免疫组化实验步骤及配方

免疫组化步骤

1. 多聚甲醛灌流取材，多聚甲醛后固定，30%多聚糖溶液沉糖;

2. 冰冻切片（1d-游泳怎么学 14d脊髓>=20m;14d-28d>=10m;DRGd=10m）

3. 0.01MPBS洗10min3次;

4. 1NHCL暴露抗原30min；

5. 去离子水洗，0.01MPBST洗10min3次；

6. 3%双氧水(0.01MPBS配制)洗10min，灭活内源性HRP；

7. 0.01MPBST洗10min3次；

8. 5%-10%血清封闭30min（0.01MPBST配制）；

9. 一抗过夜，一抗用PBST稀释；

10. 0.01MPBS洗10min3次，二抗3孵育小时；

11. 0.01MPBS洗10min3次，HRP-亲和素3小时；

12. 0.01MPBS洗10min3次，DAB显色12-18min。

免疫组化常用试剂配制

1. 0.1MPB:14.5gNaHPO12HO

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500mLHO

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1.5gNaHPO2HO

242

2. 0.感恩教师节手抄报 1MPBS:500mL0.1MPB

45gNaCl

3. 0.01MPBST:100mL0.01MPBS

10滴Tr孕妇可以吃油桃吗 itonX-100

:盐酸：水=1：10

5.4%多聚甲醛：13.6gKHPO

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3.6gNaOH

40g多聚甲word插入附件 醛

1000mLHO

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注：1).需要60C加热溶解，过滤使用；

2).多聚甲醛每次比需要多称10g，以弥补后面过滤的损失；

3乏味的意思 ).现将多聚甲醛溶于1000mL水中，然后一边加热搅拌一边缓慢加入多聚甲醛的助

溶剂NaOH，待NaOH和多聚甲醛都完全溶解后再加入KHPO，溶后过滤

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备用。

液：以0..1MPB配制，DAB浓度0.05%，HO浓度0.03%。

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注：1).HO临用时再加； 健身器材使用方法

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2).用DAB染后用0.01MPB洗。

7.30%蔗糖：150g蔗糖

500mL4%多聚甲醛

注：可同时沉糖后固定。

8.封闭液：10%山羊血清（做免疫荧光时另加0.1%BSA）。