首页 > 美文阅读

实验室常用培养基的配制方法

更新时间:2023-07-23 14:13:23 阅读： 评论：0

实验室常用培养基的配制方法
酸菜汆白肉
Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)
组份浓度  100 mg/ml Ampicillin
配制量    50 ml
委托单
配制方法  1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。
            2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
            3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌。
            4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)
组份浓度  24 mg/mL IPTG
配制量    50 mL
配制方法  1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。
            2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
            3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌。
            4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保存。
X-Gal (20 mg/ml)
组份浓度  20 mg/ml X-Gal
配制量    50 ml
配制方法  1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。
            2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50 ml。
            3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光保存。
LB培养基
组份浓度  1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨)，0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl
配制量1 L
配制方法  1.称取下列试剂，置于l L烧杯中。
Tryptone
10 g
Yeast Extract
5 g
NaCl
10 g
            2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
            3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
            4.加去离子水将培养基定容至1 L。
            5高温高压灭菌后，4℃保存。
1.2%(W/V)
Tryptone
2.4%(W/V)
Yeast Extract
0.4%(V/V)
Glycerol
17mM
KH2PO4
72mM
K2HPOa
TB培养基
组份浓度
配制量    1L
配制方法  1.配制磷酸盐缓；中液(0.17 M KH2PO4，0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解2.31 g KH2PO4和l2.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100 ml，高温高压灭菌。
            2.称取下列试剂，置于l L烧杯中。
拱拱
Tryptone
12 g
Yeast Extract
24 g
Glycerol
4 m
            3.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
            4.加去离子水将培养基定容至1 L后，高温高压灭菌。
            5.待溶液冷却至60℃以下时，；加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.4℃保存。
SOB培养基
组份浓度
红外线体温计
2%(W/V)
Tryptone
0.5%(W/V)
Yeast Extract
0.05%(W/V)
NaCl
2.5mM
KCl
10 mM
MgCl2
配制量1 L
配制方法  1.配制250 mMKCl溶液。
在90 ml的去离子水中溶解l.86 gKCl后，定容至100 ml。
            2.配制2 M MgCl2溶液。
在90 ml去离子水中溶解19 g MgCl2后，定容至100 ml，高温高压灭菌。
            3.称取下列试剂，置于l L烧杯中。
Tryptone
20 g
Yeast Extract
5 g
NaCl
0.5 g
            4.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
            5.量取10 m1 250 mMKCl溶液，加入到烧杯中。
            6.滴加5 N NaOH溶液(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。
            7.加入去离子水将培养基定容至l L。
            8.高温高压灭菌后，4℃保存。
            9.使用前加入5 ml灭菌的2 M MgCl2溶液。
SOC培养基
组份浓度
2%(W/V)
Tryptone
0.5%(W/V)
Yeast Extract
0.05%(W/V)
NaCl
2.5 mM
KCl
10 mM
MgCl2
20 mM
Gluco
配制量    100 mL
配制方法  1.配制l M Gluco溶液。
将18 g Gluco溶于90 ml去离子水中，充分溶解后定容至100 ml。用0.22    µm滤膜过滤除菌。
            2.向l 00 ml SOB培养基中加入除菌的1 M Gluco溶液2 ml，均匀混合。
3.4℃保存。
RM培养基
组份浓度
1%(W/V)
Yeast Extract
0.2%(W/V)
KH2PO4
2%(W/V)
Gluco
配制量    100 mL
配制方法  1.配制50% Gluco溶液。
将200gGluco溶于300 ml去离子水中，充分溶解后定容至400 ml。用0.2土地保护2µm滤膜过滤除菌。
            2.向96 ml RM培养基中加入除菌的50% Gluco溶液4ml，均匀混合。
3.4℃保存。
抗生素的贮存溶液及其工作浓度
抗生素
贮存液*1
工作浓度
浓度保存条件
严紧型质粒松弛型质粒
氨苄青霉素
羧苄青霉素
氯霉素
卡那霉素
链霉素
四环素*2
    50 mg/ml(溶于水)      -20℃
    50 mg/mL(溶于水)      -20℃
    34 mg/mL(溶于乙醇)    -20℃
    10 mg/mL(溶于水)      -20℃
    10 mg/mL(溶于水)      -20℃
    5 mg/mL(溶于乙醇)    -20℃
    20 µg/ml        60 µg/ml
    20 µg/ml        60 µg/ml
    25 µg/ml        l70 µg/mL
    10 µg/ml        50 µg/ml
    10 µg/ml        50 µg/ml
    10 µg/ml        50 µg/mL
