·综述·
马蓝种质资源研究进展
周 正１
35英语，郭志英
１，２
，谭何新１，刘佳颖１，刁 勇２，张 磊１
（１．
第二军医大学药学院药用植物学教研室，上海２００４３３；２．华侨大学生物医学学院，福建泉州３６２０２１）
［基金项目］ 国家自然科学基金唱促进海峡两岸科技合作联合基金资助项目（Ｕ１４０５２１５）；第二军医大学大学生创新实践课题唱马蓝转录组测序数据分析及关键基因筛选（Ｆ２０１５０９４）
［作者简介］ 周 正，硕士研究生．研究方向：药用植物生物工程．Ｅ唱ｍａｉｌ：４４７９０９１８３＠ｑｑ．ｃｏｍ
［通讯作者］ 张 磊，博士，副教授，硕士生导师．研究方向：中药品
质调控研究．Ｅ唱ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｌｅｉ＠ｓｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
［摘要］ 马蓝，广泛分布于我国西南、华南及华东地区，是重要的爵床科药用植物。由其茎、叶加工而成的青黛，以福建产品质最佳，被誉为建青黛，是福建道地药材。马蓝的根入药称南板蓝根，与青黛一起同为枟中华人民共和国药典枠药材品种。青黛及其原植物马蓝的指标性成分靛玉红（ｉｎｄｉｒｕｂｉｎ）是具有抗白血病功效的中成药“黄黛片”及“当归龙荟丸”的主要活性成分。笔者主要综述了马蓝种质资源的分布、生物学特征、栽培技术和分子生物学等国内外研究进展，并提出了马蓝种质资源面临的主要问题，为马蓝及青黛的相关研究与应用提供参考依据。 ［关键词］ 马蓝；种质资源；生物学特性；栽培技术；遗传多样性
［中图分类号］ Ｒ２８２．７１ ［文献标志码］ Ａ ［文章编号］ １００６唱０１１１（２０１７）０１唱０００１唱０５［ＤＯＩ］ １０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６唱０１１１．２０１７．０１．００１
ＰｒｏｇｒｅｓｓｏｎｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａ（Ｎｅｅｓ）Ｂｒｅｍｅｋ
ＺＨＯＵＺｈｅｎｇ１，ＧＵＯＺｈｉｙｉｎｇ１，２，ＴＡＮＨｅｘｉｎ１，ＬｉｕＪｉａｙｉｎｇ１，ＤＩＡＯＹｏｎｇ２，ＺＨＡＮＧＬｅｉ１（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＢｏｔａｎｙ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，
ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＨｕａｑｉａｏＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｕａｎｚｈｏｕ３６２０００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｂａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａ，ｗｉｄｅｌｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄｉｎｔｈｅＳｏｕｔｈｗｅｓｔ，ＳｏｕｔｈｅｒｎａｎｄＥａｓｔｅｒｎｒｅｇｉｏｎｓｏｆＣｈｉｎａ，ｉｓａｎｉｍ唱ｐｏｒｔａｎｔｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｏｆＡｃａｎｔｈａｃｅａｅｆａｍｉｌｙ．ＩｎｄｉｇｏｍａｄｅｆｒｏｍｓｔｅｍａｎｄｌｅａｆｏｆＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａｉｎＦｕｊｉａｎｈａｓｔｈｅｂｅｓｔｑｕａｌｉｔｙｉｎＣｈｉｎａ，ａｎｄｉｓｋｎｏｗｎａｓ“ＪｉａｎＩｎｄｉｇｏｎａｔｕｒａｌｉｓ”，ｗｈｉｃｈｉｓｔ
