M. λDNA/HindⅢ Marker 1. 兔睾丸（rabbit testis） 2. 小鼠睾丸（mice
testis） 3. 大鼠睾丸（rat testis） 4. 貂睾丸（mink testis） 5. 狗睾丸
（dog testis） 6. 羊睾丸（sheep testis） 7. 猪睾丸（pig testis）
图1 基因组DNA琼脂糖凝胶电泳图
Fig. 1 Genomic DNA agaro gel electrophoresis
小学英语教研组工作计划2.2 基因组DNA的浓度与纯度
基因组DNA经 3 次平均测定，A260 /A280值均在
1.7~1.9之间，浓度在 100~400 ng·μL-1之间（表2）。
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岳飞故事M. 100 bp DNA Ladder 1. 阳性对照品（positive control） 2. 兔睾丸（鲜）［rabbit testis （fresh）
］ 3. 兔睾丸（干）［rabbit testis （dry）］ 4. 小鼠睾丸（mice testis） 5. 大鼠睾丸（rat testis） 6. 貂睾丸（mink testis）7. 狗睾丸（dog testis） 8. 羊睾丸（sheep testis） 9. 猪睾丸（pig testis）10.空白对照（blank control）
退火温度（annealing temperature）：A. 58 ℃ B. 59 ℃ C. 60 ℃
图2 兔睾丸 DNA PCR 特异性扩增图谱
Fig. 2 PCR specific amplification map of rabbit testis DNA
2.4 克隆结果及序列比对结果
社会实践活动目的经过分子克隆蓝-白斑筛选，可见氨苄阴性平皿长满了细菌，氨苄阳性平皿出现蓝-白菌落（图3）。挑取白色菌落培养后，提取质粒 DNA，在 59 ℃的退火温度下进行 PCR 扩增，琼脂糖凝胶电泳结果显示，克隆鉴定结果与预期目的条带位置一致，在 326 bp 出现1条特异性
兔睾丸 DNA 分子克隆蓝—白斑筛选图
Fig. 3 Rabbit testis DNA molecular cloning blue-white spot screening
M. 100 bp DNA Ladder 1. 兔睾丸阳性对照品克隆（rabbit testis positive control clone） 2、3. 兔睾丸克隆（rabbit testis clone）
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兔睾丸质粒 DNA PCR 扩增图谱
Fig. 4 PCR amplification map of rabbit testis plasmid DNA
图5 克隆目的基因序列与靶基因序列 BLAST 结果
Fig. 5 Cloning of the target gene quence and target gene quence BLAST
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M、1~10. 同图 2（same as Fig. 2）
图 6 引物特异性电泳结果
Fig. 6 Primer-specific electrophoresis results
2.5.2 稳定性 随机抽取1盒试剂盒，将其放入-20 ℃冰箱中冷冻，取出融化；如此反复冻融5、10、15、20次，在 59 ℃的退火温度下进行 PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳结果显示，兔睾丸阳性对照品和正
品兔睾丸均在 326 bp 处出现1条特异性扩增条带，空白对照未出现扩增条带，结果稳定（图 7）。
M. 100bp DNA Ladder 1. 阳性对照品（positive control）
兔睾丸鲜品、干品（rabbit testicles fresh and dry）：2、3.试剂冻融5次（reagent freeze-thaw 5 times） 4、5.试剂冻融10次（reagent freeze-thaw 10 times） 6、7.试剂冻融15次（reagent freeze-thaw 15 times） 8、9.试剂冻融20次（reagent freeze-thaw 20 times） 10.空白对照（blank control）
图 7 试剂稳定性电泳结果感恩节几月几日>欧亨利二十年后
Fig. 7 Reagent stability electrophoresis results
2.5.3 重现性 使用自制的兔睾丸 DNA 检测试剂盒，分别在 2 个实验室，由 2 位技术分析人员，使用相同样品在59 ℃的退火温度下进行 PCR 扩增，琼脂糖凝胶电泳结果显示，兔睾丸阳性对照品和正品兔睾丸均在 326 bp 处出现1条特异性扩增条带，空白对照未出现扩增条带，试剂的重现性好（图 8）。
M. 100 bp DNA Ladder 1. 阳性对照品（positive control） 兔睾丸（rabbit testis）：2~4. 样本 1~3（ sample 1-3） 5. 空白对照（ blank control）
图8 试剂重现性电泳结果
Fig. 8 Reagent reproducible electrophoresis results
3 讨论
“飞禽莫如鸪，走兽莫如兔”，是古人对飞禽走兽类食物营养作用与保健价值的高度评价。《本草纲目》记载：兔肉、兔血、兔肝、兔脑、兔骨、兔睾丸，连兔屎（称为明月砂）皆可入药［8］。兔睾丸能为男性提供激素，有壮阳补肾的功效，可提高男性生殖系统能力；且含有丰富的脂肪，对女性的皮肤有保养作用。兔睾丸作为中成药参雄温阳胶囊的重要原料，其质量直接关系到临床用药安全有效及中医药事业的健康发展，因此，建立兔睾丸真伪的鉴定方法及制定质量标准势在必行。
近年来，分子生物学鉴定方法，由于其具有特异性高、准确性高等优点，被广泛地用于中药材及食品方面的鉴定［9-10］。物种的差异归根结底追溯到基因型的
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