岛津LC-20AD液相色谱仪操作规程

更新时间:2023-07-28 15:41:44 阅读: 评论:0

岛津LC-20AD型液相色谱仪操作规程
1.目的
规范岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。
2.范围
适用于岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。
3.职责
质检员对本规程的实施负责。
4.规程
4.1 系统组成:本系统由2个LC-20AD溶剂输送泵(分主/A泵和副/B泵)、SIL-20A自动进样阀、SPD-20A紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。
4.2 准备
4.2.1 准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机
4.3.1 接通电源,依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵
4.3.2 待泵和检测器自检结束后,打开打开色谱工作站,点击按钮“1”,输入用户名:ADMIN。
4.3.3 当SPD-20A发出蜂鸣声后,说明已建立与计算机之间的连接,LC窗口打开。
4.4 参数设定
4.4.1 设置新的分析参数时,请从通过键盘在LC窗口的“Instrument Parameters View”中输入参数(即A、B泵的流速,波长,柱温;柱在线时流速一般不超过1ml/min)
4.4.2 选择File >Save Method File As ,输入方法名称后保存。
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4.4.3 点击“Download”键,将保存好的方法下载
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4.5 更换流动相并排气泡
妈妈的英语怎么说4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
憎恨的反义词4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀360°
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4.5.3 按A/B泵的[purge]键,pump指示灯亮,1min再次按A/B泵的[purge]键
4.5.4 顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀
4.5.5 如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽
4.6 平衡系统
4.6.1 更换流动相并排气泡后,在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数
4.6.2 等度洗脱方式
4.6.2.1 点击“Instrument on/off ”按钮,A、B泵将同时启动,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积的流动相。
4.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
4.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,应重新排气泡。
4.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
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4.6.3 梯度洗脱方式
4.6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件,按4.6.2项下方法平衡系统。
4.6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。
4.7 进样
4.7.1 进样前按软件中[零点校正] 按钮校正基线零点
4.7.2 点击“Single start ”按钮,设置好保存路径并输入试样位置,系统开始自动进样4.7.3 样品采集完毕后,点击“Stop”按钮,接着就会出现一条消息,询问您是否“Abort the current run”, 单击Yes,当前的数据采集就会终止。
4.8 清洗系统和关机
4.8.1 数据采集完毕后,关闭泵,待压力降为0后,将工作流动相换水相,设定流动相比例,冲洗色谱柱
4.8.2 清洗柱
4.8.2.1 C18柱先用95%的水以1ml/min冲洗40min以上,再用90%的甲醇或乙腈冲洗
20min,最后用40%的水冲洗10min
4.8.2.2 Protein PAK60柱先用超纯水冲洗90min以上,再用甲醇或乙腈冲洗40min
4.8.3 清洗完成后,先关闭泵,待压力降至为“0”时,关闭各组件电源,关闭计算机
4.9 填写使用记录。
仪器型号:
日期开机
时间关机
时间
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样品名称仪器
情况
使用人复核人备注
仪器型号:
日期开机
时间关机
时间
样品名称仪器
情况
论语英文使用人复核人备注

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