ｈｅｇｅｎｕｉｎｅｍｅｄｉｃｉｎａｌｏｆＦｕｊｉａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ．ＴｈｅｒｈｉｚｏｍａｏｆＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄａｓｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｃａｌｌｅｄ“Ｎａｎｂａｎｌａｎｇｅｎ”，ｗｈｉｃｈｔｏｇｅｔｈｅｒｗｉｔｈｉｎｄｉｇｏｗｅｒｅｉｎｃｌｕｄｅｄｉｎｔｈｅ“Ｃｈｉ唱
ｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ”．Ｉｎｄｉｇｏａｎｄｉｔｓｏｒｉｇｉｎａｌｐｌａｎｔｂｏｔｈｃｏｎｔａｉｎｉｎｄｉｒｕｂｉｎ，ｗｈｉｃｈｈａｓａｎｔｉ唱ｃａｎｃｅｒａｃｔｉｖｉｔｙ．ＩｎｄｉｒｕｂｉｎｉｓａｎａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｏｆＨｕａｎｇｄａｉＰｉａｎａｎｄＤａｎｇｇｕｉＬｏｎｇｈｕｉＷａｎ，ｔｗｏｋｉｎｄｓｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｗｈｉｃｈｈａｖｅｂｅｅｎｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ唱ｌｙｕｓｅｄｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓｓｕｃｈａｓｃｈｒｏｎｉｃｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓｌｅｕｋｅｍｉａ．Ｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌａｄｖａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙｏｆＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓｗｅｒｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ．ＴｈｅｍａｉｎｐｒｏｂｌｅｍｓｉｎＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓｒｅｓｅａｒｃｈａｒｅｉｎｄｉｃａｔｅｄ，ｗｈｉ
ｃｈｃｏｕｌｄｐｒｏ唱ｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｆｏｒｔｈｅｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｙａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓ． ［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｂａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａ；ｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓ；ｂｉｏｌｏｇｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｇｅｎｅｔｉｃ
ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
药用植物马蓝Ｂａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａ（Ｎｅｅｓ）
