兽用碱性恩诺沙星粉的制备和稳定性研究
林章秀厦门惠盈动物科技有限公司福建厦门361023
摘要为提高恩诺沙星的溶解度，选用恩诺沙星和无水碳酸钠通过混合法制备10%恩诺沙星可溶性粉。以水中溶解度及含量均匀度为评价指标对混合时间进行确定，并通过稳定性试验来确定恩诺沙星可溶性粉的有效期。试验结果表明：恩诺沙星与无水碳酸钠混合时间为10m i n时制得的碱性恩诺沙星粉，具有颜色均匀、性质稳定、水溶液澄清的特征，其在水中的溶解度为10.0g/100m L。用纯铝袋包装、密闭保存24个月，外观和性状、色泽无明显改变,pH值无明显变化。但是纯铝包装袋会使含水量由1.5%增加至2.5%，恩诺沙星含量由10.0%下降至9.6%。虽然如此，该恩诺沙星含量下降并未超过标示量百分含量的10%。含水量变化和恩诺沙星含量仍均符合规定，因此有效期可暂定为2年。
关键词碱性恩诺沙星粉稳定性试验溶解度含量均匀度有效期
文献标识码:A文章编号:1003-4331(2022)03-0012-04
St udy on preparat i on and st abi l i t y of vet eri nary bas i c enrof l oxaci n pow der
Li n Zhangxi u
(X i am en H ui yi ng A ni m alTechnol ogy C o.Lt d.,Fuj i an361023)
A bs t ract I n or der t o i m pr ove t he s ol ubi l i t y ofenr of l oxaci n,10%enr of l oxaci n s ol ubl e powder was pr epar ed by m i xi ng enr of l oxaci n and anhydr ous sodi um car bonat e.The sol ubi l i t y and cont ent uni f or m i t y of enr of l oxaci n i n wat er wer e us ed as eval uat i on i ndexes t o det er⁃m i ne t he m i xi ng t i m e,and t he val i di t y per i od of enr of l oxaci n sol ubl e powder was det er m i ned by s t abi l i t y t es t.The r es ul t s s how ed t hat t he bas i c enr of l oxaci n pow der was pr epar ed when enr of l oxaci n and anhydr ous s odi um car bonat e wer e m i xed f or10m i nut es,t he pow⁃der has t he char act er i st i cs of uni f or m col or,s t abl e pr oper t i es and cl ear aqueous sol ut i on.I t s sol ubi l i t y i n wat er i s10.0g/100m L.The r esul t s s howed t hat t he appear ance,col or and pH val ue had no si gni f i cant change af t er24m ont hs s t or age i n pur e al um i num bag.
H owever,t he wat er cont ent of pur e al um i num packagi ng bag i ncr eas ed f r om 1.5%t o2.5%,and t he cont ent of enr of l oxaci n decr eas ed f r om10.0%t o9.6%.H owever,t he cont ent of enr of l oxaci n di d not decr ea by m or e t han10%of t he l abel ed cont ent.The change of wat er cont ent and t he cont ent of enr of l oxaci n st i l l m eet t he r equi r em ent s,s o t he val i di t y per i od can be t ent at i vel y det er m i ned as2 year s.
K ey w ords Bas i c enr of l oxaci n pow der St abi l i t y t est Sol ubi l i t y Cont entuni f or m i t y Ter
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m ofval i di t y
