的
嗜酸性粒细胞,5.00 g/kg-bw 剂量组的血糖（GLU ）； 雌性1.25 g/kg • bw 剂量组的总胆固醇（TCH ）,
2. 50 g/kg-bw 剂量组的白蛋白（ALB ）、总蛋白（TP ）, 5. 00 g/kg-bw 剂量组的单核细胞（MONO ）、嗜酸性粒
细胞（EOS ）与超纯水对照组比较，差异有统计学意义
（P<0. 05）；在喂养第90天时雄性2.50 g/kg-bw 剂量 组的GLU 与超纯水对照组比较，差异有统计学
意义
（P<0. 05），但均在本实验室正常值范围内。其余各剂
量组的血常规、生化指标与超纯水对照组比较，差异均 无统计学意义（P>0.05），见表5~8。
表5 试验中期血常规指标的结果（,r±5,n = 10）
注：打超纯水对照组比较，* P<0. 05
性别剂量
(g/kg-bw)
Hb (g/L)RBC (x 10,2/L)
WBC (x 109/L)
NEUT (%)LYMPH (%)MONO (%)EOS (%)
BASO (%)
雄性
0152±58. 52±O. 3914. 79±4. 77
10. 8±1.9
80. 7±3. 1
4. 0±l. 0 1. 2±0. 3 3. 3±0. 71. 25152±58. 52±0. 2416. 13±4. 3510. 8±3. 182. 8±4. 3 2. 9±1. 8 1. 3±0. 5 2. 3±1. 12. 50
151±5
8. 45±0. 3617. 47±2. 7310. 3±2. 383. 5±3. 9 2. 7±1.80. 9±0. 3* 2. 6±1. 15.00152±68. 53±0. 35
14. 67±3. 4310. 7±2. 882. 3±5. 5
3. 0±l. 8
0. 9±0. 2
3. 1± 1.3
雌性
0152±48. 49±0. 479. 73±1.67
& 8±4. 783. 0±7. 1 3.4土1.6 1. 4±0. 4 3.4±1.01. 25I55±58. 63±0. 3311.26±2. 54& 4±7. 184. 1± &0 2. 9±0. 7 1. l±0. 3 3.4±1.02. 50
151±7
8. 55±O. 629. 36±2. 24& 3±2. 883. 3±4. 7
3. 8±1.9 1.4±0. 4
3. l±0. 7
5.00148±48. 32±O. 34
8. 02±l. 63
10. 1±2. 2
7& 3±3. 4 5. 6±1.4*
2. I ±0.8*
3. 9±0. 8
注：与超纯水对照组比较「P<0. 05
表6
试验中期血生.化指标的结果（x±5,n= 10）
性别剂量
(g/kg.bw )
ALT (U/L)AST UREA CR
(U/L) ( mmoL/L) ( p,moL/L)GLU (mmoL/L )ALB (g/L)TP (g/L)TCH (mmoL/L)TG
(mmoL/L)雄性
47±10
103±l 1
5. 86±0. 78
45. 9±2. 47. 14±1. 2128. 9±(). 661.9±1. 3 2. 0()±0. 21
0. 96±0. 53
I. 2541±698±10 5.65±0.56 49. 8±3. 6
6. 43±0. 9928. 4±1.261.6±2. 6
1.98±0. 28 1. 15±0. 46
2. 5051±17
100±14 5.56±0.51 47.8±4.0 6. 92±l. 24
28. l±1.060. 4±1.4
1. 82±0. 12 1.09±0. 235. 00
48±18106±23 5. 92±0. 83 49. 6±6. 1 5.98±0. 84• 28. 8± 1.961.2±2. 9 2. 04±0. 44 1.09±0. 41
雌性0
45±13103±15 6. 90±l .33 56. 0±4. 5
5. 42±0. 8330. 7±1.263. 8±2. 4 2. 26±0. 40
1. 19 土 1.021. 2549±25108±3l 6. 82±0. 98 57. 8±6. 6 5. 79±0. 93
31. 8±0. 8
65. 8±2. 2
1. 87±0. 27' 1.06±0. 75
2. 5040±l 1
90±15
6. 84±0. 81 56. 1±
7. 8 6. O3±l.O732. 7±1.7*67. 0±3. 6* 2. 10±0. 500. 73±O. 355. 00
36±698±10
6. 88±1.18
53. 2±8. 2
5. 94±0. 69
32. 2±2. 2
65. 0±3. 3
2. 12±0. 36
0. 96±0. 52
表7
试验末期血常规指标的结果(x±5,n=10)
性别剂量
(g/kg-bw)
Hb (g/L)RBC
(x 1012/L)
WBC
(x 109/L)
NEUT
(%)LYMPH (%)MONO (%)EOS (%)BASO
(%)雄性
ofo153±49. ll±0. 26
10. 27±2. 2217. 2±4. 373. 2±5. 3
5. 6±2. 2 1. 7±0. 2 2. 3±0. 91. 25149±3& 95±0. 1811.22±3. 16
18. 4±4. 071. 6±4. 2 5. 9±1.5 1. 8±0. 8 2. 3±0. 92. 50