Ｂｒｅｍｅｋ（Ｓｔｒｏｂｉｌａｎｔｈｅｓｃｕｓｉａ（Ｎｅｅｓ）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ）是爵床科多年生草本植物，适应性极广，喜温暖潮湿的气候环境，在中国华南、西南等地区常年生长，常在
秋冬季收获［１］
。青黛及其原植物马蓝中主要活性成
分靛玉红（ｉｎｄｉｒｕｂｉｎ）已成功用于治疗慢性粒细胞性
白血病等恶性肿瘤［２，３］
。中国医学科学院血液学研究所依据“泻肝经实火”的中医药理论，用中药方剂“当归龙荟丸”治疗白血病［４］，取得了一定疗效，经拆方及有效成分筛选，证实青黛中的靛玉红是抑制肿
瘤生长的有效成分［５］
；陈竺院士课题组的研究表明，黄黛片（Ｒｅａｌｇａｒ唱Ｉｎｄｉｇｏｎａｔｕｒａｌｉｓｆｏｒｍｕｌａ）可以治疗急性早幼粒细胞白血病，并指出复方中青黛组分
的主要活性成分为靛玉红［６］
。福建马蓝野生资源丰富且栽培历史悠久，其中莆田市仙游县书峰乡是高品质马蓝的道地原产地。福建产青黛因品质居全国同类产品前列，被冠以“建青黛”而驰名，其中靛蓝、靛玉红的含量远高于国家药典规定的２％及０．１３％
１
药学实践杂志 ２０１７年１月２５日第３５卷第１期
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ２５，２０１７
的标准［７］
。
药用植物活性成分的含量与种质、生态环境有着重要的关系，种质取决于其基因型，生态环境影响活性成分的形成和积累，二者是影响活性成分含量和组成的关键因素，也是决定中药材“道地性”的两个重要因素［８］。近年来由于非典、甲流以及禽流感等流行病频频肆虐发威，导致市场上马蓝中药材供不应求，市场上流通的南板蓝根、青黛药材的质量参
差不齐［９，１０］
；另一方面老百姓对野生马蓝药材的掠夺性开发，马蓝的种质资源保护和驯化栽培没有得到重视，道地马蓝的优质种质资源正面临流失、退化
和灭绝的危险［１１］
。地域性地理环境只是形成道地药材的外因，优质种质资源才是形成道地药材的内因［１２］，因此亟需开展马蓝种质资源的研究，科学地指导优质马蓝的栽培生产，为马蓝育种提供可靠的物质基础，以确保马蓝的生物多样性、资源的可持续利用以及培育优质的马蓝种质。１ 马蓝的本草考证
“蓝”最早记载于枟诗经枠，谓：“终朝采蓝，不盈一
襜”。蓝最早是用来做染料的，枟礼记·月令枠［１３］
：“仲夏之月，令民毋艾蓝以染”。马蓝一名最早见于春秋战国时期，枟尔雅·释草枠：“箴，马蓝”。因为整个文化中心的南移，马蓝的应用逐渐增多，以马蓝为主要来源，加工青黛、靛蓝（染料用）等，道地产地在福建［１４］。李时珍在枟本草纲目枠中是这样记载的：“蓝凡五种，各有主治，惟蓝实专取蓼蓝者。蓼蓝，叶如蓼；菘蓝，叶如白菘；马蓝，叶如苦荬；吴蓝，长茎如
蒿而花白色；木蓝，长茎如决明……”［１５］
。
综上所述，各种“蓝”植物的品种非常复杂，除马蓝外，还有菘蓝、蓼蓝、木蓝等植物在不同历史时期均被称作“蓝”，以上各种“蓝”植物的根茎均可作为板蓝根入药，具有清热解毒、凉血等功效，导致历代本草对该“蓝”的记述各异以及“蓝”药用品种混乱。此外，亦与我国幅员广阔，各地用药习惯不一有很大
关系［８］轮滑教学
。马蓝的中文名称在文献中有马蓝或板蓝，属的分类有板蓝属Ｂａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓ或紫云菜属
Ｓｔｒｏｂｉｌａｎｔｈｅｓ［１６］
，这给市场、临床医生以及普通百姓带来了困惑，甚至在行业内和学术界也不完全明确，因此亟需规范“蓝”的名称来历。２ 马蓝种质资源的分布
马蓝药用资源丰富，全世界主要分布在印度东
北部、孟加拉、缅甸、泰国等地至中南半岛［１７］