恩诺沙星也叫做乙基环丙沙星，药物是属于喹诺酮类的抗生素，是指定为动物的专用药物，属于广谱的杀菌药。主要是对支原体有比较强的抗菌作用，也对大肠杆菌、克雷伯杆菌、沙门氏菌、变形杆菌、嗜血杆菌以及金黄色葡萄球菌、溶血性巴氏杆菌有一定抗菌作用。对绿脓杆菌、链球菌作用较弱，对厌氧菌作用微弱。对敏感菌有明显的抗菌后效应。但恩诺沙星难溶于水，临床应用时，很容易造成药物损失，增加了养殖成本。为提高恩诺沙星溶解度，本试验利用无水碳酸钠与恩诺沙星通过混合法制备碱性恩诺沙星粉，并进行稳定性试验，为该制剂的临床应用提供试验依据。
1材料和方法
1.1主要药品与试剂恩诺沙星(浙江国邦药业，批号151015-10，含量99.0%)；无水碳酸钠(唐山三友化工股份有限公司，批号180109)；恩诺沙星对照品(中国兽医药品监察所，批号H0081206，含量99.9%)；乙腈为色谱纯，磷酸、三乙醇胺均为分析纯，购自西陇科学股份有限公司；水为超纯水，实验室自制。
1.2仪器和设备电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司，型号M S105D U)；超声波清洗器(天津市东康科技，型号D S-3120)；实验型pH计((雷磁)上海仪电科学仪器股份有限公司)；电热恒温干燥箱(上海精宏实验设备有限公司，型号D H G-9247A),；高效液相色谱仪(上海伍丰科学仪器有限公司，型
号LC-100)；电子秤(厦门懿恒电子有限公司，型号TC S-150)；振荡筛(常州市范进干燥设备厂，型号10022);V型高效混合机(常州市范进干燥设备厂，型号V-1000)。
1.3碱性恩诺沙星粉制备按质量比M(恩诺沙星):M(无水碳酸钠)=1:9，称取原辅料，进行过筛。过筛顺序为先恩诺沙星，后无水碳酸钠；筛网目数为60目。过筛后的物料投入V型混合机中进行混合(总物料体积应为混合机总容积的30%~70%)[1]。混合时间10m i n，混合结束后采用随机取样法，在混合粉体的不同部位随机取10份样品，进行含量均匀度测定，并以此为评价指标对混合时间进行验证。另
取样品，进行水中溶解度、1%水溶液pH测定。产品制备3批次，批号分别为180301、180302、180303。
1.4碱性恩诺沙星粉检测
1.4.1碱性恩诺沙星粉含量均匀度的测定称取碱性恩诺沙星粉样品10份，按恩诺沙星粉(水产用)[2]质量标准进行含量检测，测定以标示量为100的相对含量X，求其均值X和标准差S，以及标示量与均值之差的绝对值A(A=100-X)。若A+
怎么种黄豆2.2S≤15.0，则供试品的含量均匀度符合规定[3]。
1.4.2碱性恩诺沙星粉溶解度的测定分别称取碱性恩诺沙星1.00g、
2.00g、
3.00g、
4.00g、
5.00g、
6.00g、
7.00g、
8.00g、
9.00g、10.00g、11.00g、12.00g，分别置于100m L的容量瓶中，加入适量纯化水(25±2℃)，定容，每隔5m i n强力振摇30s；观察溶解情况，观察30m i n，当看不见恩诺沙星颗粒时，即视为完全溶解[3]。
1.4.3碱性恩诺沙星粉1%水溶液pH测定称取3批次碱性恩诺沙星粉各1.00g，加入100m L纯化水，搅拌使溶解，按溶液pH检测方法进行检测，对检测结果取平均值。财务工作目标
1.5碱性恩诺沙星粉稳定性试验配制3批恩诺沙星与无水碳酸钠(1:9)样品，混合10m i n，其中1批进行影响因素试验，取3批进行加速试验和长期稳定性试验[2]。
1.5.1影响因素试验取1批碱性恩诺沙星粉样品，用纯铝袋包装进行试验。(1)高温试验：置于60℃恒温箱中;(2)高湿试验：置于25℃、相对湿度9
2.5%的恒温恒湿箱中;(3)强光照射试验：置于照度为4000Lux的光照箱中。
每项试验期为10d，于第5d、第10d取样，观察外观和性状，检测pH值、水分及恩诺沙星含量。考察结果与第0d的检测结果进行比较，进行统计分析，数据以平均值表示。
1.5.2加速试验碱性恩诺沙星粉样品取3批，用纯铝袋包装，放置在恒温恒湿箱中，设置温度40℃、相对湿度75%，放置6个月。在第1、2、3、6月时取样，检测外观与性状、水分、pH值、恩诺沙星含量。检测结果分别与第1d的检测结果进行比较，进行统计分析，结果以平均值表示。
1.5.3长期稳定性试验碱性恩诺沙星粉样品取3批，用纯铝袋包装，在25℃、相对湿度60.0%的条件下遮光密封保存24个月，分别于第3、6、9、12、18、24个月月末取样1次，检测外观性状、色泽、pH值、水分及恩诺沙星含量变化。恩诺沙星含量测定采用H PLC法，色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.025m oL/L磷酸溶液(用三乙醇胺调节pH值至3.0)-乙腈(83:17)为流动相；进样量为10
μL；检测波长为278nm；流速为1.0m L/m i n。理论塔板数按恩诺沙星峰计算不低于2500。分别与第1d的检测结果进行比较。
2结果与分析
2.1碱性恩诺沙星粉含量均匀度结果碱性恩诺沙星粉通过混合机混合10m i n,3批次的A+2.2S数值都小于15，含量均匀度符合兽药典要求，因此，以恩诺沙星与无水碳酸钠1:9混合10m i n的生产工艺合理。见表1。
表1含量均匀度结果
2.2碱性恩诺沙星粉溶解度的测定结果当100m L水中的碱性恩诺沙星为10.00g时，溶液无可见颗粒，视为完全溶解；而当碱性恩诺沙星粉为11.00g时，还有可见颗粒，视为不完全溶解(见表2)。因此，确定该碱性恩诺沙星溶解度约为10.00g/ 100m L(不完全精确)，完全能满足对于需要通过加药器给药的养殖场。
