2023年4月17日发(作者:甲磺酸酚妥拉明)
BCA法测定蛋白质浓度
的方法
Revid by Petrel at 2021
1.根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制
适量BCA工作液,充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。
2.完全溶解蛋白王羲之儿子
标准品,取10微升稀释至100微升,使终浓度为
0.武伦柱
5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但抽烟的男人
是为了
简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。
3.将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20微升加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀
释液补足到20微升。
4.硬笔书法教程
加适当体积样品到96孔板的样品空中,加标准品稀释液到20微升。
5.各孔加入200微升BCA工作液,37℃放置30分钟。
注:也可以在室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度
时,吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。
如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或延长孵育时间。
6. 测定A562,540-595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出蛋白
浓度。
事先配好各个浓度的bsa标准品,step1A液和B液按50:1混合,(比如你要
测2个样品,可以是6个标准曲线点0,0.05,0.1,0.2,0.5,1mg/ml,加上
2个样品,也就是8个孔,做平行就是16孔,那么取A液取情话语录
16*0.2=3.2ml,B
液取64ul混合就ok了)step2每孔加200ul混合液,然后标准曲线孔加入25ul
标准品,样品稀释到合适的比例,也加入25ul(如果图省事的话,比如也可以
加1ul样品,再加24ul水补齐,加样的时候可能不会太准)step337度孵育
30minstep4测od吓人的鬼故事
565,附近也行