，其分布范围约在纬度２１～２６°Ｎ，经度９９～１２０°Ｅ，海拔１０００ｍ以下，多生长在坡向向南或西南，野生马蓝常见于较低海拔的山谷、林下和溪边等地的阴湿处［１８］。福建仙游县海拔３００～５００ｍ，地势以中山、低山和丘陵为主，全年无霜期３４０ｄ，年平均气温１６～２８℃，年平均降雨量１７００～２４００ｍｍ，水量丰
富，林源茂密，是福建省马蓝的主要栽培地区［１９］
，福建马蓝资源分布状况以及生境如表１所示。３ 马蓝生物学特性
从生物学角度看，道地药材是特定基因型的基源植物，在特定的生态环境下，其次生代谢过程发生
表１ 福建马蓝不同种源地的概况［１９唱２１］
种源地
经纬度
海拔（ｍ）生境莆田市仙游县象溪乡１１８°４１′４３．６７″Ｅ，２５°３２′２４．１６″Ｎ６１３山谷基地种植莆田市仙游县书峰乡１１８°３９′５１．００″Ｅ，２５°２５′３２．１２″Ｎ３７０山谷基地种植莆田市涵江区大洋乡１１９°０４′５９．０３″Ｅ，２５°４３′０５．９８″Ｎ５００山谷基地种植莆田市涵江区新县镇１１９°０３′３１．０４″Ｅ，２５°３９′１５．４０″Ｎ６００山谷基地种植莆田市仙游县龙华镇
１１８°３９′２１．４１″Ｅ，２５°２０′３４．５０″Ｎ６５山谷基地种植泉州市永春县１１８°１７′４５．１１″Ｅ，２５°１９′２７．０９″Ｎ２５３山谷林下三明市大田县济阳乡１１７°５９′２７．０１″Ｅ，２５°３３′３３．９４″Ｎ７８２山上林下
福州市永泰县赤壁景区１１９°０５′１５．１０″Ｅ，２５°５１′２７．２８″Ｎ５５０黑壤、山坡、常绿阔叶林下福州市永泰县青云山景区
１１８°５７′３６．８７″Ｅ，２５°４６′５５．５９″Ｎ４００黑壤、常绿阔叶林下福州市永泰天门山１１９°０２′４１．３９″Ｅ，２５°４９′２７．３４″Ｎ３５２山中溪谷背阴处福州市永泰县塘前乡岭头村１１９°０８′２９．２８″Ｅ，２５°４９′２３．４７″Ｎ３００黑壤、常绿阔叶林下福州市闽侯县旗山景区１１９°１１′４９．８５″Ｅ，２６°０１′１９．１２″Ｎ６００黑壤、瀑布旁常绿阔叶林下
福州市闽侯县南屿１１９°０９′４２．３５″Ｅ，２５°５９′２６．２３″Ｎ７８常绿阔叶林下福州市闽清县黄楮林景区
１１８°４１′４０．６８″Ｅ，２６°１７′４４．３３″Ｎ３００林下路边漳州市南靖县和溪１１８°１７′４５．２４″Ｅ，２５°１９′２７．２２″Ｎ２７５林下路边漳州市乐土雨林１１８°１７′４５．１９″Ｅ，２５°１９′２７．１７″Ｎ２６０极阴湿环境龙岩市新罗区
家常菜美食图片１１８°１７′４５．２０″Ｅ，２５°１９′２７．１８″Ｎ
４１０
山中溪谷背阴处
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药学实践杂志 ２０１７年１月２５日第３５卷第１期
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ２５，２０１７
变化，导致某些药用成分含量显著增加的产物。建青黛之所以成为道地药材，一定与其所在的生态环境密切相关。为了能够更好地指导马蓝中药材规范化种植（ＧＡＰ），以下对马蓝生物学特性，包括生态特征、土壤、营养特性、光照等进行总结。
３．１ 生物学特征 马蓝为双子叶多年生草本植物，基部木质化，高可达１ｍ，多分枝；叶对生，叶柄长１～４ｃｍ，呈椭圆状长圆形或卵形，长７～１５ｃｍ，宽２．５～７ｃｍ，顶端短渐尖，基部渐狭细，边缘有粗齿，干时茎叶呈蓝色或墨绿色；幼叶脉上有柔毛，侧脉５～６对。花无梗，花排成顶生或腋生的穗状花序、对生，花期为１１～１２月；花萼５裂片，裂片短阔，急尖；花冠淡紫色，漏斗状；花冠筒近中部弯曲而下部变细，顶端浅凹；蒴果长约２．５ｃｍ，有４颗种子［１８］。３．２ 土壤适宜性及营养特性 野生马蓝多数生长在潮湿、温暖的山地和阴沟中。为保证栽培马蓝的品质，大田应选具有一定通透性的红壤土或沙质土壤、水资源清澈无污染、土壤深厚、土质肥沃的山区或坝区，尤其适合马蓝的种植与靛蓝的生产［２２，２３］。肥料在中药材种植中起着重要的作用，不同种类的肥料对中药材的产量和有效成分含量有较大影响［２４］。研究表明氮、磷、钾肥料的施用量直接影响马蓝鲜重，其中氮肥对增产效果尤为显著，施加氮肥能够显著提高靛玉红的含量。为了培育优质、优良的马蓝种苗需在不同生长时期根据生长情况适量使用不同的肥料，生长旺盛期需大量氮肥，酌情使用尿素及微量元素肥料，但绝对不能使用硝态氮肥［２５，２６］。
