rboGM-CSF结合庆大霉素治疗奶牛隐性乳房炎试验
傅军科;张辉;孙延鸣茜根散
【摘 要】利用rboGM-CSF(500 μg/15 mL)结合庆大霉素(15 mL)进行奶牛隐性乳房炎治疗试验.乳内同时灌注rboGM-CSF与庆大霉素,治疗期为8 d.试验结果显示,单独使用rboGM-CSF对轻度隐性乳房炎有一定疗效,但对重度隐性乳房炎效果不佳;联合庆大霉素灌注后,能明显提高二者单独使用的治愈率.说明rboGM-CSF具有潜在的治疗轻度奶牛乳房炎的功效.
【期刊名称】《西北农业学报》
【年(卷),期】2010(019)001
【总页数】4页(P26-29)
前言是什么意思【关键词】rboGM-CSF;庆大霉素;隐性乳房炎习俗是什么
【作 者】傅军科;张辉;孙延鸣
【作者单位】石河子大学,动物科技学院,新疆石河子,832003;石河子大学,动物科技学院,新疆石河子,832003;石河子大学,动物科技学院,新疆石河子,832003
【正文语种】中 文
【中图分类】Q789
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GMCSF)主要由T细胞和巨噬细胞产生,活化的 T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核吞噬细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等也可产生GM-CSF[1]。GMCSF具有种属特异性,其主要作用是能够诱导粒细胞前体和巨噬细胞前体呈集落性生长(即形成集落);对粒细胞系和单核细胞系的维持存活和诱导增殖;增强单核巨噬细胞的吞噬、细胞毒和杀伤肿瘤细胞的作用,促进嗜酸性粒细胞的杀伤活性[2-4];诱导树突状细胞成熟,并向疫苗注射部位集聚,使其具有明显的增强疫苗免疫反应的作用[5]。随着GM-CSF研究的持续升温,重组人GM-CSF已用于人医临床,并取得了良好的治疗效果[6]。本研究旨在利用GM-CSF的生物学功能,结合抗菌药与中药对奶牛乳房炎治疗的新方法进行初步研究。
1 材料与方法
1.1 材料与主要仪器
纯化的rboGM-CSF(由石河子大学动物科技学院实验室前期工作表达并纯化);硫酸庆大霉素注射液(江西制药厂);奥林巴斯显微镜(德国)。
1.2 环境条件
试验时间为 3月到 3月中旬,平均气温(10.0℃左右)和相对湿度(40%左右)都比较稳定。
同样将试验二组奶牛随机分为4组,每组6头,第一组乳房灌注15 mL生理盐水,第二组乳房灌注15 mL庆大霉素,第三组乳房灌注15 mL rboGM-CSF(500μ g/15 mL),第四组乳房灌注15 mL rboGM-CSF(500μ g/15 mL)+15 mL 庆大霉素。灌注后按摩乳房2 min。
1.3 试验牛的管理与选择
于石河子141团、147团牛场进行试验,每头奶牛(新西兰奶牛)均按照牛场日常饲养方式饲养,每天适时在运动场活动。
选用处于泌乳期的新西兰奶牛48头,每头均有2个以上的乳池存在隐性乳房炎,其中24头隐性
乳房炎患牛(50万/mL SCC＜100万/mL)设为试验一组;另外24头隐性乳房炎患牛(100万/mL＜SCC＜300万/mL)设为试验二组。
1.4 试验方案
试验前3 d为观察期,每天下午挤完奶后,登记奶产量,检测奶牛体温、采取奶样(用于体细胞计数),然后进行治疗试验,每天灌注一次。
将试验一组奶牛随机分为4组,每组6头,第一组乳房灌注15 mL生理盐水,第二组乳房灌注15 mL庆大霉素,第三组乳房灌注 15 mL rboGM-CSF(500μ g/15 mL),第四组乳房灌注15 mL rboGM-CSF(500μ g/15 mL)+15 mL 庆大霉素。灌注后按摩乳房2 min。
1.5 牛奶SCC计数
1.5.1 改良SCC计数法[7] 样品稀释液(亦即染色液)的配制:每毫升生理盐水中滴加2%碘酊3滴,混匀即得,临用前配制。奶样的稀释:将奶样用稀释液稀释至原体积的20倍(一般可取0.1 mL奶样,加1.9 mL稀释液),颠倒混匀。
把盖玻片覆盖于细胞计数板的计算室上,用塑料吸管取少量已混匀的稀释后奶样于计算室内,静置3～5 min,即可置于显微镜下计数。乳汁中含大量脂滴,悬浮于视野中,但脂滴与体细胞在形态上完全不同,容易辨别,不影响计数。相比细胞而言,脂滴直径较细胞小很多、内部无结构、折光率均匀,色淡。
豆腐脑卤计算公式:体细胞数=4个大格细胞总和/4×稀释倍数×104。
1.5.2 隐性乳房炎判定方法 正常牛乳中含有一定数量体细胞,通常细胞数量少于10万/mL。当每毫升牛奶中的体细胞数超过20万,就表明乳腺已受到感染;超过50万,表明已发生隐性乳腺炎;超过100万,表明可能患有临床型乳腺炎[8]。值得注意的是,分析牛奶体细胞数还要考虑奶牛的胎次和泌乳月,因其体细胞数随胎次和泌乳月的增加而增加。
数学作业批改评语2 结果与分析
2.1 体温与日产奶量
试验前3 d为观察期。图1为试验前后试验一组奶牛体温变化情况。