152±79. 17±0. 5210. 08±2. 6315.2±3.5
74. 7±3. 9 5. 7±1.6
1.6±0. 6
2. 8±0. 85.00148±12
8. 71±0. 728. 70±l. 8216. 0±5. 074. 5±5. 6 5.8±1.4 1. 6土0. 7 2. 0±0. 3
雌性0148±78. 43±0. 39 6. 70±l. 1814. 6±5. 175. 6±6. 5 5. 6±1.8
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2. 4±1. 2
1. 8±0. 71. 25148±6
8. 36±0. 51
7. 42±2. 1616. 9±4. 675. 3±4. 7
4. 4±1.8 1.7±0. 7 1. 7±0. 72. 50
150±5& 72±0. 45 6. 56±1. 5517. 6±4. 571. 8±5. 7 6.4±1.9 2. 2±0. 8 2. 0±0. 7
5.00148±78. 51±0. 42
7. 50±1.79
13.4±5.6
75. 6±8. 4
6. 2±2. 4
2. 7±
3. 6
2. 2±0. 6
表8试验末期血生化指标的结果(%±5,n= 10)
注：与超纯水对照组比较，* P<0. 05
性别剂量
ALT AST UREA CR GLU ALB TP TCH TG (g/kg-bw)
(U/L)(U/L)(mmoL/L)(p,moL/L)(mmoL/L)(g/L)(g/L)(mmoL/L)(mmoL/L)
雄性
047±11140±15
5. 58±0. 435
6.0 土 5. 1 5. 26±0. 523
7. 0±l. 3
69. 4±3. 3 1. 82±0. 32 1.09土 0. 44
1. 2545±9139±19 5. 72±0. 4159. 0±
2. 8 5. 38±0. 38
37. 4±1.869. 6±1.9
1. 81±0. 28
0. 82±0. 272. 50
43±4137±13
5. 84±0. 585
6. 7±3. 2 4. 55±0. 43*38.4±1.8
70. 0±2. 5I.71±0. 250. 83±0. 385.0044±4
138±14 5. 66±0. 6857. 1±3. 3 4. 80±0. 6736. 8±3. 669. 4±3.2 1. 76±0. 240. 98±0. 52雌性048±12138±25
6. 46±0. 7659. 7±10. 6 4. 89±0. 5445. 1±3. 0
76. 0±2. 9
2. 31±0. 380. 96±0. 331.2537±11133±207. 42±1.4066. 4±9. 0
4. 93±0. 6844. 8±4. 776. 5±6. 9 2. 19±0. 340. 82±0. 372. 50
40±7
128±217. 35±0. 8162. 9±5. 5 4. 95±0. 4148. 0±3. 1
79. 0±3. 8 2. 50±0. 480. 76±0. 34
5.0041±5135±20
6. 74±0. 91
62. 0±5.6
5. 07±0. 45
43.4±4. 874. 2±4. 2
2. 17±0. 50
1. 06±0. 81
2. 5.3 人参组培不定根对大鼠主要脏器病理切片的
影响：大鼠解剖时大体检查未观察到有明显的异常，正
常肝小叶结构存在，雄性5. 00 g/kg-bw 剂量组肝脏发 生空泡变性的动物数量稍多于超纯水对照组，但这些
空泡变性均较轻微，只个别肝汇管区见淋巴细胞等炎汤圆馅
细胞浸润，无纤维组织增生；胃和十二指肠粘膜完整，
无明显岀血、坏死、糜烂、溃疡及炎细胞浸润，无明显腺 体增生萎缩改变；脾白髓、红髓结构清楚，没有明显的
扩张、萎缩现象，少部分对照组与5.00 g/kg-bw 剂量 组的脾可见色素沉着；各组肾皮髓质结构清楚，个别
2.50 g/kg ・bw 剂量组肾小管、曲管内可见管型，但 5.00 g/kg-bw 剂量组均正常，见图1和2。
正常对胆组肝空泡变(HE ;200)
5.00g/kg ・bw 剂量组肝空泡变
(HE *200)
图1对肝病理检查结果
3讨论
通过生物技术手段改良药用植物性能，可以有效
正常对照组肾管型(HE -200)
2.50gAg-b W 剂量组肾骨型
(HE >200)
图2对肾病理检查结果
地保护珍稀濒危中药材资源，有益于中药材的可持续
性开发利用。利用药用植物的某一器官离体培养出不 定根，可在较短的时间内达到快速繁殖、筛选优质品种
的目的⑴。人参皂昔在人参中含量较低，而人参人工
种植需要4~ 15年的生长栽培周期，又面临农药残留、 重金属污染及品质退化等问题，因此，为了适应日益增 长的用药需求、保护人参资源，近年来国内外学者通过
组织培养、生物转化等途径对人参皂昔的合成、人参组
织的培养及基因的克隆与表达进行了探索研究［l0-'"o
但在增殖、研究过程中为了促进不定根的培养生长，往
往需要向培养基中添加生长素、细胞分裂素等调节剂 物质，同时在细胞代谢过程中也会有产物过量等问题，
进入生物体后是否有潜在生物学毒性是未知的。
本研究先期开展急性经口毒性试验，以期在短期 内了解人参组培不定根是否对动物机体产生急性毒性
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