３．３ 光合特性 陈瑞芳等［２７］对马蓝的光合特性进行研究，发现７月份马蓝净光合速率以及
表观量子效率值明显低于１０月份，而７月份光补偿点和光饱和点较１０月份的值高，表明夏季高温、强光照射条件下马蓝出现午休现象，因此秋季是马蓝生长的旺盛季节，更有利于马蓝的快速生长及营养物质的累积。也有研究显示马蓝叶片的光合速率日变化均呈双峰型曲线，与自然光照相比，遮荫条件下马蓝通过提高叶片叶绿素ａ／ｂ含量，降低光补偿点，提高光系统中光反应中心光化学活性，增强系统的光能转换效率来提高光合速率，以弥补弱光条件下光能的不足［２８］。可见马蓝对光的需求很低，这和覃军等［２９］对南大青叶的报道一致，马蓝适宜于３０％自然光照条件下的间作套种或林下栽培，说明马蓝有一定耐荫能力，适当遮阴有利于降低光抑制强度和加强光合系统的光化学恢复能力，提高反应中心光化学活性，进而增强马蓝叶片的光合能力［２８］。４ 栽培技术研究
４．１ 种子繁殖 魏道智课题组［３０］在１１月下旬选取生长健壮、无病虫害的马蓝植株，培育４～５个月后采集成熟种子，然后晒干，通风干燥处贮藏备用。播种时先用３０～４０℃温水浸泡种子４ｈ，让其吸饱水后捞出，晾干水分后拌少量细沙均匀撒播在苗床或大田中，１５～２０ｄ可齐苗，苗长至约８～１０ｃｍ时可定植到生产大田。由于种子繁殖获得的苗生长较缓慢，但能保持原植物属性，多作为保种育苗的母株用［２２］。
４．２ 扦插繁殖 目前马蓝的种植以扦插繁殖为主要繁殖方式：选取一年或二年的健壮无病害马蓝，从顶端往下剪取木质化程度较低的嫩枝部分，剪成７～１０ｃｍ长的插穗，育苗前先在畦上浇少
量的水，隔天后松土，苗床面宽１２０ｃｍ，沟宽３０ｃｍ，沟深不低于２５ｃｍ。插苗采用密集扦插，开沟后，将插苗斜放沟内，行距为２０～２５ｃｍ，株距２～３ｃｍ，掩土至最下部一个节位，压实，喷水。通过四因素随机区组设计研究福建马蓝的越冬扦插繁殖方法，得出马蓝扦插枝条以６芽的最好，１００～１５０ｍｇ／Ｌ的萘乙酸浓度更有利于生根及植株的生长，以４０株／ｍ２的栽培密度最佳［２２，３０］。
４．３ 间作套种 间作套种模式是中国传统精耕细作农业的重要组成部分，其目的是在有限的时间内、土地面积上收获到２种以上作物的经济产量，降低逆境和市场风险［３１］。马蓝对温度比较敏感，宜在２２～３０℃温度的自然环境中生长发育，马蓝在夏天土壤温度长时间超过３５℃时其叶会枯黄、脱落，因此，马蓝种植地应选择在遮阴度为５０％～７０％的针叶林下［３２］。仙游县辉黄青黛专业合作社在四黄村建立了枇杷园套种青黛优质栽培技术示范基地，同比单纯种植青黛以及单纯种植枇杷，每公顷的产值效益大大增加，因此，套种青黛高产栽培技术是一项有效利用山区土地资源，促进农业增产、农民增收的好路子［３３］。龙菊生等［３２］在山间开阔平地采用玉米套种方式进行露地种植研究发现，一定时限和一定强度的直射光照有利于栽培马蓝的生长发育和有效成分的形成和积累，采用玉米为遮挡物进行套种，既满足了对光照时间的要求又提供了阴凉的条件。４．４ 组织培养 以马蓝未成熟种子为原料开展马蓝组织培养的研究，对种子萌发培养基、继代增殖与分化培养基、生根培养基的培养效果进行比较，发现氯吡脲（ＫＴ）对种子萌发具有显著作用；６唱苄氨基腺嘌呤（６唱ＢＡ）和３唱吲哚丁酸（ＩＢＡ）结合，可高效诱导
３
药学实践杂志 ２０１７年１月２５日第３５卷第１期
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ２５，２０１７教师转正申请书