*1以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22 µm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应保存于不透光的容器中。
*2镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基(如LB培养基)。
SDS-PAGE浓缩胶(5%Acrylamide)配方表
各种组份名称
各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量
1 m1    2 m1    3 m1  4 ml    5 ml    6 m1  8 m1    10 mL
    H2O
    30%Acrylamide
1.0MTris-HCl(pH6.8)
    10%SDS
    10%过硫酸铵
    TEMED.
    0.68    1.4      2.1    2.7    3.4      4.1    5.5    6.8
    0.17    0.33      0.5    0.67    0.83    1.0    1.3    17
    0.13    0.25      0.38  0.5    0.63    0 75  1.0    l.25
    0.01    0.02      0.03  0.04    0.05    0 06  0.08    0.1
    0.01    0.02      0.03  0.04    0.05    0.06  0.08    0.1
    0.001  0.002    0.003  0.004  0.005    0.006  0.008  0.01
SDS-PAGE分离胶配方表
各种组份名称
各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量
5m1  10m1  15m1  20 ml  25m1  30m1  40m1  50 ml
6%Gel
H2O
30%Acrylamide
1.5 MTris-HCl(pH8.8)
10%SDS
10%过硫酸铵
TEMED
8%Gel
H2O
30%Acrylamide
抑郁症的病因1.5MTris-HCl(pH8 8)
10%SDS
10%过硫酸铵
TEMED
10%GeL
H2O
30%Acrylamide
1.5 MTris+HCl(pH8.8)
10%SDS
10%过硫酸铵
TEMED
12%GeL苹果怎么呼叫转移
H2O
30%Acrylamide
1.5 MTris-HCl(pH8.8)
10%SDS
10%过硫酸铵
TEMED
15%Gel
H2O
30%Acrylamide
1.5MTris-HCl(pH8.8)
拔河英语
10%SDS
10%过硫酸铵
TEMED
      2.6    5.3    7.0    10.6    13.2    15.9    21.2    26.5
      1.0    2.0    3 0    4.0    5.0    6.0    8.0    10.0
      1.3    2.5    3.8    5.0    6.3    7.5    10.0    12.5
      0.05  0.1    0.15    0.2    0.25    0.3    0.4    0.5
0.      0.05  0.1    0.15    0.2    0.25    0.3    0.4    0.5
0.004 0.008 0.01      0.004  0.008  0.012  0.015  0.02    0.024  0.032  0.04
      2.3    4.6    6.9    9.3    11.5    13.9  18.5    23.2
      1.3    2.7    4.0    5.3    6.7      8.0    10.7    13.3
      1.3    2.5    3.8    5.0    6.3      7.5    10.0    12.5
      0.05  0.1    0.15  0.2    0.25    0.3    0.4      0.5
      0.0.05  0.1    0.15  0 2    0.25    0.3    0 4      0.5
      0.003  0.006  0.009  0.0l2  0.015    0.018  0.024    0.03
        1.9    4.0    5.9    7.9    9.9    14.9    15.9    19.8
        1.7    3.3    5.0    6.7    8.3    10.0    13.3    16.7
        1.3    2.5    3.8    5.0    6.3    7.5    10.0    12.5
        0.05  0.1    0.15  0.2    0.25    0 3    0.4    0.5
        0.05  0.1    0.15  0.2    0.25    0.3    0.4    0.5
        0.002  0.004  0.006  0 008  0.01 0  .01 2    0.0l 6  0.02
        1.6    3.3    4.9    6.6    8.2      9.9    13.2    16 5
        2.0    4.0    6.0    8.0    10.0    l2.0    16.0    20.0
        1.3    2.5    3.8    5.0    6.3      7.5    10.0    12.5
        0.05  0.1    0.15  0.2    0.25    0.3    0.4    0.5
        0.05  0.1    0 15  0.2    0.25    0.3    0.4    0.5
        0.002  0.004  0.006  0.008  0.01    0.012  0.016  0.02
        1.1    2.3    3.4    4.6    5.7      6.9    9.2    11.5
        2.5    5.0    7.5    10.0    12.5    15.0  20.0    25.0
        1.3    2.5    3.8    5.0    6.3      7.5    10.0    l2.5
        0.05  0.1    0.15    0.2    0.25    0.3    0.4    0.5
        0.05  0.1    0.15    0.2    0.25    0.3    0.4    0.5
        0.002  0.004  0.006  0.008  0.01    0.012  0.016  0.02

本文发布于:2023-07-23 14:13:23，感谢您对本站的认可！

本文链接：https://www.wtabcd.cn/fanwen/fan/82/1112787.html

版权声明：本站内容均来自互联网，仅供演示用，请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系，我们将在24小时内删除。

上一篇：Oraclep324查询练习及答案
下一篇：Hive中正则表达式替换函数regexp_replace和正则表达式解析函数regexp_。。。
标签：浓度   组份   溶解   溶液   去离子水
相关文章
留言与评论（共有 0 条评论）
   
验证码：
推荐文章
排行榜
热门标签
Copyright ©2019-2022 Comsenz Inc.Powered by © 专利检索| 网站地图