1 打开 Tune 软件 2 界面及图标介绍 界面及图标介绍
虫草养殖
(1)
ON、Standby、Off,启动扫描时选择 On,待机选择是 Standby
(2)
干巴爹是什么意思打开 tune 方法
(3) (4)
保存 tune 方法 六通阀的切换,只用 a,1 是 waste,2 是 inject
有颜色的成语(5) (6)职业道德包括
在校园质谱注射泵,可以更改流速 三个灯都为绿色是正常状态,第 1 灯:指示仪器通讯是否正常,第 2
个灯:指示仪器硬件状态是否正常,第 3 个灯:指示仪器的性能状态是否正常。典型的变黄 原因有:校正过期。建议重新校正,校正完成之后可恢复绿色。将鼠标放在上述的灯上即可 显示变黄的信息提示。
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Instrument control 各项参数
3.1 Scan parameters
(1) Scan type:分为 Full MS-SIM 和 AIF-MS/MS; Full MS:一级全扫,要求 Last mass≤15*first mass SIM:当 full mass 的扫描范围小于 50 个质量数时,自动变为 SIM。 AIF:所有的离子全部碎裂,没有母离子的选择性,现在软件无法识别二级子离子是由哪个 母离子产生的,所以暂时不用这种方法。 MS/MS:设定 center/width,或者 scan range,这里设置的是母离子的质荷比; (2) Scan range:参考 scan type,scan type 中设置的是 full scan 时,这里设置全扫的质荷 比范围,如果 scan type 中选择的是 MS/MS,此处应设置子离子的扫描范围。 (3) Fragmentation:分为 source CID 和 NCE,一般做 full scan 时此项是关闭状态 Source CID:源内裂解,主要用于打开二聚体等非共价结合的键。 NCE:归一化碰撞能量。仪器校正后,每个特定质荷比的离子都有一个对应将其打碎的能量 值,做小分子设为 35; (4) Resolution:分辨率代表仪器将不同质量数离子分开的能力,QE 可以达到 14 万,最 低分辨率为 1750。 QE 中一级扫描的分辨率一般设为 70,000, 二级分辨率设为 17,500。 (5) Polarity:正负扫描模式的选择。 (6) Micro scan:将几张质谱图叠加,一般用 1。 (7) Lock mass:内标校正时使用,常用 m/z 455.120025 作为内标物。 (8) AGC target:Orbitrap 容纳的离子数量,因为进入 Orbitrap 中的离子都带电荷,进入 之后会相互干扰(这种现象称之为空间电荷效应) ,离子数量过多,会影响质荷比准 6 5 确度,通常一级扫描设为 1*10 ,
二级设为 1*10 。 (9) Max injection time: MS1:100ms,MS2:50ms。
(10) Hot link:选中之后,修改参数只需要点击 enter 键就可以,如果不选中,点击 enter 之后还要再点击 apply,才能使用修改后的参数。 3.2 HESI source:源区参数决定数据好坏、质量,离子信号强度;测试爱情游戏
Sheath gas flow rate:帮助溶剂气化,校正时用 5~15,做样品时设为 35~45; Aux gas flow rate:气帘气,校正一般为 0,做样品时设为 10~15; Sweep gas flow rate: 吹扫气, 流动相中加入不挥发性盐时开启此路气体, 设为 1~2; Spray voltage:正离子模式 3.5~4.5KV、负离子模式 2.5~3.5KV Spray current:ESI 喷雾离子所形成的电流反馈值,不能设置;换 APCI 源后该处电 会自动变为 Discharge Current,可设置; (6) Capillary temperature: 流速越高, 温度越高, 校正时, 设为 275℃, 当链接色谱柱时, 设为 320℃; (7) S-lens RF level:一般为 50~60 (8) Heater temperature:离子源的加热温度,当链接色谱柱时,设为 200~300℃,校正时 设置为 0。 (9) Source Auto Defaults:根据流速自动调节参数,自动调节的气体流速偏大,一般不建 议使用。 3.3 实时采集数据 Acquisition
(1) (2) (3) (4) (5)
(1) (2) (3) (4)
File in u:上一次采集的数据 Destination file:这次采集的数据保存路径及名称 Acquisition time :连续采集 On start:两个选项,don`t wait:点击 start 就开始记录;wait for contact closure:需
要有触发开始的信号(比方液相色谱的自动进样器等)才开始数据采集; 4 Tune
(1) TIC:对一级谱图中总离子流图进行调谐,得到最佳的 tune 参数。 (2) Mass:对某一特定质荷比的离子进行调谐。 (3) 点击 Tune,自动调节离子源参数,使质谱信号最强。 (4) HCD Mode:开启 HCD 对二级碎片进行调谐优化。 5 Mass Traces
(1) Scan NCE 和 Scan CE 一般是输入感兴趣的碎片离子的 m/z,如输入碎片离子的 m/z 138,选中 scan NCE (scan CE)点击 start,会得到能够产生 138 碎裂能的变化趋势,
从变化趋势中可以得到产生 m/z 138 这个碎片离子最佳的碎裂能量,使其信号最强 的 NCE(CE)值。 (2) Scan in-Source CID energy:也是同样可以对源内裂解的能量做一个优化 6 质量轴校正 Calibration (1)开扫描 开扫描 点击下图中的开扫描按钮, 点击下图中的开扫描按钮,打开扫描
(2)连接管路 安照下图中的管路将注射泵与离子源连接,通入校正液
八爪鱼英语(3) 设置扫描参数 按照下图设置扫描参数 按照下图设置扫描参数, 扫描参数,