对创业的看法外植体芽的生长，直接产生不定芽，产生的丛生芽易于分切，便于进行继代培养；以６唱ＢＡ和萘乙酸（ＮＡＡ）组合作继代增殖与分化培养基，对促进丛生芽形成生长效果最好，增殖倍数达５～６倍；ＩＢＡ与活性炭或者含氮量高的营养剂ＭＡＰ组合作生根培养基效果最优，其生根率可达１００％［３４，３５］。马蓝传统的栽培方式需要较多的扦插枝条，而且繁殖速度慢，种质退化严重，为了保障优质马蓝品种的培育与规模化种植，应大力提倡发展植物组织培养技术，利用悬浮细胞、愈伤组织或者毛状根等组织培养物来累积马蓝中的重要次生代谢产物，如靛蓝以及靛玉红。
５ 马蓝分子生物学研究
近年来，随着分子生物技术的不断发展，对马蓝种质资源的研究已深入到分子水平。随机扩增多态性ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ，
ＲＡＰＤ）技术是１９９０年由Ｗｉｌｌｉａｍｓ等发展起来的一项ＤＮＡ分子标记技术［３６］，
在马蓝遗传多样性应用较多。以不同居群的马蓝个体为研究材料，对马蓝基因组ＤＮＡ的提取以及ＲＡＰＤ唱ＰＣＲ反应体系进行优化，建立了马蓝ＲＡＰＤ稳定可靠的反应体系，另采用ＲＡＰＤ分子标记方法从中筛选出１１个引物，得到１０６个条带，多态性条带８８个，占７７畅３６％，实验结果反映了马蓝种质丰富的遗传多态性，不同自然居群的马蓝资源在分子水平上存在较明显的遗传差异［１１，３７，３８］。向小亮等［３９］研究外源水杨酸（ＳＡ）对马蓝叶片中蛋白水平表达的影响，表明ＳＡ可显著增强马蓝叶片中与能量合成、细胞生长、机体修复和信号传递等代谢相关蛋白的表达，降低内源乙烯合成相关蛋白的表达水平，增强了马蓝植物体的逆境抵抗力和修复能力。也有研究［４０］显示了不同浓度的茉莉酸甲酯（ＭｅＪＡ）对马蓝生理效应以及蛋白质表达的影响，茉莉酸甲酯处理能够促进马蓝次生代谢，增加叶片中有效成分靛蓝和靛玉红的含量。
德国慕尼黑大学Ｚｅｎｋ教授课题组［４１］首先进行了马蓝体内吲哚酚衍生物次生代谢研究。他们通过同位素标记方法，发现吲哚酚衍生物生物合成的前体是吲哚；又从马蓝中分离到一种酶（吲哚酚唱尿苷二磷酸葡萄糖（ＵＤＰＧ）唱葡糖基转移酶），负责将葡萄糖从尿苷二磷酸葡萄糖转移到吲哚酚，产生吲哚酚苷。在嫩叶中，吲哚唱３唱甘油磷酸分解代谢成为吲哚，吲哚被氧化成吲哚酚。因吲哚酚非常不稳定，植物尿苷二磷酸葡萄糖酶可通过糖基化作用，将吲哚酚转化为糖苷类物质（吲哚酚苷和Ｉｓａｔａｎ），避免其自发氧化。在老叶或受到外界影响时，这些糖苷类物质通过水解酶分解，形成吲哚酚，继而氧化产生靛蓝。吲哚酚进一步氧化可转换为靛红。
总之，目前对于马蓝分子的研究还处于初级阶段，对马蓝活性成分靛玉红、靛蓝等吲哚类生物碱的次生代谢研究还不清楚，为了将来对药用植物马蓝的种质进行优化，还需要对马蓝药效成分相关的基因以及药效性状基因的调控机制展开深入研究。６ 结语与展望
马蓝栽培已有４００多年历史，但却一直没有形成系统、科学的方法，导致马蓝因过度采挖种质资源逐渐消失，可持续发展和利用将难以为继。为了保护马蓝优异种质，一方面要注重对野生马蓝种质资源的原生境保护工作，建立马蓝地方种质资源库，防止人类活动对野生马蓝种质资源的破坏，保护其独特的基因资源，另一方面还必须按照中药材规范化种植的要求发展马蓝的人工ＧＡＰ栽培，在保证其药效和有效成分含量的情况下，增加马蓝的产量，为马蓝优异种质资源研究奠定必要的基础。
近几年有大量文献报道了对马蓝源性中药材的药理、药效、天然药物化学的研究，确定了生物碱、有机酸等次生代谢产物为其药效成分，特别是在青黛中发现的抗癌药物靛玉红，更进一步证明有效成分才是马蓝药效性状的基础。道地药材是优质的中药材，在长期的生存竞争及与自然界双向选择的过程中，优质种质（基因型）资源才是形成道地药材的内因，有效成分生物合成的功能基因的适时适量表达，是保障和提升马蓝品质的关键。因此，有必要深入开展马蓝分子生物学的研究，阐明相关基因在吲哚类生物碱物质合成乃至其他次生代谢产物的合成、积累及调控过程中的作用，优化栽培马蓝在药效性状方面品质的工作，为优质马蓝的育种奠定理论支持。
