毕赤酵母诱导表达实验步骤(1)

更新时间:2023-07-23 14:27:57 阅读: 评论:0

BMGY的配制 (每200 mL)
Yeast extract      2 g
Peptone          4 g
童话K3PO4(pH 6.0)  20 mL
丙三醇          2 mL
狮子女水瓶男定容至180 mL,121,灭20 min。使用前再加入
10*YNB        20 mL(10%)(过滤除菌)
生物素          0.4 mL(0.02%)(过滤除菌)
加入后,用紫外照射10 min左右再接菌。
BMMY的配制 (每200 mL)
Yeast extract      2 g
Peptone          4 g有趣的英语小故事
K3PO4(pH 6.0)  20 mL
幸舍定容至180 mL,121,灭20 min。使用前再加入
10*YNB        20 mL(10%)(过滤除菌)
生物素          0.4 mL(0.02%)(过滤除菌)
甲醇            0.5%
加入后,用紫外照射10 min左右再接菌。
10*YNB的配制描写冬天的
酵母基础氮源培养基  3.4 g
硫酸铵              10 g
双蒸水              80 mL
定容至100 mL,过滤除菌(用0.22 μm滤膜过滤)。
集体合同毕赤酵母诱导表达
1.梦见和爱人吵架配BMGY和BMMY灭菌
2.使用前向BMGY按比例加入生物素、10*YNB,紫外照10 min。
3.接菌于BMGY,250 rpm,28℃摇24 h
4.向BMMY中按比例加入生物素、10*YNB、甲醇,紫外照10 min。
5.将含有菌液的BMGY转移至50 mL离心管,4℃ 5000 rpm 离心5 min,弃上清。
6.用BMMY将沉淀菌体重悬,倒回瓶中,250 rpm,28℃,摇3 d。每24 h补一次甲醇。

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