Oxygraph
液相氧电极使用方法
一、氧电极的基本配置
二、氧电极的准备
三、氧电极测定系统的安装
四、氧电极的校正
五、氧电极敏感性的测试
做卡片
六、样品的测定
七、注意事项
液相氧电极的使用方法
一. 氧电极的基本配置
OXYG1 氧电极控制盒
氧电极控制盒背面
电源插口
电极连接线插口
与计算机通讯的RS232连接口
磁力搅拌器
保险丝
A2 装膜器
S2/P 磁转子
S7A O型圈
S3 反应杯
电极
大学学习心得
氧电极的基本配件
DW1 Electrode unit
氧电极反应室
电极与控制盒连线
A3
S4
S16
盐桥纸
S16－电极清洁剂
S4－电极膜
A3－反应室安装工具
氧电极的基本配件
氧电极的基本配件
控制盒电源
RS232数据线
控制盒与计算机之间的连线
二. 氧电极的准备
1.清洁电极
使用清洁的电极可以获得最好的测定结果，因此，安装电极之前要用清洁剂清洁电极。
电极清洁方法：
（1）用棉棒蘸少许清洁剂，反复擦拭氧电极底部的银极（阳极），直到电极表面的氧化层被擦掉，电极光亮为止。
（2）用蒸馏水冲洗电极，将电极表面的清洁剂清理干净，然后用棉棒吸去电极表面的水分。
注 意！
清洁电极时一定不要
用锋利的器具（如镊子）
划伤电极！
① 在圆形电极的顶部加1小滴电解液。电解液为半饱和的氯化钾溶液。
② 取一块长约为3.5cm、宽约为0.5cm 的长形盐桥纸片覆盖在电解液上，并且至少使一角在电极的凹槽内担当盐桥的作用。然后取一块电极膜覆盖在盐桥纸片上面。所用的簿膜必须无洞、无皱折，不能用手接触。
2.电极膜的安装
③ 将电极的“O”型圈放在装膜器的末端，然后将装膜器垂直于圆形电极的顶部，向下滑动装膜器的外套，推动“O”型圈套在覆有电极膜的电极上。
④ 检查电极膜是否平滑，膜内不能存有气泡。然后在电极凹槽内（银极）加入几滴电解液。
电极膜的安装
三. 氧电极测定系统的安装
A－螺旋调节杆；B－排气孔；C－水浴室；D－电极；
E－反应杯密封圈；F－反应室底座；OUT－出水口；
IN－进水口
1.氧电极系统的安装
电极室是由电极与反应杯，温控水槽整合在一起的，覆有薄膜的电极在反应杯的下面，成为反应杯的底部。
① 将电极室下部的底座逆时针旋转取下。将外部“O”型圈安置在电极外部的凹槽圈内。垂直握住电极室，将电极放入电极室，顺时针旋转底座安装好电极，电极覆有薄膜的阴极（铂极）成为反应杯的底部。
电极反应室安装方法
将电极放在底座上
顺时针旋转底座安装电极
喜耀粤西学校
电极室底座不要拧得过紧，否则将引起电极圆顶上的薄膜过渡伸张，测定期间，当薄膜开始松弛时，将引起信号漂移。
注 意 ！
② 将安装好的电极室安置在控制盒上方的黑色磁力搅拌器上。
③ 用电极连接线将电极与控制盒连接（一端插在控制盒的“INPUT”插口，另一端插在电极的SMB控制器上），为电极提供极化电压。
④ 在反应杯中准确加入一定量的蒸馏水（0.2～2.5ml），然后放入磁转子。
⑤ 连接循环恒温水浴。氧电极对温度较敏感，要使实验在恒温条件下进行，应该使用循环恒温水浴控制反应室的温度，水的流速为6～8 L/min。恒温水浴器中使用的水一定使用去离子水或蒸馏水，防止水质过硬在氧电极的控温槽内形成污垢，影响观察反应杯。（如果实验对温度要求不是很严格，或者实验室内的温度较稳定，可以不连接恒温水浴） 。
连接恒温水浴使用时，仪器要具有良好的接地，否则会干扰氧电极的信号。
2.电极控制盒与计算机的连接
用RS232数据传输线将氧电极控制盒与计算机连接起来。数据传输线的一端接入控制盒背后的RS232 INPUT接口，另一端接到计算机的COM1或COM2端口。电源线连接到控制盒背后的12V插孔上。
3.控制软件的安装
将软件盘插入相应的驱动器，软件即可自动；安装。如果软件不能自动安装，在“开始”菜单中点击“运行”选项，然后运行“Setup”安装程序。
安装完毕后在WINDOWS窗口的桌面上自动生成氧电极图标。当氧电极与计算机用数据传输线连接后，双击氧电极图标，即可进入控制软件的操作界面。
四. 氧电极的校正
移动互联网概念股 在烧杯中加入约50ml的去离子水，充分搅拌使之充分溶入空气中的氧。然后在反应杯中准确加入2ml被空气饱和的去离子水。放入磁转子。
① 建立空气线
点击工具栏上的“Calibrate”，选择下拉菜单中的“Liquid pha calibration”，或直接点击 图标，屏幕出现一个校正窗口
在提示框中输入实验时的温度和大气压，然后点击“OK”进行下一步操作。
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注 意 ！
测定时样品液的温度与校正时去离子水的温度保持一致是非常重要的！
点击“Stirrer Speed”框中的上下箭头调节磁转子为适当的转速（100为最大转速），然后点击“OK”进行下一步操作。