【参考文献】
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ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，２００５，１０２（１７）：５９９８唱６００３．
（下转第１６页）
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１５（１７）：４５９６唱４５９９．
［１１］ ＨｕＨＧ，ＷａｎｇＳＺ，ＺｈａｎｇＣＭ，ｅｔａｌ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｉｎ唱ｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｍａｔｒｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｔｏｗａｒｄｓｐｒｏ唱ｉｎｆｌａｍｍａ唱ｔｏｒｙｃｙｔｏｋｉｎｅｓ［Ｊ］．ＢｉｏｏｒｇＭｅｄＣｈｅｍＬｅｔｔ，２０１０，２０（２４）：７５３７唱７５３９．
［收稿日期］ ２０１６唱０７唱２７ ［修回日期］ ２０１６唱１１唱２５
［本文编辑］ 顾文华
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看书的拼音
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3月14日是什么星座１２９９唱１３０１．
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［３３］ 蔡益航，吴建宇．枇杷园套种青黛高产栽培技术［Ｊ］．现代农业科技，２０１３，（１９）：１０３唱１０５．
［３４］ 张丽梅，陈菁瑛，陈 熹．马蓝未成熟种子的组织培养［Ｊ］．植物生理学通讯，２００７，４３（３）：５２１．
［３５］ 孙云玲，姚洪源，田华林，等．马蓝组培快繁技术研究［Ｊ］．现代农业科技，２０１０，（９）：１０２唱１０３．
［３６］ 朱永宏，李学敏，韩宝玲．ＲＡＰＤ技术在中药材鉴定中的应用进展［Ｊ］．中草药，２００７，３８（９）：１４４３唱１４４４．
［３７］ 黄玉吉，陈菁瑛．马蓝种质资源的ＲＡＰＤ分析［Ｊ］．中药材，２０１０，３３（２）：１８３唱１８６．
［３８］ 于英君，肖井仁，姜 颖，等．菘蓝和马蓝基因组ＤＮＡＲＡＰＤ指纹图谱的建立［Ｊ］．中医药学报，２０１３，４１（６）：２６唱
２７．
［３９］ 向小亮，宁书菊，黄延龄，等．外源水杨酸对马蓝叶片中蛋白水平表达的影响［Ｊ］．应用生态学报，２０１０，２１（３）：６８９唱
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［４０］ 龚小贵．不同浓度茉莉酸甲酯对马蓝生理与蛋白质的影响［Ｄ］．福州：福建农林大学，２０１１．
［４１］ ＭａｒｃｉｎｅｋＨ，ＷｅｙｌｅｒＷ，Ｄｅｕｓ唱ＮｅｕｍａｎｎＢ，ｅｔａｌ．Ｉｎｄｏｘｙｌ唱ＵＤＰＧ唱ｇｌｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｆｒｏｍＢａｐｈｉｃａｃａｎｔｈｕｓｃｕｓｉａ［Ｊ］．
Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０００，５３（２）：２０１唱２０７．
［收稿日期］ ２０１６唱０１唱０４ ［修回日期］ ２０１６唱０６唱２０
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