DIR染料标记外泌体⿏体实验
DIR染料标记外泌体⿏体实验
实验说明:
通过DIR染料标记外泌体,通过尾静脉注射DIR-labeled Exosome,24⼩时内观察外泌体在体内的代谢情况。
实验前的准备⼯作:
DIR- Exosome,裸⿏;费力的什么
DIR-Exosome:染料终浓度1uM,外泌体200ug,体积200ul;
Exosome来⾃HEK293⽆⾎清培养基(Umibio,UR51102)条件下获得,通过外泌体提取试剂盒提取(Umibio,UR52121)。实验操作进⾏:
1、通过尾静脉注射200 ug/⽀的DIR- Exosome到裸⿏体内;
Day 1, AM:8:00注射;
2、 ⼩动物活体成像观察:
Day 1, PM:16: 00 ⼩动物活体成像观察,全⾝和颅内(重点)。
Day 2, AM:8:00⼩动物活体成像观察,全⾝和颅内(重点)。
Day 3, AM:8:00⼩动物活体成像观察,全⾝和颅内(重点)。
48⼩时成像结束后,实验结束。
实验结果:
1, 尾静脉注射DIR-Exosome 8⼩时后,⼩动物活体成像检测:
2, 尾静脉注射DIR-Exosome 24⼩时后,⼩动物活体成像检测:
3, 尾静脉注射DIR-Exosome 48⼩时后,⼩动物活体成像检测:
实验结论探讨:
实验结论探讨:
1, 外泌体尾静脉注射⼩⿏后,可穿过⾎脑屏障进⼊脑组织,与⽂献报道基本⼀致;
2, 外泌体尾静脉注射⼩⿏后,荧光信号可以持续时间48⼩时以上,⽐⽂献报道的24⼩时长;
3, 外泌体尾静脉注射⼩⿏后,多个器官/组织中都出现了荧光信号,说明外泌体可以通过⾎液循环到达多个器官/组织。
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