图1 乳房灌注前后试验一组体温变化情况Fig.1 Changes in rectal temperature following intramammary injections in mastitis cows of the first experiment group
母亲的心阅读答案生理盐水组体温平均维持在37.7～38.2℃;庆大霉素组体温平均维持在 37.7～38.1℃;rboGM-CSF组体温起初维持在37.8℃,灌注后最高平均上升0.6℃,治疗结束时又恢复到治疗前水平;rboGM-CSF结合庆大霉素组体温起初维持在37.9℃,灌注后最高平均上升0.3℃,治疗结束时下降到治疗前水平。
图2 乳房灌注前后试验二组体温变化情况Fig.2 Changes in rectal temperature following intramammary injections in mastitis cows of the cond experiment group
图2为试验前后试验二组奶牛体温变化情况。生理盐水组体温平均维持在 38.2～38.5℃;庆大霉素组体温平均维持在38.4～38.5℃;rboGM-CSF组体温起初维持在38.5℃,灌注后最高平均上升0.9℃,治疗结束时又恢复到治疗前水平;rboGM-CSF结合庆大霉素组体温起初维持在38.1℃,灌注后最高平均上升了0.6℃,治疗结束时下降到治疗前水平。
从图3可以看出,生理盐水组日均产奶量变化不大;庆大霉素组日均奶量虽有上升趋势,但到了
治疗后期日均奶量却低于治疗前水平;rboGMCSF组在治疗结束时平均上升0.6 kg;rboGMCSF+庆大霉素组在治疗结束时平均上升了0.7 kg。
图3 治疗前后隐性乳房炎奶牛日均产奶量变化Fig.3 Changes in daily milk yield following intramammary injections in all subclinical mastitis cows
2.2 SCC计数
2.2.1 试验一组隐性乳房炎奶牛治疗结果 图4为试验一组隐性乳房炎奶牛治疗前后的SCC总体的变化情况。
女生头型
生理盐水组奶牛乳中的SCC,在试验前1～3 d体细胞维持在80.1万/mL,灌注后无明显变化。庆大霉素组奶牛乳中的SCC,在试验前1～3 d体细胞维持在76.5万/mL,试验后第4天,体细胞数平均下降到50万/mL,但在第8天体细胞数又回升到56.2万/mL,其中2头牛体细胞计数处于正常范围(SCC＜50万/mL),治愈率为33%。
rboGM-CSF组奶牛乳中的SCC,试验前1～3 d体细胞数平均在80.3万/mL,试验后7 h体细胞数略有升高,灌注后第2天,平均达到了106万/mL,与生理盐水组相比差异显著(P＜0.01),随后
4～8 d体细胞数有明显的下降,第8天,平均降至41.3万/mL,与生理盐水组相比差异显著(P＜0.01)。其中3头牛体细胞计数处于正常范围(SCC＜50万/mL),治愈率50%。
rboGM-CSF+庆大霉素组奶牛乳中的SCC,试验前1～3 d体细胞数平均为84.4万/mL,试验后第2天达到94万/mL,随后4～8 d体细胞数也有明显(P＜0.01)下降,第8天,平均降至36.2万/mL,与生理盐水组相比差异显著(P＜0.01)。其中 5头牛体细胞计数处于正常范围(SCC＜50万/mL),治愈率为83.3%。
2.2.2 第二组隐性乳房炎奶牛治疗结果 从图5可以看出,试验二组隐性乳房炎奶牛治疗前后的SCC总体的变化情况。
图4 治疗前后试验一组隐性乳房炎奶牛SCC变化Fig.4 Change in somatic cell count following intramammary injections in the first experiment group subclinical mastitis cows
图5 治疗前后试验二组隐性乳房炎奶牛SCC变化Fig.5 Change in somatic cell count following intramammary injections in the cond experiment group subclinical mastitis cows
生理盐水组奶牛乳中的SCC,试验前1～3 d体细胞数维持在257万/mL,试验后无明显变化。庆大霉素组乳中SCC,试验前1～3 d体细胞数平均为276万/mL,试验后第4天体细胞数平均下降到118.2万/mL,与生理盐水组相比差异极显著(P＜0.01)。但到第8天体细胞数又回升到139.2万/mL,其中仅1头牛体细胞计数处于正常范围(SCC＜50万/mL),治愈率为16.6%。
rboGM-CSF组奶牛乳中SCC,试验前1～3 d体细胞数平均在258万/mL,试验后1～2 d略有上升,达到288万/mL,随后几天体细胞数有平缓下降趋势,第8天与试验前体细胞数基本一致,平均达到266万/mL,单独使用rboGM-CSF治疗效果不佳。
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