在屏幕记录一条被空气饱和的去离子水中的氧含量信号线。提示框中“Signal”为来自电极的信号；“Rate”为信号的变化速率。当信号线平稳，
将显示“Plateau reached, press OK to…”的提示。
-0.1
点击OK，屏幕上显示建立零氧线的提示。
-0.1
② 建立零氧线
当屏幕上显示“Establish zero Oxygen In the chamber”时，通过反应杯盖的排气孔用注射器加入高浓度的连二亚硫酸钠溶液（现用现配）。然后点击提示框上的“OK”进行下一步操作。
这时屏幕上的踪迹信号线下降，由于反应杯中的氧气与连二亚硫酸钠反应，将溶液中的氧气消耗掉，电极附近的氧气下降为零。理想的电位信号（踪迹信号线）应该为零，但实际上无氧时也总有一些小的残余电流（残余信号）发生。当踪迹信号线稳定后，屏幕上将显示以下提示：
-0.1
12.0
当信号稳定时点击OK，随后显示以下信息：
确定校正无误，点击“Save”保存校正结果。然后显示以下窗口：
点击“OK”，完成校正。
1.取充分搅拌后被空气饱和的水加入反应杯中，启动磁转子进行平衡。然后点击 按钮进行记录，得到记录信号。
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2.点击 关闭磁转子停止搅拌，这时记录信号下降，这是因为靠近电极膜水层的氧被耗尽的缘故（见下图）。
五. 氧电极敏感性的测试
3.重新启动转子，这时记录信号上升，因为在转子的搅拌下，反应杯中的水又重新达到了平衡。记录信号应该稳定在关闭磁转子之前的水平。如果磁转子稳定在一个中间水平，说明转子的转速不够，应该增加转子的转速。如果在测试过程中电极没有反应，很可能是在电极的准备过程中有问题，或者电极与控制盒的连接有问题。
六. 样品测定
（1）样品测定 在测定前，应该先将盛有样品的烧杯放在与测定温度相同的水浴中适应一段时间，然后把样品液加入到反应杯中，放入转子，在工具栏中点击 ，启动转子并调节转子的转速，搅动测定溶液，当温度恒定后，点击 开始记录测定信号，即可得到一条放氧
速率或耗氧速率的踪迹曲线。点击 停止记录，测定完毕。
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（2）样品放/耗氧速率的计算
① 根据试验要求选取一段斜率比较稳定的记录结果计算斜率。点击工具栏的 图标计算速率。在横坐标（时间轴）下方显示出两个黑色的▲标记，用鼠标的左键拖住左边的▲标记，左右移动▲标记选取参与计算的曲线位置，拖住右边的▲标记，左右移动确定参与计算曲线的时间区间。
选取参与计算的时间段后，点击鼠标右键，显示以下窗口：
选中“Add Rate To Table”，显示 “Add Rate To Table? ”对话框
点击“Add”，所选择时间段氧的变化速率被添加到变化速率表（Rates of Change Table）。
点击“Normalize factor”，显示“Dialog”窗口无边落木
在“Dialog”窗口中输入相应的校正因子（样品重量或面积及反应杯中样品液的体积），便可
将氧的变化速率单位自动换算成标准的光合速率或呼吸速率单位。
蓝色框内的数据为输入校正因子后计算出的光合/呼吸速率
七. 注意事项
1.进行电极的校正时，一定要盖上反应杯的盖子，特别是做无氧线时更应当注意。
2.转子的转速影响到信号线的稳定性，对于不同的测定条件应当根据信号线是否平稳调节转子的转速。
3.测定切碎的组织时，组织的碎块不宜过大，并且碎块大小要尽量均匀一致，否则信号线不稳定。
4.氧电极对温度变化非常敏感，测定时需维持温度恒定。如果反应杯中出现气泡，则表明溶液尚未与测试条件下的环境温度达到平衡。
5.反应杯中不应有气泡，否则会造成信号不稳，有经常性的随机干扰，使记录线扭曲。因为气泡中的含氧量比水中高20多倍，反应杯中有气泡时溶液中的氧就会扩散到气泡或气
泡中的氧扩散到溶液中，结果会造成电极反应迟纯。空白测定时，信号会出现缓慢漂移。
6.电极使用一段时间后，在阳极（银极）上会形成一层氧化膜，使电极的灵敏度下降，需要用清洁剂清洁阳极。清洁电极时，用棉棒蘸少许清洁剂，于银极上来回擦拭，直到银极洁亮为止，然后用蒸馏水冲洗干净。
注意：清洁电极时一定不要用锋利的器具划伤电极。
7.操作过程中必须注意实验中空气组成的变化和干扰气体（H2S、SO2、CO2等）的影响，以及气压的变化和温度的突变。测定前还应注意洗净反应杯，以消除遗留在反应杯中的霉菌或细菌的影响。
8.由于反应杯中的溶液体积要参与耗/放氧速率的计算，因此每次测定时一定要准确加入定量的液体，如果要在液体中加入固体样品，加入样品后，调节电极室上的旋钮，使溶液刚好进入旋钮中的小孔中，使反应杯中无气泡。不可将旋钮旋得过深使反应杯中的溶液从小孔中溢出而影响测定液的体积。
9.用注射器向反应杯中加溶液（小样品、抑制剂或激活剂）时，应注意针头和注射器中的
样品溶液无气泡。使用的注射器针头不要过长，以免损坏电极膜。