表2溶解度测定结果
绑螃蟹2.3碱性恩诺沙星粉1%水溶液pH测定结果由
项目
不同批号结果
190301190302190303含量均值(%)100.899.8100.3
标示量与均值
之差的绝对值A
含量均匀度
2.1
3.0 2.4
标准差(S)
A+2.2S
结果判定
0.9
4.1
符合规定
0.7
4.5
符合规定
1.0
4.6
符合规定
称取量
(g)溶解情况
批号190301批号190302批号190303
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
9.00
10.00
11.00
12.00
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
几乎溶解
不完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
大学英语六级报名官网完全溶解
完全溶解
完全溶解
几乎溶解
不完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
完全溶解
几乎溶解
不完全溶解
表3测定结果可知：碱性恩诺沙星粉1%水溶液的pH在11.12~11.25。
表31%水溶液pH测定结果
2.4稳定性试验结果由表4可知：碱性恩诺沙星粉在高温、高湿、强光照射条件下放置时，外观和性状、pH均无明显变化；水分逐渐升高，恩诺沙星含量逐渐下降。
由表5可知：在加速试验整个过程中，碱性恩诺沙星粉的外观、pH值基本无变化，水分随时间延长逐渐升高，恩诺沙星含量随时间延长逐渐降低。
由表6可知：样品存放2年期间，外观性状未发生明显改变,pH值有降低趋势；水分由1.5%增加至2.5%；恩诺沙星含量由10.03%下降至9.62%，含量下降未超过标示量百分含量的10%，符合规定。说明该碱性恩诺沙星可溶性粉配方及工艺科学、合理、
简单易操作，产品质量稳定，有效期暂定2年。
3结论
经过前期小样测试，可以确定该配方比例为质
量比M(恩诺沙星):M(无水碳酸钠)=1:9，碱性恩诺
沙星粉的含量规格为10%。
稳定性试验，是考察药物随着温度、湿度、光线
的变化，放置不同时间变化的规律，为兽药的生产过
程、包装材料、保存期、运输条件提供了科学依据，可
确定产品的有效期限[4]。兽药的有效期，是衡量药物稳定性的重要指标，一般指的是在(25±2)℃、相对湿
度(60%±10%)条件下，当药物含量降解至标示量的
90%时所需要的时间[5]。本试验中，包装样品用的纯铝袋，具有很好的遮光、防潮性能，密封性好。用该纯铝袋分装碱性恩诺沙星粉，密封保存24个月，其外观和性状、pH值均无明显改变，水分和恩诺沙星含量略有变化，但检测结果合格、均符合兽药典的要
项目
不同批号测定结果190301190302190303
pH11.2211.1211.25
表4碱性恩诺沙星粉影响因素试验结果(n=1)
试验项目保存条件放置时间(d)外观性状pH值水分(%)恩诺沙星含量(%)
强光照射试验高温试验
高湿试验4000Lux
60℃
25℃、
相对湿度
92.5%
5
10
5
10
5
10
类白色粉末
无变化
无变化
类白色粉末
无变化
无变化
类白色粉末
无变化
无变化
11.20
工商登记信息查询网
11.17
我的老师开头11.13
11.20
11.15
11.09
11.20
11.14
11.03
1.5
1.5
1.6
1.5
1.6
1.6
1.5
1.8
2.0
10.03
9.85
9.78
10.03
9.82
9.70
10.03
9.92
9.90
表5碱性恩诺沙星粉加速试验结果(n=3)
保存条件放置时间(月)外观性状pH水分(%)恩诺沙星含量(%)
40℃、相对湿度75.0%0
1
2
3
6
类白色粉末
无变化
无变化
无变化
无变化
11.20
11.15
11.10
11.04
11.02
1.5
1.5
1.6
1.7
1.8
10.03
9.98
9.71
9.63
9.46
表6碱性恩诺沙星粉长期稳定性试验结果(n=3)
保存条件放置时间(月)外观性状pH水分(%)恩诺沙星含量(%)
25℃、相对湿度60.0%
3
6
9
12
18
24
类白色粉末
无变化
无变化
无变化
无变化
无变化
无变化
11.20
11.18
11.16
11.16
11.13
11.10
横死11.05
1.5
1.5
1.6
1.7
1.8
2.1
2.5
10.03
9.90
9.75
9.70
9.74
9.68
9.62
求，因此，有效期可暂定为2年。
该碱性恩诺沙星可溶性粉配方合理、工艺科学，简单易操作，产品质量稳定，可以进行规模生产。
参考文献:
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年版.北京：中国农业出版社,2017.[3]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典：一部.2015年
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[J].中国药学杂志,2014,49(20):1867-1870.
兽药残留分析中样品前处理技术综述
袁匀周宁县狮城镇畜牧兽医站福建周宁355300
摘要兽药残留样品前处理对兽药分析技术至关重要，文章简要介绍7种兽药残留样品前处理技术：液-液萃取、固相萃取、基质固相分散萃取、磁性固相萃取、免疫亲和色谱、超临界流体萃取、Q uEC hER S方法。
关键词兽药残留样品前处理分析方法
文献标识码:A文章编号:1003-4331(2022)03-0015-02
R evi ew of s am pl e pre-t reat m ent i n anal ysi s of vet eri nary drug res i due
Y uan Y un
(A ni m alH us bandr y and V et er i nar y St at i on i n Shi cheng Tow n,Zhouni ng Count y,Fuj i an355300)
A bs t ract The pr e-t r eat m ent of vet er i nar y dr ug r es i due sam pl es i s ver y i m por t ant t o vet er i nar y dr ug anal ys i s t echnol ogy.The ar t i cl e br i ef l y i nt r oduces7ki nds of vet er i nar y dr ug r esi due s am pl e pr e-t r eat m ent m et hods:l i qui d-l i qui d ext r act i on,s ol i d pha ext r act i on, m at r i x s ol i d phas e di s per s i on ext r act i on,m agnet i c s ol i d phas e ext r act i on,i m m unophi l i ci t y A nd chr om at ogr aphy,s uper cr i t i cal f l ui d ex⁃t r act i on,Q uEChE R S m et
hod.
K ey w ords V et er i nar y dr ug r es i dues Sam pl e pr e-t r eat m ent A nal yt i calm et hods
兽药残留不仅对人体有害，还会造成生态毒性。保证畜禽产品的安全，离不开可靠的兽药残留分析技术，兽药残留分析技术中至关重要的步骤便是兽药残留样品前处理，本文对已报道的兽药残留前处理技术进行简要综述。
1液-液萃取
液-液萃取(LLE)是最常见的纯化方法。它可用有机溶剂从溶液中提取出分析物，或者从有机相或水相提取物中除去干扰物。液-液萃取成本低，无需特定的试验设备，不足之处是在萃取过程中会乳化、有机溶剂的消耗量大。罗瑞涟[1]建立了盐析液液微萃取-超高效液相色谱-串联质谱方法，检测牛奶中4种四环素类兽药残留，其回收率为81.71%~ 109.06%，相对标准偏差均小于8%。
2固相萃取
固相萃取(SPE)是一种利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理的微量样品处理技术。与液-液萃取相比，具有以下优点：采用高效、高选择性吸附剂(固定相)，可以净化小体积样品，处理过程中不会乳化，不需要大量不混溶溶剂，可以明显降低溶剂的使用量，简化样品，降低成本[2]。彭英
等[3]采用固相微萃取与高效液相色谱相结合，建立了牛乳中4种典型磺胺类药物残留的分析方法，平均加标回收率为68.2%~100.3%。
3基质固相分散萃取
基质固相分散萃取(M SPD)是一种基于SPE的改进的样品处理方法。其原理是将涂有各种聚合物(如C18)的单体固相萃取材料与样品一起研磨，得到半干混合物，将其作为填料装柱，再用各种溶剂洗柱，洗去待测物质。M SPD具有简单快速、样品和溶剂消耗低、对血液和各种动物组织等复杂样品的处理有显著优势。处理大量样品时，可以明显减少样品的前处理工作量，节约有机溶剂的使用量，降低污染[4]。赵善贞等[5]建立了基质固相分散萃取-同位素稀释-液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定水产品中的100种兽药，该方法加标回收率为70%~120%。
4磁性固相萃取
磁性固相萃取(M-SPE)技术，是以磁性或可磁化材料作为吸附基质。萃取过程中，磁性吸附剂不是
